Антигенная структура вирусов гриппа и оспы. Вирусные антигены

Химический состав вируса.

Морфология.

Геном.

Таксономия.

Историческая справка.

Вирус краснухи.

Вирус бешенства.

Вирус клещевого энцефалита.

Клещевой энцефалит (синонимы: таежный энцефалит , дальневосточный менингоэнцефалит, клещевой энцефаломиелит, русский весенне-летний менингоэнцефалит , tick-borne encephalitis – рожденный клещом) – это острое вирусное заболевание, характеризующееся интоксикацией, поражением серого вещества головного и спинного мозга, приводящее к развитию вялых парезов и параличей.

Экспедиции 1937-44 гг. , руководимые Л.А. Зильбером , Е.Н. Павловским и И.О. Рогозиным (в составе экспедиций также работали видные советские вирусологи – М.П. Чумаков, В.Д. Соловьев, Е.Н. Левкович) выделили КЭ в отдельную нозологическую форму, выявили штаммы вирусов-возбудителей клещевого энцефалита, установили роль иксодовых клещей как переносчиков, изучили эпидемиологию и патогенез КЭ, разработали методы специфической профилактики и лечения болезни.

Семейство – Flaviviridae (от лат. flava – желтый, название получили от желтой лихорадки, возбудитель которой является типичным представителем этой группы)

Род – Flavivirus (включает 67 представителей)

Тип – различают два основных типа вируса клещевого энцефалита: западный=европейский=лесной (переносчики - клещи Ixodes ricinus ) и дальневосточный=азиатский=таежный (переносчики - клещи Ixodes persulcatus ), которые отличаются по антигенному составу и тяжести клинического течения, вызываемых ими форм КЭ. В Греции из клещей Rhipicephalus bursa был выделен третий тип вируса КЭ.

Геном вируса КЭ представлен одноцепочечной линейной (+) РНК.

Тип симметрии нуклеокапсида – кубический .

Форма вирусов сферическая .

Размер – 40-50 нм .

Организация – сложная , состоит из:

· РНК , покрытой капсидом , представленным белком С ;

· белка М , связывающего нуклеокапсид с суперкапсидом;

· внешней оболочки (суперкапсида ), на поверхности которого расположены шипики (гликопротеин Е) – гемагглютинины .

РНК – 5,5%, белки – 60%, липиды – 30%, углеводы – 6,5%

1. Групповой АГ – комплементсвязывающий, связан с белками нуклеокапсида (выявляется в РСК);

2. Типовой АГ – гемагглютинины суперкапсида (выявляется в РН, РТГА с птичьими эритроцитами – уток, гусей, петухов, цыплят).

Особенности репродукция вируса .

1. Адсорбция на фосфолипидных и гликопротеидных рецепторах клеток.

2. Проникновение в клетку путем рецепторного эндоцитоза (виропексиса) с образованием фагосомы.

3. Слияние вирусной оболочки со стенкой вакуоли, при этом вирусная РНК выходит в цитоплазму.

4. Эклипс-фаза – репликация РНК и синтез вирусных белков в цитоплазме клетки (идёт медленно ≈40-60 часов).

5. Сборка нуклеокапсида на ЭПС клетки, вирусы находятся в вакуолях (образуют кристаллоподобные вкючения).

6. Выход из клетки путем почкования, присоединение суперкапсида при выходе из клетки (клетка длительное время остается жизнеспособной).

Частная медицинская вирусология

Ответы с указанием учебника Борисова приведены исходя из электронной версии, которую можно скачать в разделе «Учебники.

1. Возбудители ОРВИ. Вирусы гриппа и парагриппа. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

Таксономия и классификация: РНК-содержащие вирусы. I семейство — Paramyxoviridae включает вирусы парагриппа человека (5 серотипов) и респираторно-синтициальный вирус (PC);

II семейство — Picomaviridae включает 7 серотипов энтеровирусов Коксаки и ECHO, поражающих дыха-тельные пути, и 120 серотипов риновирусов;

III семейство — Reoviridae вклю-чает 3 серотипа, вызывающих заболевания респираторного и желудочно-кишечного трактов;

IV семейство — Coronaviridae включает 3 серотипа, также поражающих дыхательный и желу-дочно-кишечный тракты.

Структура : . Средние размеры, сфери-ческую, палочковидную или нитевидную формы. Большая часть возбудителей ОРВИ содержит однонитчатую РНК, кроме реовирусов, обладающих двунитчатой РНК, и ДНК-содержащих аденовирусов. Некоторые из них окружены суперкапсидом.

Антигенная структура : слож-ная. У вирусов каждого рода есть общие антигены; вирусы имеют и типоспецифические антигены, по которым можно проводить идентификацию возбудителей с определением серотипа. В со-став каждой группы вирусов ОРВИ входит различное количество серотипов и серовариантов. Большинство вирусов ОРВИ обладает гемагглютинируюшей способностью. РТГА основана на блоки-ровании активности гемагглютининов вируса специфическими антителами.

Культивирование : Оптимальная модель для культивирования— культуры клеток. Для каждой группы вирусов подобраны наиболее чувс-твительные клетки (для аденовирусов —эмбриональные клетки почек; для коронавирусов — эмбриональные клетки и клетки трахеи). В зараженных клетках вирусы вызывают ЦПЭ(цитопатический эффект). Культуры клеток исполь-зуют также при идентификации возбудителей с цитолитической активностью (например, аденовирусов). Для этого применяют так на-зываемую реакцию биологической нейтра-лизации вирусов в культуре клеток (РБН или РН вирусов). В ее основе — нейтрализация цитолитического действия вирусов типоспецифическми антителами.

Иммунитет: вируснейтрализующие специфические IgA (обеспечивают мес-тный иммунитет) и клеточный иммунитет. Местная выработка а-интерферона, появление которого в но-совом отделяемом приводит к значительно-му снижению количества вирусов. Важной особенностью ОРВИ является формирование вторичного иммунодефицита. Постинфекционный иммунитет - нестойкий, непродолжительный, типоспецифический. Большое число серотипов и разнообразие вирусов - высокая частота повторных заболеваний.

Материал для исследования носоглоточная слизь, мазки-отпечатки и смывы из зева и носа.

Экспресс-диагностика. Обнаруживают ви-русные антигены в инфицированных клетках. Применяют РИФ (прямой и непрямой мето-ды) с использованием меченных флюорохромами специфических антител, а также ИФА. Для труднокультивируемых вирусов исполь-зуют генетический метод (ПЦР).

Вирусологический метод. Индикацию вирусов в зараженных лабораторных моделях проводят по ЦПЭ, а также РГА и гемадсорбции (для ви-русов с гемагглютинирующей активностью), по образованию включений (внутриядерные включения при аденовирусной инфекции, цитоплазматические включения в околоядер-ной зоне при реовирусной инфекции и т. п.), а также по образованию «бляшек», и «цветной пробе». Идентифицируют вирусы по анти-генной структуре в РСК, РПГА, ИФА, РТГА, РБН вирусов.

Серологический метод. Противовирусные антитела исследуют в парных сыворотках больного, полученных с интервалом в 10 дней. Диагноз ставят при увеличении тит-ра антител как минимум в 4 раза. При этом определяется уровень IgG в таких реакциях, как РБН вирусов, РСК, РПГА, РТГА.

Лечение : эффективного этиотропного - нет; неспецифическое - а-интерферон, оксолин (глазные капли), при вторичной бактериальной инфекции - антибиотики. Основное лечение - симптоматическое/патогенетическое. Антигистаминные препараты.

Профилактика: неспецифическая - противоэпидемич. мероприятия. Специфической - нет. Для профилактики аденовирусов - пероральные живые тривалентные вакцины.

2. Вирусы гриппа и парагриппа, их характеристика. Микробиологическая диагностика, специфическая профилактика.

Таксономия: семейство - Orthomyxoviridae, род Influenzavirus. Раз-личают 3 серотипа вируса гриппа: А, В и С.

Структура вируса гриппа А. Возбудитель гриппа имеет однонитчатую РНК, состоящую из 8 фрагментов. Подобная сегментарность позволяет двум вирусам при взаимодействии легко обмениваться генетической информацией и тем самым спо-собствует высокой изменчивости вируса. Капсомеры уложены вок-руг нити РНК по спиральному типу. Вирус гриппа имеет также суперкапсид с отростками. Вирус полиморфен: встре-чаются сферические, палочковидные, нитевидные формы.

Антигенная структура . Внутренние и поверхностные антигены. Внутренние антигены состоят из РНК и белков капсида, представлены нуклеопротеином (NP-белком) и М-белками. NP-и М-белки — это типоспецифические анти-гены. NP-белок способен связывать комп-лемент, поэтому тип вируса гриппа обычно определяют в РСК. Поверхностные антигены — это гемагглютинин и нейраминидаза. Их струк-туру, которая определяет подтип вируса гриппа, исследуют в РТГА, благодаря тор-можению специфическими антителами гемагглютинации вирусов. Внутренний антиген - стимулирует Т-киллеры и макрофаги, не вызывает антителообразования. У вируса имеются 3 разновидности Н- и 2 разновидности N - антигенов.

Иммунитет: Во время заболевания в проти-вовирусном ответе участвуют факторы неспе-цифической защиты: выделительная функция организма, сывороточные ингибиторы, аль-фа-интерферон, специфические IgA в секре-тах респираторного тракта, которые обеспечи-вают местный иммунитет.

Клеточный иммунитет - NK-клетки и специфические цитотоксические Т-лимфоциты, действующие на клетки, ин-фицированные вирусом. Постинфекционный иммунитет достаточно длителен и прочен, но высокоспецифичен (типо-, подтипо-, вариантоспецифичен).

Микробиологическая диагностика. Диагноз «грипп» базируется на (1) выделении и иден-тификации вируса, (2) определении вирусных АГ в клетках больного, (3) поиске вирусоспецифических антител в сыворотке больно-го. При отборе материала для исследования важно получить пораженные вирусом клетки, так как именно в них происходит репликация вирусов. Материал для исследования — но-соглоточное отделяемое. Для определения антител исследуют парные сыворотки крови больного.

Экспресс-диагностика. Обнаруживают ви-русные антигены в исследуемом материале с помощью РИФ (прямой и непрямой вариан-ты) и ИФА. Можно обнаружить в материале геном вирусов при помощи ПЦР.

Вирусологический метод. Оптимальная лабо-раторная модель для культивирования штаммов—ку-риный эмбрион. Индикацию вирусов проводят в зависи-мости от лабораторной модели (по гибели, по клиническим и патоморфологическим изменениям, ЦПД, образованию «бляшек», «цветной пробе», РГА и гемадсорбции). Идентифицируют вирусы по антигенной структуре. Применяют РСК, РТГА, ИФА, РБН (реакцию биологической нейтрализа-ции) вирусов и др. Обычно тип вирусов грип-па определяют в РСК, подтип — в РТГА.

Серологический метод. Диагноз ставят при четырехкратном увеличении титра антител в парных сыворотках от больного, полученных с интервалом в 10 дней. Применяют РТГА, РСК, ИФА, РБН вирусов.

Лечение: симптоматическое/патогенетическое. А-интерферон - угнетает размножение вирусов.

1. Препараты - индукторы эндогенного интерферона.

Этиотропное лечение - ремантидин - препятствует репродукции вирусов, блокируя М-белки. Арбидол - действует на вирусы А и В.

2. Препараты - ингибиторы нейраминидазы. Блокируют выход вирусных частиц из инфицированных клеток.

При тяжелых формах - противогриппозный донорский иммуноглобулин и нормальный человеческий иммуноглобулин для в\в введения.

Профилактика : Неспецифическая профилактика - противоэпидемические мероприятия, препараты а-интерферона и оксолина.

Специфическая - вакцины. Живые аллантоисные интраназальная и подкожная, тривалентные инактивированные цельно-вирионные гриппозные интраназальная и парентеральная-подкожная (Грипповак), химические Агриппал, полимер-субъединичная «Гриппол». Живые вакцины создают наиболее пол-ноценный, в том числе местный, иммунитет.

3. Вирус эпидемического паротита - биологические свойства, специфическая профилактика.

Борисов - стр. 531

4. Аденовирусы и их характеристика. Лабораторная диагностика.

Борисов - стр. 582

5. Пикорнавирусы - классификация, биологические свойства, методы культивирования. Заболевания, вызываемые пикорнавирусами.

Борисов - стр. 484

6. Вирусы полиомиелита. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.

Таксономия. : семейство Picornaviridae, род Enterovims, вид Poliovirus.

Структура. По структуре полиовирусы — ти-пичные представители рода Enterovirus. РНК-содержащие вирусы.

Морфология : мелкие, просто организованные вирусы, сферической формы, состоят из одноцепочечной РНК и капсида.

Культивирование : Хорошо репродуцируются в первичных и перевариваемых культурах клеток из тканей человека и сопровождается цитопатическим эффектом. В культуре клеток под агаровым покрытием энтеровирусы образуют бляшки.

Антигенные свойства: Различают 3 серотипа внутри вида: 1, 2, 3, не вызывающие перекрес-тного иммунитета. Все серотипы патогенны дл человека.

Патогенез и клиника. Естественная воспри-имчивость человека к вирусам полиомиелита высокая. Входными воротами служат слизис-тые оболочки верхних дыхательных путей и пищеварительного тракта. Первичная репро-дукция вирусов происходит в лимфатических узлах глоточного кольца и тонкой кишки. Из лимфа-тической системы вирусы проникают в кровь, а затем в ЦНС, где избирательно поражают клетки передних рогов спинного мозга (двигательные нейроны). Инкубационный период продолжается в среднем 7—14 дней. Различают 3 клинические формы полиомиелита: паралитическую, менингеальную (без параличей), абортивную (легкая форма). Заболевание на-чинается с повышения температуры тела, об-щего недомогания, головных болей, рвоты, болей в горле.

Иммунитет. После перенесенной болезни остается пожизненный типоспецифический иммунитет. Иммунитет определяется наличием вируснейтрализующих ан-тител, среди которых важная роль принадле-жит местным секреторным антителам слизис-той оболочки глотки и кишечника (местный иммунитет). Пассивный ес-тественный иммунитет сохраняется в течение 3—5 недель после рождения ребенка.

. Материал для исследования - кал, отделяемое носог-лотки, при летальных исходах — кусочки го-ловного и спинного мозга, лимфатические узлы.

Вирусы полиомиелита выделяют путем за-ражения исследуемым материалом первичных и перевиваемых культур клеток. О реп-родукции вирусов судят по цитопатическому действию. Идентифицируют вы-деленный вирус с помощью типоспецифических сывороток в реакции нейтрализации в культуре клеток. Важное значение имеет внутривидовая дифференциация вирусов, ко-торая позволяет отличить патоген-ные штаммы от вакцинных штаммов, выделя-ющихся от людей, иммунизированных живой полиомиелитной вакциной. Различия между штаммами выявляют с помощью ИФА, реакции нейтрализации цитопатического действия вируса в культуре клеток со штаммоспецифической иммунной сывороткой, а также в ПЦР.

Серодиагностика основана на использова-нии парных сывороток больных с примене-нием эталонных штаммов вируса в качестве диагностикума. Содержание сывороточных иммуноглобулинов классов IgG, IgA, IgM оп-ределяют методом радиальной иммунодиффузии по Манчини.

Лечение . Патогенетическое. Применение гомологичного иммуноглобулина для пре-дупреждения развития паралитических форм ограничено.

Профилак-тика . Основной мерой профилактики полиомиелита является иммунизация. Первая инактивированная вакцина для профилактики - создавала общий гуморальный иммунитет, не формировала местной резистентности слизистых оболочек ЖКТ, не обеспечивала надежную защиту.

Пероральная живая культуральная вакцина из трех серотипов штаммов. Используют для массовой иммунизации детей, она создает стойкийобщий и местный иммунитет.

Неспецифическая профилактика сводится к санитарно-гигиеническим мероприятиям.

7. Вирусы Коксаки и ЕСНО, их характеристика. Лабораторная диагностика.

Борисов Л.Б. - Стр. 488

8. Вирусы гепатитов А и Е. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.

Острая инфекционная болезнь, с лихорадкой, поражением печени. Антропоноз.

Таксономия, морфология, антигенная струк-тура: Семейство Picornaviridae род Hepatovirus. Типовой вид —имеет один серотип. Это РНК-содержащий вирус, просто организо-ванный, имеет один вирусоспецифический антиген.

Культивирование: Вирус выращивают в культурах клеток. Цикл репродукции более длительный, чем у энтеровирусов, цитопатический эффект не выражен.

Резистентность: Устойчивос-тью к нагреванию; инактивируется при кипячении в течение 5 мин. Относительно устойчив во внешней среде (воде).

Эпидемиология . Источник-больные. Механизм заражения — фекально-оральный. Вирусы выделяются с фекалиями в начале клинических проявлений. С появлением желтухи интенсив-ность выделения вирусов снижается. Вирусы передаются через воду, пищевые продукты, руки.

Болеют преимущественно дети в возрасте от 4 до 15 лет.

Патогенез: Обладает гепатотропизмом. После заражения репликация вирусов происходит в кишечнике, а оттуда че-рез портальную вену они проникают в печень и реплицируются в цитоплазме гепатоцитов. Повреждение гепатоцитов возникает в ре-зультате иммунопатологических механизмов.

Клиника. Инкубационный период - от 15 до 50 дней. Начало острое, с повышением т-ры и тошнотой, рвотой). Возможно появление желтухи на 5-й день. Клиническое течение заболевания легкое, без особых осложнений. Продолжительность заболевания 2 нед. Хронические формы не развиваются.

Иммунитет. После инфекции - стойкий пожизненный иммунитет, связан-ный с IgG. В начале заболевания в крови IgM, которые сохраняются в ор-ганизме в течение 4 месяцев и имеют диа-гностическое значение. Помимо гумо-рального, развивается и местный иммунитет в кишечнике.

Микробиологическая диагностика. Материа-л для исследования - сыворотка и испражнения. Диагностика основана глав-ным образом на определении в крови IgM с помощью ИФА, РИА и иммунной электрон-ной микроскопии. Этими же методами можно обнаружить вирусный антиген в фекалиях. Вирусологическое исследование не прово-дят.

Лечение. Симптоматическое.

Профилактика. Неспецифическая профи-лактика. Для специфической пассивной профилак-тики используют иммуноглобулин. Иммунитет сохраняется около 3 мес. Для специфической активной профилактики - инактивированная культуральная концентрированная вакцина. Рекомбинантная генно - инженерная вакцина.

Гепатит Е

Антропоноз, фекально - оральным механизмом передачи.

Таксономия : семейство Caliciviridae. Недавно переведен из семейства в группу гепатит Е-подобных вирусов.

Структура. Вирион безоболочечный, сфери-ческий.. Геном — однони-тевая плюс-РНК, которая кодирует РНК-за-висимую РНК-полимеразу, папаинподобную протеазу и трансмембранный белок, обеспе-чивающий внедрение вируса в клетку.

Эпидемиология, клиника. Основной путь передачи — водный. Инкубационный период 2—6 недели. Поражение печени, интоксикацией, желтухой.

Иммунитет. После перенесенного заболева-ния стойкий.

Микробиологическая диагностика : 1) серо-логический метод — в сыворотке, плазме кро-ви с помощью ИФА определяют: антитела к вирусу (анти-HEV IgM, анти-HEV IgG); 2) молекулярно-генетический метод — при-меняют ПЦР для определения РНК вируса (HEV RNA) в кале и в сыворотке крови боль-ных в острой фазе инфекции.

Лечение. Симптоматическое. Беременным рекомендуется введение специфического им-муноглобулина.

Профилактика. Неспецифическая профилактика - улучшение санитарно-гигиенических условий и снабжение качественной питьевой водой. Созданы неживые цельновирионные вакцины, раз-рабатываются рекомбинантные и живые вакцины.

9. Вирус клещевого энцефалита. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.

Таксономия : се-мейство Flaviviridae, род Flavivirus.

Морфологические свойства: сложные, +РНК, структурные белки - V2капсид,V3суперкапсид,V1внутри от суперкапсида.

Имеет пять генотипов, име-ющих некоторые антигенные различия, но только один структурный гликопротеин V-3 индуцирует образование вируснейтрализующих антител. Он обладает четкой антигенной консервативностью. Несмотря на небольшую устойчивость вируса к действию физических и химических факторов, в организме перенос-чиков он сохраняет свою жизнеспособность от —150С до +30С.

Резистентность: Высокая, к действию кислых значений рН, что важно при алиментарном пути зара-жения. Вирус обладает висцеротропностью и нейротропностью. К вирусу чувствительны белые мыши.

Эпидемиология: Переносчиком и ос-новным резервуаром являются иксодовые клещи. У клещей происходит трансовариальная и трансфазовая передача вируса. Поддержание циркуляции осуществляется за счет прокормителей клещей — грызунов, птиц, диких животных. Характерна весенне-летняя сезонность.

Патогенез: Человек заражается трансмиссивно при укусе инфицированными клещами, от кото-рых в период кровососания вирус проника-ет в макроорганизм. Проникновение вируса в организм возможно также контактным путем через мелкие повреждения кожи. Алиментарный путь заражения при употреблении сырого молока коз и овец. Употребление молока ведет к ощелачиванию желудочного сока, что пре-пятствует инактивации вируса. Инкубационный период — от 8 до 23 дн.

Клиника: Сначала вирус размножается в месте входных ворот инфекции под кожей, откуда он попада-ет в кровь. Возникает резорбтивная вирусемия. Вирус проникает в эндотелий кровеносных сосудов, внутренних органов, где активно размножа-ется. При пищевом пути заражения входными воротами является слизистая оболочка глотки и тонкой кишки. В конце инкубационного периода в эндотелии крове-носных сосудов возникает вторичная вирусе-мия, длящаяся 5 дн. Вирусы гематогенно, периневрально проникают в головной и спинной мозг, поражая мотоней-роны (крупные дви-гательные клетки в сером веществе спинного мозга). Различают три клинические формы кле-щевого энцефалита: лихорадочную, менингеальную и очаговую.

Иммунитет: После перенесенного заболевания остается стойкий иммунитет. Вирус клещевого энце-фалита относится к факультативным возбуди-телям медленных вирусных инфекций.

Выделение вируса из крови и цереброспинальной жидкости, внутренних органов и мозга путем интрацеребрального зараже-ния мышей и культур клеток. Идентификацию вируса про-водят в РТГА, РН и РСК, а в монослое куль-тур клеток — в РИФ. Обнаружение антител в парных сыворотках и цереброспинальной жидкости проводят с помощью РСК и РТГА, а также других серологических реакций. Экспресс-диагностика основана на обнару-жении вирусного антигена в крови с помощью РИГА и ИФА, выявлении IgM антител на пер-вой неделе заболевания в цереброспинальной жидкости и обнаружении РНК-вируса в кро-ви и цереброспинальной жидкости у людей, в клещах и внутренних органах животных с помощью ПЦР.

Лечение и профилактика: Для лечения и экстренной профилактики при-меняют специфический гомологичный донорский иммуноглобулин против клещевого энцефалита, полученный из плазмы доноров, проживающих в природных очагах клещевого энцефалита и содержащий в высоком титре антитела к вирусу клещевого энцефалита. При отсутствии препарата назначают специфический гетерологичный лоша-диный иммуноглобулин. При лечении тяжелых форм применяют иммуногемосорбцию и серотерапию иммунной плазмой доноров. Применяют виферон, ридостин, рибонуклеазу.

Активная иммунизация - убитые вакцины:

1. Вакцина про-тив клещевого энцефалита культуральная сор-бированная инактивированная жидкая;

2. Вакцина против клещевого энцефалита культуральная очищенная концентрированная инактивиро-ванная сухая (вакцина клещевого энцефали-та концентрированная), предназначенная для вакцинации взрослых;

3. Австрийская вакци-на клещевого энцефалита культуральная очи-щенная концентрированная инактивированная для иммунизации детей;

4. Вакцина против кле-щевого энцефалита очищенная концентриро-ванная инактивированная «Энцепур К»

5. Культуральная концентриро-ванная инактивированная сухая вакцина для профилактики клещевого энцефалита у детей с 4-летнего возраста

Для формирования надежной защиты необходима ревакцинация, так как при вакцинации убитыми вакцина-ми формируется кратковременный иммунитет. Протективным действием обладает неструктур-ный белок NS1 вируса - растворимый комплементсвязывающий антиген. Он является компонентом для проти-вовирусных вакцин.

10. Вирус бешенства. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.

Таксономия: РНК-содержащий вирус, семейство Rhabdoviride, род Lyssavirus.

Морфология и антигенные свойства . Вирион имеет форму пули, состоит из сердцевины (РНП(рибонуклеопротеин) спи-рального типа и матриксного белка), окру-женной липопротеиновой оболочкой с гликопротеиновыми шипами. Гликопротеин G отвечает за адсорбцию и внедрение вируса в клетку, обладает антигенными (типоспецифический антиген) и иммуногенными свойс-твами. Антитела к нему нейтрализуют вирус и выявляются в РН(рекция нейтрализации). РНП состоит из геномной однонитевой линейной минус-РНК и бел-ков: N-белка, L-белка и NS-белка. РНП является группоспецифическим антигеном; выявляется в РСК, РИФ, РП.

Различают два вируса бешенства: дикий вирус, циркулирующий среди животных, патогенный для человека; фиксированный - не патогенный для человека.

Культивирование. Вирус культивируют путем внутримозгового заражения лабораторных животных (мышей, крыс) и в культуре клеток: фибробластов человека, кури-ного эмбриона. В нейронах головного мозга заражен-ных животных образуются цитоплазматические включения, содержащие антигены виру-са (тела Бабеша-Негри - эозинофильные включения).

Резистентность: Вирус бешенства неустой-чив: быстро погибает под действием солнеч-ных и УФ-лучей, а также при нагревании до 60С. Чувствителен к дезинфицирующим веществам, жирорастворителям, щелочам и протеолитическим ферментам.

Эпидемиология. Источниками инфекции в природных очагах являются волки, грызуны. Вирус бешенства накапливается в слюнных железах больного животного и выделяется со слюной. Животное заразно в последние дни инкубационного периода (за 2—10 дней до клинических проявлений болезни). Механизм передачи возбудителя — контактный при уку-сах. Иногда заболевание развивается при употреблении мяса больных животных или при трансплантации инфици-рованных тканей (роговицы глаза).

У собаки после инкубационного перио-да (14дн.) появляются возбуждение, обильное слюнотечение, рвота, водобоязнь. Она грызет место укуса, бросается на людей, животных. Через 1—3 дня наступают паралич и смерть животного.

Патогенез и клиника. Вирус, попав со слюной больного животного в поврежденные наружные покровы, реплицируется и персистирует в месте внедрения. Затем возбудитель распространяется по аксонам периферических нервов, достигает клеток головного и спинного мозга, где размно-жается. Клетки претерпевают дистрофические, воспалительные и дегенеративные изменения. Размножившийся вирус попадает из мозга по центробежным нейронам в различные ткани, в том числе в слюнные железы. Инкубационный период у человека при бешенстве — от 10 дней до 3 месяцев. В начале заболевания появляются недомогание, страх, беспокойство, бессонница, затем развиваются рефлекторная возбудимость, спазматические сокращения мышц глотки и гортани.

Иммунитет: Человек относительно ус-тойчив к бешенству. Постинфекционный иммунитет не изучен, так как больной обычно погибает. Введение людям, укушенным бешеным животным, инактивированной антирабической вакцины вызывает выработку антител, интерферонов и активацию клеточного иммунитета.

Микробиологическая диагностика: Постмортальная диагностика включает об-наружение телец Бабеша—Негри в мазках-отпечатках или срезах из ткани мозга, а также выделение вируса из моз-га и подчелюстных слюнных желез. Тельца Бабеша—Негри выявляют методами окраски по Романовскому—Гимзе. Вирусные антигены в клет-ках обнаруживают с помощью РИФ.

Выделяют вирус из патологического мате-риала путем биопробы на мышах: заражают интрацеребрально. Идентификацию вирусов проводят с помо-щью ИФА, а также в РН на мышах, используя для нейтрализации вируса антирабический иммуноглобулин.

Прижизненная диагностика основана на ис-следовании: отпечатков роговицы, биоптатов кожи с помощью РИФ; выделении вируса из слюны, цереброспинальной и слезной жидкос-ти путем интрацеребрального инфицирования мышей. Возможно определение ан-тител у больных с помощью РСК, ИФА.

Лечение. Симптоматическое; эффективное лечение отсутствует.

Профилактика. Выявление, уничтожение жи-вотных. Иммунизация антирабической вакциной собак. Специфическую профилактику проводят антирабической вакциной и антирабической сывороткой или иммуноглобулином. Инактивированная УФ- или гамма лучами культуральная вакцина. С лечебно-профилактической целью иммунизируют людей; формируется активный иммунитет.

11. Вирус краснухи. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.

Таксономия. Семейство Togaviridae. Род Rubivirus.

Морфология. Вирион вируса сферической форму. Геном вируса пред-ставлен однонитчатой плюс-нитевой РНК, окруженной капсидом с кубическим типом симметрии и внешней липидсодержащей обо-лочкой, на поверхности которой находятся шипы. В структуре вириона три белка: С, Е1 и Е2. Е1 и Е2— гликопротеины, или шипы, расположенные во внешней оболочке вириона.

Резистентность. Вирус чувстви-телен к эфиру. Малоустой-чив к действию физических и химических факторов, неустойчив в окружающей среде. Разрушение происходит под дейс-твием органических растворителей, УФ-лучей, солнечного света.

Антигенная структура. Вирус представлен одним серотипом. Он имеет внутренний нуклеокапсидный антиген С, вы-являемый в РСК, и внешние антигены: Е2, выявляемый в РН, и Е1, или гемагглютинин, выявляемый в РГА и РТГА. Е2 — это протективный антиген вируса.

Культивирование. В первичных культурах клеток вирус можно обнаружить по феномену интер-ференции, в качестве индуктора для суперинфекции используют вирус ECHO-11 и вирус везикулярного стоматита. Вирус краснухи вы-зывает развитие ЦПД и образование бляшек под агаровым покрытием лишь в некоторых перевиваемых культурах клеток: ВНК-21, Vero, RK-21, SIRC, а также в первичных культу-рах клеток из тканей человеческого плода. Наилучшей культурой для репродукции и вы-явления ЦПД являются клетки ВНК-21. Вирус размножается в цитоплазме клеток, вызывая очаговую деструкцию клеточ-ного монослоя и образование цитоплазматических эозинофильных включений. Обладает нейраминидазной активностью.

Эпидемиология. Факультативный возбудитель мед-ленных вирусных инфекций. Антропоноз.

Источник - человек, опасный со 2 половины инкубационного периода и в течение 7 дней с момента появления сыпи. Выделение вируса из организма происходит с носоглоточным секретом, а также с мочой и испражнениями.

Пути передачи: воздушно-капельный и трансплацентарный.

Вирус, персистирующий в организме больного с врожденной краснухой, обладает повышенной вирулентностью.

Патогенез и проявления . Две формы болезни: приобретен-ная и врожденная.

Приобретённая краснуха. Входными воротами инфекции - слизистые оболочки вер-хних дыхательных путей → вирус в регионарные лимфатические узлы → размножается → поступает в кровь → разносится по органам → оседа-ет в лимфатических узлах и эпителиальных клетках кожи → развивается иммунная воспалительная реакция, сопровождающая-ся появлением пятнисто-папулезной сыпи.

Инкубационный период — от 11 до 24 дней

Проявления: незначительное повышение температуры и легкие катаральные симптомы → конъюн-ктивит → увеличение затылочных лимфатических узлов → пятнисто-папулезная сыпь, расположенная по всему телу.

Вирус выделяется из организ-ма больных с секретом слизистых оболочек верхних дыхательных путей, а также с мочой и фекалиями. Он исчезает из крови через твое суток после появления сыпи, но сохраняется в секрете слизистых оболочек верхних дыхательных путей в течение 2 недель.

Иммунитет . Стойкий, напряженный. В ходе заболевания развивается вто-ричный иммунодефицит клеточного типа.

Врожденная краснуха — это медленная ви-русная инфекция, развивающаяся в результате внутриутробного трансплацентарного.

Проявления развитие ката-ракты, глухоты и пороков сердца. Внутриутробные пороки. Особая опасность - заражение в 1 триместре беременности. Тератогенное действие обусловлено торможением митотической ак-тивности клеток, ишемией плода, цитопатогенным действием вируса на клетки плода.

Иммунитет менее стоек, так как формирование его происходит в условиях незрелой иммунной системы плода.

Прогрессирующий краснушный панэнцефалит — медленная вирусная инфекция, характеризующаяся комплексом прогрессирующих нарушений двигательной и умственной функции ЦНС, и завершающаяся летальным исходом.

Микробиологическая диагностика. Выделение вируса из смывов со слизистой оболочки носа и зева, крови, мочи, реже — испражнений, а также внутренних органов погибших детей и на обнаружении антител в парных сыворотках и цереброспинальной жидкости при врожден-ной краснухе и прогрессирующем краснушном панэнцефалите.

Выделение вируса путем заражения чувствительных клеток. Индикацию вируса осуществляют на основании интерференции с цитопатогенными вирусами или по обнаружению ЦПД и в РГА. Идентификацию вируса осуществляют в РН, РТГА, РИФ и ИФА. (Серодиагностика)

Для обнаружения антител применяют РН, РСК, РТГА, ИФА. Диагностическое значение имеет четырех-кратное и более увеличение титров антител в динамике заболевания, а также определение специфических IgM. Обнаружение антител у беременных. Если через 10—12 дней после об-щения беременной с источником инфекции у женщины регистрируется нарастание титров антигемагглютининов в парных сыворотках, а после 20-го дня определяются IgM, то это подтверждает первичное инфицирование и необходимость решения вопроса о прерыва-нии беременности. Обнаружение у новорожден-ных специфических IgM свидетельствует о перенесенной внутриутробной инфекции.

Специфическое лечение и профилактика. Лечение симптоматическое.Специфического лечения нет.

Профилактика: защита женщин детородного возраста от внутриутробного инфицирования плода, вакцинация против краснухи в возрасте 12 месяцев, ревак-цинации детей в 6 лет и иммунизация девочек в 13 лет. Применяют живые и убитые вакцины. Живая вакцина, изготовленная на основе аттенуированныых штаммов виру-са. Для проведения вакцинации используют как ассоциирован-ные вакцины (паротитно-коревая-краснушная вакцина, паротитно-краснушная вакцина), так и моновакцины.

12. Вирус кори. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.

Корь — острая инфекционная болезнь, ха-рактеризующаяся лихорадкой, катаральным воспалением слизистых оболочек верхних дыхательных путей и глаз, а также пятнисто-папулезной сыпью на коже.

Таксономия. РНК-содержащий вирус. Семейства Paramyxoviridae. Род Morbillivirus.

Структура и антигенные свойства. Вирион окружён оболочкой с гликопротеиновыми шипами. Под оболочкой находится спиральный нуклеокапсид. Геном вируса — однонитевая, нефрагменти-рованная минус РНК. Имеются следующие основные белки: NP — нуклеокапсидный; М — матриксный, а также поверхностные гли-козилированные белки липопротеиновой обо-лочки — гемагглютинин (Н) и белок слияния (F), гемолизин. Вирус обладает гемагглютинирующей и гемолитической активнос-тью. Нейраминидаза отсутствует. Имеет общие антигены с вирусом чумы собак и крупного рогатого скота.

Культивирование. Культивируют на первично-трипсинизированных культурах клеток почек обезьян и человека, перевивае-мых культурах клеток HeLa, Vero. Возбудитель размножается с образованием гигантских мно-гоядерных клеток — симпластов; появляются цитоплазматические и внутриядерные вклю-чения. Белок F вызывает слияние клеток.

Резистентность. В окружающей среде нестоек, при комнатной температуре инактивируется через 3-4 ч. Быстро гибнет от солнечного света, УФ-лучей. Чувствителен к детергентам, дезинфектантам.

Восприимчивость животных. Корь воспро-изводится только на обезьянах, остальные животные маловосприимчивы.

Эпидемиология. Корь — антропонозная инфекция, распространена повсеместно. Восприимчивость человека к вирусу кори чрезвычайно высока. Болеют люди разного возраста, но чаще дети 4—5 лет.

Источник ин-фекции — больной человек.

Основной путь инфицирования — воздушно-капельный, ре-же — контактный. Наибольшая заражаемость происходит в продромальном периоде и в 1-й день появления сыпи. Через 5 дней после по-явления сыпи больной не заразен.

Патогенез. Возбудитель проникает через сли-зистые оболочки верхних дыхательных путей и глаз, откуда попадает в подслизистую оболоч-ку, лимфатические узлы. После репродукции он поступает в кровь (вирусемия) и поражает эндотелий кровеносных капилляров, обуслав-ливая тем самым появление сыпи. Развиваются отек и некротические изменения тканей.

Клиника. Инкубационный период 8-15 дней. Вначале отмечаются острые респираторные проявления (ринит, фарингит, конъюнктивит, фотофобия, температура тела 39С). Затем, на 3—4-й день, на слизистых оболочках и коже появляется пятнисто-папулезная сыпь, распространяющаяся сверху вниз: сначала на лице, затем на туловище и конечностях. За сут-ки до появления сыпи на слизистой оболочке щек появляются мелкие пятна, окруженные крас-ным ореолом. Заболевание длится 7—9 дней, сыпь исчезает, не оставляя следов.

Возбудитель вызывает аллергию, подавляет активность Т-лимфоцитов и иммунные реак-ции, что способствует появлению осложнений в виде пневмоний, воспаления среднего уха и др. Редко развиваются энцефалит и ПСПЭ.

Иммунитет. После перенесенной кори раз-вивается гуморальный стойкий пожизненный иммунитет. Повторные заболевания редки. Пассивный иммунитет, передаваемый плоду через плаценту в виде IgG, защищает новорож-денного в течение 6 месяцев после рождения.

Микробиологическая диагностика. Исследуют смыв с носоглотки, соскобы с элементов сыпи, кровь, мочу. Вирус кори можно обнаружить в патологическом материале и в зараженных культурах клеток с помощью РИФ, РТГА и реакции нейтрализации. Характерно наличие многоядерных клеток и антигенов возбудителя в них. Для серологической диагностики приме-няют РСК, РТГА и реакцию нейтрализации.

Лечение. Симптоматическое.

Специфическая профилактика. Активную специфическую профилактику кори прово-дят подкожным введением детям первого года жизни или живой коревой вакцины из аттенуированных штаммов, или ассоции-рованной вакцины (против кори, паротита, краснухи). В очагах кори ослабленным детям вводят нормальный иммуноглобулин чело-века. Препарат эффективен при введении не позднее 7-го дня инкубационного периода.

13. Вирус эпидемического паротита - биологические свойства, специфическая профилактика.

Борисов - стр. 543

14. Герпес-вирусная инфекция: характеристика возбудителей. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.

ВПГ вызывает герпетическую инфекцию, или простой герпес, характеризующийся везикулезными высыпаниями на коже, слизистых оболочках, поражением ЦНС и внутренних органов, а также пожизненным носительством (персистенцией) и рецидивами болезни.

Таксономия. Семейс-тво Herpesviridae. Род Simplexvirus.

Структура. Геном ВПГ кодирует около 80 белков, необходимых для репродукции вируса и взаимодействия пос-леднего с клетками организма и иммунным ответом. ВПГ кодирует 11 гликопротеинов, являющихся прикрепительными белка-ми (gB, gC, gD, gH), белками слияния (gB), структурными белками, иммунными белками «уклонения» (gC, gE, gl).

Вирус вызывает литические ин-фекции фибробластов, эпителиальных клеток и латентные инфекции нейронов.

Культивирование . Для культивирования ви-руса применяют куриный эмбрион (на оболочке образуются мелкие плотные бляшки) и культуру клеток, на которой он вызывает цитопатический эф-фект в виде появления гигантских многоядер-ных клеток с внутриядерными включениями.

Антигенная структура . Вирус содержит ряд антигенов, связанных как с внутренними белками, так и с гликопротеидами наружной оболочки. Последние являются основными иммуногенами, индуцирущими выработку антител и клеточный иммунитет. Существует два серотипа: ВПГ 1 типа и ВПГ 2 типа.

Резистентность. Вирус нестоек, чувствителен к солнечным и УФ-лучам.

Эпидемиология. Источник инфекции — больной.

ВПГ-1 и ВПГ-2 передаются преимущес-твенно контактным путем (с везикулярной жидкостью, со слюной, по-ловых контактах), через предметы обихода, реже — воз-душно-капельным путем, через плаценту, при рождении ребенка.

Оба типа вирусов могут вызывать оральный и генитальный герпес. ВПГ-1 чаще поражает слизистые оболочки ротовой полости и глот-ки, вызывает энцефалиты, а ВПГ-2 — генита-лии (генитальный герпес).

Патогенез . Различают первичный и реци-дивирующий простой герпес. Чаще вирус вы-зывает бессимптомную или латентную ин-фекцию.

Первичная инфекция . Везикула —проявление простого герпеса с деге-нерацией эпителиальных клеток. Основу везикулы составляют многоядерные клет-ки. Пораженные ядра клеток содержат эозинофильные включения. Верхушка везикулы через некоторое время вскрывается, и формируется язвочка, кото-рая вскоре покрывается струпом с образо-ванием корочки с последующим заживле-нием.

Минуя входные ворота эпителия, виру-сы проходят через чувствительные нервные окончания с дальнейшим передвижением нуклеокапсидов вдоль аксона к телу нейро-на в чувствительных ганглиях. Репродукция вируса в нейроне заканчивается его гибелью. Некоторые вирусы герпеса, достигая ганглионарных клеток, способны приводить к развитию латентной инфекции, при которой нейроны не гибнут, но содержат в себе вирус-ный геном. Большинство людей (70-90 %) являются пожизненными носителями виру-са, который сохраняется в ганглиях, вызы-вая в нейронах латентную персистирующую инфекцию.

Латентная инфекция чувствительных ней-ронов является характерной особенностью нейротропных герпесвирусов ВПГ. В латентно инфицированных нейронах около 1 % клеток в пораженном ганглии несет вирусный геном.

Клиника. Инкубационный период 2—12 дней. Болезнь начинается с возникновения на пораженных участках зуда, появления отека и пузырьков, заполненных жидкос-тью. ВПГ по-ражает кожу (везикулы, экзема), слизистые оболочки рта, глотки (стоматит) и кишеч-ника, печень (гепатиты), глаза (кератит) и ЦНС (энцефалит). Рецидивирующий герпес обусловлен реактивацией вируса, сохранившегося в ганглиях. Он характеризуется повторны-ми высыпаниями и поражением органов и тканей.

Генитальная инфекция является результа-том аутоинокуляции из других пораженных участков тела; но наиболее часто встречаю-щийся путь заражения — половой. Поражение про-является в образовании везикулы, которая довольно быстро изъязвляется.

Вирус простого герпеса проникает во время прохождения но-ворожденного через родовые пути матери, вызывая неонаталъный герпес. Неонатальный герпес обнару-живается на 6-й день после родов. Вирус диссеминирует во внутренние органы с развитием генера-лизованного сепсиса.

Иммунитет. Основной иммунитет— клеточный. Развивается ГЗТ. NK-клетки играют важную роль в ранней противомикробной защите. Организм пора-женного реагирует на гликопротеины вируса, продуцируя цитотоксические Т-лимфоциты, а также Т-хелперы, активирую-щие В-лимфоциты с последующей продукци-ей специфических антител.

Гликопротеины вызывают образование вируснейтрализующих антител. Вирус - нейтрализующие антитела подавляют межкле-точное распространение вирусов.

Микробиологическая диагностика. Используют содержимое гер-петических везикул, слюну, соскобы с рого-вой оболочки глаз, кровь, спинномозговую жидкость. В окрашенных мазках наблюдают гигантские многоядерные клетки, клетки с увеличенной цитоплазмой и внутриядер-ными включениями.

Для выделения вируса исследуемым материалом заражают клетки HeLa, Нер-2, человеческие эмбрио-нальные фибробласты.

Рост в культуре кле-ток проявляется округлением клеток с последующим про-грессирующим поражением всей культуры клеток. Заражают также куриные эмбрионы, у которых после внутримозгового заражения развивается энце-фалит. Выделенный вирус идентифицируют в РИФ и ИФА с использованием моноклональных антител.

Серодиагностику проводят с помощью РСК, РИФ, ИФА и реакции нейтрализации по нарастанию титра антител больного. ИБ также способен выявлять типоспецифические антитела.

При экспресс-диагностике в мазках-от-печатках из высыпаний, окрашенных по Романовскому-Гимзе, выявляются гига-нтские многоядерные клетки с внутриядер-ными включениями. Для идентификации вируса используют также амплификацию ге-нов вирусной ДНК в реакции ПЦР.

Лечение. Для лечения применяют препа-раты интерферона, индукторы интерферона и противовирусные химиотерапевтические препараты (ацикловир, видарабин).

Профилактика. Специфическая профи-лактика рецидивирующего герпеса осущест-вляется в период ремиссии многократным введением инактивированной культуральной герпетической вакцины.

15. Вирусы гепатитов В, С, Д, G. Характеристика. Носительство. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.

Вирус гепатита В - семейс-тво Hepadnaviridae род Orthohepadnavirus.

Морфология: ДНК-содержаший вирус сферичес-кой формы. Состоит из сердцевины, состоящей из 180 белковых частиц, составляющих сердцевинный НВс-антиген и липидсодержащей оболоч-ки, содержащей поверхностный HBs-антиген. Внутри сердцевины находятся ДНК, фермент ДНК-полимераза, обладающая ревертазной ак-тивностью, и концевой белок НВе-антиген.

Геном представлен двунитевой ДНК коль-цевой формы.

Культуральные свойства . Не культиви-руется на куриных эмбрионах, не облада-ет гемолитической и гемагглютинирующей активностью. ВГВ культивируется только в культуре клеток.

Резистентность . Высокая к факторам окружающей среды и дезинфицирующим веществам. Вирус устой-чив к длительному воздействию кислой среды, УФ-излучению, действию спирта, фенола.

Антигенная структура . Слож-ная. В суперкапсиде вируса находится HBs-антиген, который ло-кализован в гидрофильном слое на поверх-ности вириона. В формировании HBs-антигена участвуют 3 полипептида в гликозилированной форме:preSl — большой полипептид; preS2 — средний полипептид; S — малый полипептид.

Эпидемиология: Развитие инфекционного процесса при попадании в кровь. Заражение проис-ходит при парентеральных манипуляциях (инъ-екциях, хирургических вмешательствах), пере-ливании крови.

Патогенез и клиника заболевания. Инкуба-ционный период 3—6 месяцев. Инфекционный процесс наступает после проникновения вируса в кровь. ВГВ из крови эндоцитозом прони-кает в гепатоцит. После проникновения вируса происходит достраивание плюс-нити ДНК ДНК-полимеразой до пол-ноценной структуры. Клиническая картина характеризуется сим-птомами поражения печени, в большинстве случаев сопровождается развитием желтухи.

Иммунитет. Гуморальный иммунитет, пред-ставленный антителами к HBs-антигену, защищает гепатоциты от вируса, элиминируя его из крови.

Клеточный иммунитет освобождает организм от инфицирован-ных гепатоцитов благодаря цитолитической функции Т-киллеров. Переход острой фор-мы в хроническую обеспечивается наруше-нием Т-клеточного иммунитета.

Микробиологическая диагностика. Исполь-зуют серологический метод и ПЦР. Методами ИФА и РНГА в крови определяют маркеры гепатита В: антигены и антите-ла. ПЦР определяют наличие вирусной ДНК в крови и биоптатах печени. Для острого гепатита ха-рактерно обнаружение HBs антигена, НВе антигена и анти-HBc-IgM антитела.

Лечение. Использование интерферона, интерфероногенов: виферона, амиксина, инги-битора ДНК-полимеразы, препарата аденинрибонозида.

Профилактика. Исключение попадания вируса при парен-теральных манипуляциях и переливаниях крови (применением одноразовых шприцев, проверкой на ге-патит В по наличию HBs-антигена в крови доно-ров крови).

Специфическая профилактика осущест-вляется вакцинацией рекомбинантной ген-но-инженерной вакциной, содержащей HBs-антиген. Вакцинации подлежат все новорож-денные в первые 24 часа жизни. Длительность поствакцинального иммуните-та — не менее 7 лет.

Вирус гепатита С относится к се-мейству Flaviviridae роду Hepacivirus.

Морфология. Сложноорганизованный РНК-содержащим вирус сфе-рической формы. Геном представлен одной линейной «+» цепью РНК, обладает большой вариабельностью.

Антигенная структура. Вирус обладает слож-ной антигенной структурой. Антигенами яв-ляются:

1. Гликопротеины оболочки

2. Сердцевинный антиген НСс-антиген

3. Неструктурные белки.

Культуральные свойства . ВГС не культиви-руется на куриных эмбрионах, не облада-ет гемолитической и гемагглютинирующей активностью. Резистентность. чувствителен к эфиру, УФ-лучам, нагреванию до 50С.

Эпидемиология. Заражение ВГС аналогично заражению ВГВ. Наиболее часто ВГС передается при переливаниях крови, трансплацентарно, половым путем.

Клиника: Часто встречаются безжелтушные формы, течение инфекции в острой форме, в 50 % случаев процесс переходит в хроническое те-чение с развитием цирроза и первичного ра-ка печени.

Микробиологическая диагностика: Используются ПЦР и серо-логическое исследование. Подтверждением активного инфекционного процесса является обнаружение в крои вирусной РНК ПЦР. Серологическое исследование направлено на определение антител к NS3 методом ИФА.

Профилактика и лечение. Для профилакти-ки - тоже, что и при гепатите В. Для лечения применяют интерфе-рон и рибовирин. Специфическая профилак-тика - нет.

Вирус гепатита D - дефектный вирус, не имеющий собственной оболочки. Вирион имеет сферическую форму, который состоит из однонитчатой РНК и сердцевинного HDc-антигена. Эти белки регулируют синтез генома ви-руса: один белок стимулирует синтез генома, другой — тормозит. Различают три генотипа вируса. Все генотипы относятся к одному серотипу.

Резервуаром BFD в природе являются но-сители ВГВ. Заражение BFD аналогично ин-фицированию ВГВ.

Микробиологическая диагностика осуществляется серологичес-ким методом путем определения антител к BFD методом ИФА.

Профилактика: все те мероприятия, которые исполь-зуют для профилактики гепатита В. Для ле-чения используют препараты интерферона. Вакцина против гепатита В защищает и от гепатита D.

16. ВИЧ-инфекция. Характеристика возбудителей. Лабораторная диагностика,

Вирус иммунодефицита человека вызывает ВИЧ-инфекцию, заканчива-ющуюся развитием синдрома приобретенно-го иммунного дефицита.

Возбудитель ВИЧ-инфекции — лимфотропный вирус, относящийся к семейству Retroviridae роду Lentivirus.

Морфологические свойства: РНК-содержащий вирус. Вирусная частица сферической формы Оболочка состоит из двойного слоя липидов, пронизанного гликопротеинами. Липидная оболочка проис-ходит из плазматической мембраны клетки хозяина, в которой репродуцируется вирус. Гликопротеиновая молекула состоит из 2 субъединиц, находящихся на поверхности вириона и пронизывающих его липидную оболочку.

Сердцевина вируса конусовидной формы, состоит из капсидных белков, ряда матриксных белков и белков протеазы. Геном образует две нити РНК, для осуществления процесса репродукции ВИЧ имеет обратную транскриптазу, или ревертазу.

Геном вируса состоит из 3 основных струк-турных генов и 7 регуляторных и функциональных генов. Функциональные ге-ны выполняют регуляторные функции и обеспечивают осуществление процессов репродукции и участие вируса в инфекционном процессе.

Вирус поражает в основном Т- и В-лимфоциты, некоторые клетки моноцитарного ряда (макрофаги, лейкоциты), клетки нервной системы.

Культуральные свойства : на культуре клеток Т-лимфоцитов и моноцитов человека (в присутствии ИЛ-2).

Антигенная структура: 2 типа вируса — ВИЧ-1 и ВИЧ-2 ВИЧ-1, имеет более 10 генотипов (субтипов): А, В, С, D, E, F…, отличающихся между собой по аминокислотному составу белков.

ВИЧ-1 делят на 3 груп-пы: М, N, О. Большинство изолятов относится к группе М, в которой выделяют 10 подти-пов: А, В, С, D, F-l, F-2, G, Н, I, К. Устойчивость: Чувствителен к физическим и химическим факторам, гибнет в при нагревании. Вирус может длительно сохраняться в высушенном состоянии, в высохшей крови.

Факторы патогенности, патогенез: Вирус прикрепляется к лимфоциту, проникает в клетку и репродуцирует в лимфоците. В результате размножения ВИЧ в лимфоците последние раз-рушаются или теряют свои функциональные свойства. В результате размножения вируса в раз-личных клетках происходит накопление его в органах и тканях, и он обнаруживается в крови, лимфе, слюне, моче, поте, каловых массах.

При ВИЧ-инфекции снижается число Т-4-лимфоцитов, на-рушается функция В-лимфоцитов, подавля-ется функция естественных киллеров и ответ на антигены снижается и нару-шается продукция комплемента, лимфокинов и других факторов, регулирующих иммунные функции (ИЛ), в результате чего наступает дисфункция иммунной системы.

Клиника: поражается дыхательная система (пнев-мония, бронхиты); ЦНС (абсцес-сы, менингиты); ЖКТ (диареи), возникают злокачествен-ные новообразования (опу-холи внутренних органов).

ВИЧ-инфекция протекает в несколько стадий: 1) инкуба-ционный период, составляющий в среднем 2—4 недели; 2) стадия первичных проявлений, характеризующаяся вначале острой лихорад-кой, диареей; завершает-ся стадия бессимптомной фазой и персистенцией вируса, восстановлением самочувствия, однако в крови определяются ВИЧ-антитела, 3) стадия вторичных заболеваний, проявляющихся поражением дыхатель-ной, нервной системы. Завешается ВИЧ-инфекция последней, 4-й терминальной стадией- СПИДом.

Микробиологическая диагностика.

Вирусологические и серологические ис-следования включают методы определения антигенов и антител ВИЧ. Для этого исполь-зуют ИФА, ИБ и ПЦР. Сыворотки больных ВИЧ-1 и ВИЧ-2 содержат антитела ко всем вирусным белкам. Однако для подтвержде-ния диагноза определяют антитела к белкам gp41, gpl20, gpl60, p24 у ВИЧ-1 и антитела к белкам gp36, gpl05, gpl40 у ВИЧ-2. ВИЧ-антитела появляются через 2—4 недели пос-ле инфицирования и определяются на всех стадиях ВИЧ.

Метод выявления вируса в крови, лим-фоцитах. Однако при любой положительной пробе для подтверждения результатов ставится ре-акция ИБ. Применяют также ПЦР, способ-ную выявлять ВИЧ-инфекцию в инкуба-ционном и раннем клиническом периоде, однако ее чувствительность несколько ниже, чем у ИФА.

Клинический и серологический диагнозы подтверждаются иммунологическими иссле-дованиями, если они указывают на наличие иммунодефицита у обследуемого пациента.

Диагностическая иммуноферментная тест-система для определения антител к ВИЧ - включает вирусный АГ, адсорбированный на носителе, АТ против Ig человека. Используется для серодиагностики СПИДа.

Лечение: применение ингибиторов обратной транскриптазы, действующих в активирован-ных клетках. Препараты являются производные тимидина — азидотимидин и фосфазид.

Профилактика . Специфическая - нет.

17. Классификация и характеристика онкогенных вирусов

Семейство Retroviridae включает 7 родов.

Онковирусы являются сложноорганизованными вирусами. Вирионы построены из сердцевины, окружен-ной липопротеиновой оболочкой с шипами. Размеры и формы шипов, а также локализа-ция сердцевины служат основой для подраз-деления вирусов на 4 морфологических типа (А, В, С, D), а также вирус бычьего лейкоза.

Капсид онковирусов построен по кубичес-кому типу симметрии. В него заключены нуклеопротеин и фермент ревертаза. Ревертаза обладает способностью транскрибировать ДНК. Геном - 2 идентичные цепи РНК.

Культивирование вирусов : не культивируются на куриных эмбрионах, культивируются в организме чувствительных животных, в культурах клеток.

Репродукция вирусов : проникают в клетку путем эндоцитоза. 3 этапа: синтез ДНК, на матрице РНК; ферментативное расщепление матричной РНК; синтез комплементарной нити ДНК на матрице первой нити ДНК.

К семейству Retroviridae относится пример-но 150 видов вирусов, вызывающих развитие опухолей у животных, и только 4 вида вызы-вают опухоли у человека: HTLV-1, HTLV-2, ВИЧ-1,ВИЧ-2.

Вирусы Т-клеточного лейкоза человека

К семейству Retroviridae роду Deltaretrovirus относятся вирусы, поражающие CD4 Т-лимфоциты, для которых доказана этиологичес-кая роль в развитии опухолевого процесса у людей: HTLV-1 и HTLV-2

Вирус HTLV-1 является возбудителем Т-клеточного лимфолейкоза взрослых. Он является экзогенным онковирусом, который, в отли-чие от других онковирусов, имеет два допол-нительных структурных гена: tax и rех.

Продукт tax-гена действует на терминаль-ные повторы LTR, стимулируя синтез вирус-ной иРНК, а также образование ИЛ-2 рецеп-торов на поверхности зараженной клетки. Продукт rex-гена определяет очередность трансляции вирусных иРНК.

HTLV-2 был изолирован от больного во-лосисто-клеточным лейкозом.

Оба вируса передаются половым, трансфузионным и трансплацентарным путями.

Семейство Papillomaviridae - вирус папилломы человека, собак. Вызывают инфекцию в клетках плоского эпителия. Доброкачественные папилломы в области половых органов, на коже, на слизистых дыхательных путей.

Семейство Polyomaviridae - вакуолизирующий вирус обезьян SV-40.Вирус полиомы человека.

Семейство Adenoviridae - аденовирусы, особенно серотипы 12,18,31 - индуцируют саркомы и трансформируют культуры клеток.

Семейство Poxviridae - вирусы фибромы-миксомы кролика, вирус Ябы, вызывающий развитие опухолей, вирус контагиозного моллюска.

Семейство Herpesviridae - лимфомы, карциномы. Онкогенез у человека связан с вирусом простого герпеса 2 типа (ВПГ-2) и вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ).

18. Медленные вирусные инфекции.

Медленные вирусные инфекции характери-зуются следующими признаками:

1) необычно длительным инкубационным периодом (месяцы, годы); 2) своеобразным поражением органов и тканей, преимущественно ЦНС; 3) медленным неуклонным прогрессированием заболевания; 4) неизбежным летальным исходом.

Медленные вирусные инфекции могут вы-зывать вирусы, известные как возбудители острых вирусных инфекций. Например, ви-рус кори иногда вызывает ПСПЭ(подострый склерозирующий панэнцефалит), вирус краснухи — прогрессирую-щую врожденную краснуху и краснушный панэнцефалит.

Типичную медленную вирусную инфекцию животных вызывает вирус Мэди/Висна от-носящийся к ретровирусам. Он является воз-будителем медленной вирусной инфекции и прогрессирующей пневмонии овец.

19. Прионные болезни.

Прионы — возбудители конформационных болезней, вызывающих диспротеиноз.

Патогенез и клиника. Прионные инфекции характеризуются губкообразными измене-ниями мозга (трансмиссивные губкообразные энцефалопатии). При этом развивают-ся церебральный амилоидоз (внеклеточный диспротеиноз, характеризующийся отло-жением амилоида с развитием атрофии и склероза ткани) и астроцитоз (разрастание астроцитарной нейроглии, гиперпродукция глиальных волокон). Образуются фибриллы, агрегаты белка или амилоида. Иммунитета к прионам не существует.

Куру — прионная болезнь, в результате ритуального канни-бализма — поедания недостаточно терми-чески обработанного инфицированного прионами мозга погибших сородичей. В результате поражения ЦНС нарушаются координация движений, походка, появля-ются озноб, эйфория.

Болезнь Крейтцфельдта—Якоба — прион-ная болезнь (инкубационный период — до 20 лет), протекающая в виде деменции, зри-тельных и мозжечковых нарушений и дви-гательных расстройств со смертельным ис-ходом через 9 месяцев от начала болезни. Возможны различные пути инфицирования и причины развития болезни: 1) при упот-реблении недостаточно термически обрабо-танных продуктов животного происхожде-ния, например мяса, мозга коров, больных губкообразной энцефалопатией крупного рогатого скота; 2) при транспланта-ции тканей, например роговицы глаза, при применении гормонов и других БАВ животного происхож-дения, при использовании контаминированных или недостаточно простерилизованных хирургических инструментов.

Синдром Герстманна—Штреусслера— Шейнкера — прионная болезнь с наследс-твенной патологией, протекающая с деменцией, гипотонией, на-рушением глотания, дизартрией. Инкубационный период — от 5 до 30 лет.

Фатальная семейная бессонница — аутосомно-доминантное заболевание с прогрес-сирующей бессонницей, симпатической ги-перреактивностью

Скрепи - прионная болезнь овец и коз, характери-зующаяся сильным кожным зудом, пораже-нием ЦНС, прогрессирующим нарушением координации движений и неизбежной гибе-лью животного.

Губкообразная энцефалопатия крупного рога-того скота — прионная болезнь крупного ро-гатого скота, характеризующаяся поражением ЦНС, нарушением координации движений и

неизбежной гибелью животного.

Микробиологическая диагностика. При прионной патологии характерны губкообразные изменения мозга, астроцитоз (глиоз), отсутс-твие инфильтратов воспаления; окраска. Мозг окрашивают на амилоид. В цереброспиналь-ной жидкости выявляют белковые маркеры прионных мозговых нарушений (с помощью ИФА, ИБ с моноклональными антителами). Проводят генетический анализ прионного ге-на; ПЦР для выявления РгР.

Профилактика. Введение ограничений на использование лекарственных препаратов жи-вотного происхождения. Ограничение трансплантации твердой мозговой оболочки. Использование резиновых перчаток при работе с биологичес-кими жидкостями больных.

20. Филовирусные и аренавирусные инфекции (лихорадка Эбола, Марбурга, Ласса, вирусные геморрагические лихорадки).

Стр. 524 - Борисов Л.Б.

Наиболее важными для изучения особенностей иммунного ответа являются антигены микроорганизмов — бактерий и вирусов.

В качестве антигенов у бактерий выступают белки, полисахариды, липополисахариды, липопротеиды, нуклеопротеиды и тому подобное. У микроорганизмов различают группоспецифические, видоспецифические и типоспецифические (вариантные) антигены. Первые встречаются у разных представителей одного рода или семьи; вторые — у разных представителей одного вида; третьи — у отдельных вариантов одного вида, в результате чего их разделяют на серовары (серологические варианты). Так, у Streptococcus pneumoniaе различают 80 сероваров.

Среди бактериальных антигенов выделяют Н, О, К и другие. Н-антигены — это жгутиковые антигены, которые получили название от Н-штаммов протея (от нем. Hauch — дыхание). Е. Вейль и А. Феликс наблюдали, что Н-штаммы дают на твердой питательной среде сплошной рост, а О-штаммы (от нем. Ohne hauch — без дыхания) растут в виде отдельных колоний.

Н-антиген представляет собой белок флагеллин. Он разрушается при нагревании (56-80°С), а после обработки фенолом сохраняет свои антигенные свойства.

О-антиген грамотрицательных бактерий связан с липополисахаридом клеточной стенки. Антигенной детерминантой ЛПС (липополисахарида) являются О-специфические боковые цепи, состав которых существенно различается не только у разных видов, но и в пределах одного вида у разных сероваров. В них содержатся гексозы (галактоза, глюкоза, рамноза т.п.) и N-ацетилглюкозамин.

Ранее этот антиген называли соматическим (расположенным в содержимом клетки, в соме), но это не совсем правильно, потому что О-специфические цепи немного выступают над поверхностью клетки. Полный соматический антиген в S-форме содержит полисахаридный гаптен. При переходе в R-форму соматический антиген теряет выраженную видовую специфичность, что связано с потерей специфического полисахарида.

Соматическими антигенами считают также липопротеиды. Как и ЛПС, они являются термостабильными антигенами, выдерживают нагревание до 80-100°С в течение 1-2 часов, не разрушаются после обработки формалином и спиртом.

При иммунизации животных живыми культурами, которые имеют жгутики, образуются антитела к О- и Н-антигенам, а при иммунизации кипяченой культурой — только к О-антигену.

К-антигены (капсульные) так же, как и О-антигены связаны с ЛПС клеточной стенки и капсулой, но зачастую содержат кислые полисахариды: глюкуроновую, галактуроновую и другие уроновые кислоты. По чувствительности к температуре К-антигены разделяют на А, В, М и L-антигены. Наиболее термостабильны А и М-антигены, которые могут выдерживать кипячение в течение 2 ч.

В-антигены выдерживают нагревание при температуре 60°С в течение часа, а L-антигены разрушаются при нагревании до 60°С. К-антигены часто маскируют О-антигены, поэтому для того, чтобы разрушить К-антигены, необходимо прокипятить культуру. Наиболее полно изучен капсульный Vi-антиген брюшнотифозной сальмонеллы и некоторых энтеробактерий. Из-за высокой вирулентность Vi-антиген назвали антигеном вирулентности.

Капсульные антигены обнаружены у Streptococcus pneumoniae (80 сероваров), Klebsiella pneumoniae (70 сероваров), в том числе возбудителей риносклеромы, у Bacillus anthracis (капсулы полипептидной природы). Антигены риккетсий, хламидий, микоплазм также связаны с поверхностными структурами клеток. Антигенными свойствами характеризуются также пили, фимбрии, мембраны, цитоплазма, ферменты, токсины.

У некоторых бактерий (Bacillus anthracis, Yersinia pestis, возбудителей коклюша, туляремии, бруцеллеза) найдены протективные антигены. Они характеризуются высокими защитными свойствами, вызывают синтез антител и могут использоваться для иммунизации.

У вирусов в роли антигенов могут выступать нуклеопротеиды (S-антигены, S — от лат. Solutio — растворимый), компоненты капсида, а также компоненты клеток хозяина (липиды, углеводы), адсорбированные на капсиде. Многие вирусы имеют в составе особый антиген — гемагглютинин, который способен склеивать эритроциты различных животных и человека. Реакция гемагглютинации под влиянием вирусных частиц состоит из двух стадий:

1) адсорбция вирусов на эритроцитах за счет взаимодействия с их гликопротеидными рецепторами;

2) слипание эритроцитов, на которых адсорбированы вирусы, можно наблюдать невооруженным глазом в виде «зонтиков» при постановке диагностической реакции гемагглютинации в плексиглазовых планшетах.

У вируса гриппа и других вирусов, которые продуцируют нейраминидазу, может происходить спонтанная диссоциация смеси вирусы-эритроциты, которая сопровождается освобождением вируса и в ряде случаев гемолизом эритроцитов. Это происходит за счет разрушения рецепторного мукоида эритроцита ферментом нейраминидазой.

Наличие вирусов в культуре можно обнаружить с помощью реакции гемадсорбции. Достаточно нанести эритроциты на поврежденную ткань или орган. Реакции гемагглютинации и гемадсорбции не являются иммунологическими, так как происходят без участия антител.

Но гемагглютинины вирусов способны вызывать образование специфических антител — антигемаглютининов и вступать с ними в реакцию торможения гемагглютинации (РТГА).

У вирусов также различают группоспецифические (в пределах рода или семьи) и типоспецифические (у разных штаммов в пределах одного вида) антигены. Эти различия учитываются при идентификации вирусов.

В связи с распространением аллергических заболеваний в последние годы интенсивно изучаются различные антигены (аллергены), которые могут вызвать неадекватный иммунный ответ с развитием воспалительной реакции (гиперчувствительность немедленного и замедленного типа).

Особая группа антигенов (чаще всего гаптены), которые вызывают реакции гиперчувствительности, — это пыльца растений, шерсть животных, волосы, перья, выделения насекомых, плесневые грибы и их споры, комнатная пыль, косметические, моющие, дезинфицирующие, лекарственные и другие средства. К пищевым аллергенам относятся рыба, молоко, яйца, орехи, томаты, земляника, цитрусовые. Сенсибилизацию к аллергенам могут вызвать амино-, нитро- и азосочетания. При диагностике используют кожные пробы, которые позволяют выявить активный аллерген для определенного лица.

Совершенствование или создание новых вакцин требует знаний структурных и функциональных особенностей вирусных антигенов, различаемых иммунной системой организма.
Вирусными антигенами называются продукты вирусспецифического синтеза, несущие признаки чужеродной генетической информации и вызывающие иммунный ответ. К ним относятся структурные и неструктурные вирусные белки.

Защита от вирусной инфекции зависит от выраженности иммунного ответа на антигены, расположенные на поверхности вирионов или инфицированных клеток. Иммунный ответ на неструктурные вирусные антигены играет меньшую роль в защите от инфекции.

Однако у герпесвирусов , например, клеточный иммунный ответ индуцируется множеством вирусспецифических белков, не входящих в структуру вирионов. Белки герпесвирусов эксперссируются каскадно и большинство нестук-турных белков синтезируется на ранней стадии репликации вируса. После про-цессинга они презентируются МНС классом I (главным комплексом гистосов-местимости, класс I) на плазматической мембране инфицированных клеток и распознаются специфическими цитотоксическими Т-клетками.
Поэтому инфицированные клетки могут различаться эффекторными цитотоксическими Т-лимфоцитами до завершения цикла вирусной репликации.

Каждый вирус представляет собой сложную смесь антигенов, определяемую в первую очередь структурными белками. Являясь сложными корпускулярными антигенами вирусы обычно вызывают выраженный иммунный ответ и большая часть их белков способна вызывать синтез специфических антител. Вирусные белки неравнозначны по своей антигенной активности. Наиболее явные и доступные мишени для иммунного ответа - белки, расположенные на поверхности вирусных частиц. Это прежде всего относится к вирусным гликопротеинам, расположенным на поверхности вирусных частиц, и экспрессированным на поверхности зараженных клеток.
Гликопротеины поверхности оболочечных вирусов и капсидные белки безоболочечных вирусов являются главными протективными антигенами.

Под специфичностью вирусного антигена подразумевают его способность избирательно реагировать с антителами или сенсибилизированными лимфоцитами, являющимися ответом на введение данного антигена. Участок антигена, который узнается специфическим лимфоцитом, и с которым впоследствии взаимодействует специфическое антитело, называется антигенной детерминантой.

Иммунологическая специфичность определяется не всей молекулой антигена, а лишь входящими в ее состав антигенными детерминантами (эпитопами). Участки вирусного белка, индуцирующие образование антител и специфически связывающиеся с ними, принято называть антигенными участками (доменами). Антитела соответствующей специфичности образуются к каждой антигенной детерминанте. Антитела к определенной детерминанте реагируют только с ней или с другой очень сходной структурой. Специфичность антигена определяется совокупностью детерминант, а его валентность - количеством однородных антигенных детерминант. Антигенность детерминант зависит от их пространственной структуры и размера молекулы антигена.

Антигенные детерминанты состоят обычно из 10-20 аминокислотных остатков и содержат гидрофильные группы. Наиболее гидрофильными аминокислотами являются лизин, аргинин, аспарагиновая кислота и глютаминовая кислота. Считается, что те участки молекулы белка, в которых их содержание относительно велико, предпочитают водное окружение и поэтому располагаются на поверхности. Различают линейные (непрерывные) и конформационные (прерывистые) детерминанты. Антитела образуются преимущественно к конформационным детерминантам, расположенным, как правило, на поверхности вирионов, и зависят от третичной структуры молекулы антигена.

Антигенная и иммуногенная активность вирусов определяется, главным образом, конформационными эпитопами. Разные антитела различают специфические антигенные участки вирусных антигенов. Например, прикрепительный гликопротеин (HN) вируса парагриппа имеет, по крайней мере, 6 антигенных сайтов, три из которых различаются нейтрализующими антителами.

Денатурация белков приводит к потере некоторых конформационных детерминант, обнажая ранее экранированные детерминанты. В результате денатурации белки частично или полностью изменяют антигенную специфичность, что может отразиться на иммунном ответе.

Вирионные белки разных вирусов различаются типоспецифичностью и вариабельностью. Одни из них обладают высокой вариабельностью, другие характеризуются консервативностью. Группоспецифические антигены являются высококонсервтивными, находятся обычно внутри вирионов и могут быть сходными у нескольких представителей рода данного семейства вирусов. Например, субвирусные частицы 12S вируса ящура содержат высококонсервативный белок, который выявляется моноклональными антителами одной специфичности у шести из семи известных типов вируса. Однако иммунизация ими не сопровождалась образованием ВН-антител.

Типоспецифические антигены связаны с вариабельными областями белков, обычно расположенными в наружных частях вирионов, и обладают узкой специфичностью, присущей одной группе вирусов.

Совершенствование или создание новых вакцин требует знаний структурных и функциональных особенностей вирусных антигенов, различаемых иммунной системой организма.
Вирусными антигенами называются продукты вирусспецифического синтеза, несущие признаки чужеродной генетической информации и вызывающие иммунный ответ. К ним относятся структурные и неструктурные вирусные белки.
Защита от вирусной инфекции зависит от выраженности иммунного ответа на антигены, расположенные на поверхности вирионов или инфицированных клеток. Иммунный ответ на неструктурные вирусные антигены играет меньшую роль в защите от инфекции.
Однако у герпесвирусов, например, клеточный иммунный ответ индуцируется множеством вирусспецифических белков, не входящих в структуру вирионов. Белки герпесвирусов эксперссируются каскадно (а, (3, у) и большинство нестук- турных белков синтезируется на ранней стадии репликации вируса. После процессинга они презентируются МНС классом I (главным комплексом гистосовместимости, класс I) на плазматической мембране инфицированных клеток и распознаются специфическими цитотоксическими Т-клетками. Поэтому инфицированные клетки могут различаться эффекторными цитотоксическими Т-лимфоцитами до завершения цикла вирусной репликации.
Каждый вирус представляет собой сложную смесь антигенов, определяемую в первую очередь структурными белками. Являясь сложными корпускулярными антигенами вирусы обычно вызывают выраженный иммунный ответ и большая часть их белков способна вызывать синтез специфических антител. Вирусные белки неравнозначны по своей антигенной активности. Наиболее явные и доступные мишени для иммунного ответа - белки, расположенные на поверхности вирусных частиц. Это прежде всего относится к вирусным гликопротеинам, расположенным на поверхности вирусных частиц, и экспрессированным на поверхности зараженных клеток.

Гликопротеины поверхности оболочечных вирусов и капсидные белки без- оболочечных вирусов являются главными протективными антигенами .
Под специфичностью вирусного антигена подразумевают его способность избирательно реагировать с антителами или сенсибилизированными лимфоцитами, являющимися ответом на введение данного антигена. Участок антигена, который узнается специфическим лимфоцитом, и с которым впоследствии взаимодействует специфическое антитело, называется антигенной детерминантой.
Иммунологическая специфичность определяется не всей молекулой антигена, а лишь входящими в ее состав антигенными детерминантами (эпитопами). Участки вирусного белка, индуцирующие образование антител и специфически связывающиеся с ними, принято называть антигенными участками (доменами) . Антитела соответствующей специфичности образуются к каждой антигенной детерминанте. Антитела к определенной детерминанте реагируют только с ней или с другой очень сходной структурой. Специфичность антигена определяется совокупностью детерминант, а его валентность - количеством однородных антигенных детерминант. Антигенность детерминант зависит от их пространственной структуры и размера молекулы антигена.
Антигенные детерминанты состоят обычно из 10-20 аминокислотных остатков и содержат гидрофильные группы. Наиболее гидрофильными аминокислотами являются лизин, аргинин, аспарагиновая кислота и глютаминовая кислота. Считается, что те участки молекулы белка, в которых их содержание относительно велико, предпочитают водное окружение и поэтому располагаются на поверхности. Различают линейные (непрерывные) и конформационные (прерывистые) детерминанты. Антитела образуются преимущественно к конформацион- ным детерминантам, расположенным, как правило, на поверхности вирионов, и зависят от третичной структуры молекулы антигена. Антигенная и иммуноген- ная активность вирусов определяется, главным образом, конформационными эпитопами. Разные антитела различают специфические антигенные участки вирусных антигенов. Например, прикрепительный гликопротеин (HN) вируса парагриппа имеет, по крайней мере, 6 антигенных сайтов, три из которых различаются нейтрализующими антителами .
Денатурация белков приводит к потере некоторых конформационных детерминант, обнажая ранее экранированные детерминанты. В результате денатурации белки частично или полностью изменяют антигенную специфичность, что может отразиться на иммунном ответе.
Вирионные белки разных вирусов различаются типоспецифичностью и вариабельностью. Одни из них обладают высокой вариабельностью, другие характеризуются консервативностью. Группоспецифические антигены являются вы- сококонсервтивными, находятся обычно внутри вирионов и могут быть сходными у нескольких представителей рода данного семейства вирусов. Например, субвирусные частицы 12S вируса ящура содержат высококонсервативный белок, который выявляется моноклональными антителами одной специфичности у ше
сти из семи известных типов вируса . Однако иммунизация ими не сопровождалась образованием ВН-антител.
Типоспецифические антигены связаны с вариабельными областями белков, обычно расположенными в наружных частях вирионов, и обладают узкой специфичностью, присущей одной группе вирусов.
У антигенных вариантов полиовируса устойчивость к нейтрализующим антителам сопровождалась аминокислотными заменами во всех трех наружных капсидных белках. Основным результатом «иммунологических» мутаций вируса ящура во время эпизоотических вспышек (антигенный дрейф) является изменение аминокислотной последовательности в одном капсидном белке VP1 .
Развитие выраженного иммунного ответа против нескольких антигенов, в том числе группоспецифических, еще не гарантирует устойчивости к заражению. Подобное явление имеет место при инфекционной анемии лошадей вследствие вариабельности белка оболочки (env) несмотря на выраженный иммунный ответ на более консервативный внутренний антиген (gag) .
С точки зрения участия Т-хелперов в образовании антител различают тиму- сзависимые и тимуснезависимые антигены. К первым относится большинство антигенов, ко вторым - антигены более простого строения с повторяющимися последовательностями. Тимуснезависимые антигены взаимодействуют непосредственно с В-клетками, поэтому для образования антител взаимодействия В- клеток с Т-хелперами не требуется . Большинство изученных вирусов оказалось Т-зависимыми антигенами. Их иммуногенность в значительной степени определяется количеством антигенных детерминант, распознаваемых Т-хелперами.
В вирусологической практике антигенностью обычно принято называть способность антигена вызывать иммунный ответ, а иммуногенностью - сообщить организму специфическую устойчивость к определенному возбудителю . Имеется, однако, иная, более широкая трактовка этих понятий. Способность антигенов вступать в реакцию с антителами называют антигенностью, а способность их вызывать иммунный ответ (гуморальный или клеточный) - иммуногенностью.
Антигены, играющие основную роль в противовирусном иммунитете, принято называть протективными антигенами . Под протективной активностью антигена понимается его способность защищать иммунизируемый организм от инфицирования или заболевания (при ограничении размножения и распространения вируса). За иммунологическую специфичность и особенно за индукцию протективного иммунитета ответственно небольшое количество потенциально антигенных участков. К протективным антигенам относят белки поверхности вирионов и вирусспецифические антигены, экспрессирующиеся на поверхности инфицированных клеток. Протективные антигены, как правило, представлены более чем одним белком или гликопротеином. Они имеют полимерную структуру и играют основную роль в развитии иммунитета.

В связи с многомишенной антигенной структурой многих вирусов для их эффективной нейтрализации необходимы антитела различной специфичности и соответствующие антигены для создания протективного иммунитета.
В инфицированном организме не все индивидуальные антитела имеют доступы ко всем антигенным сайтам вируса. Они обычно не имеют прямого доступа ко многим функциональным сайтам вирусных протективных антигенов, таких как: рецептор - связывающий сайт; сайты, обладающие ферментативной активностью, и домены слияния. Эти участки в большинстве спрятаны внутри структуры белка протективного антигена. В этих случаях антитела обычно действуют другим способом, чем прямая инактивация функциональных сайтов на поверхности антигенов. Антитела действуют прямо или косвенно, препятствуя прикреплению вируса к клетке, или его раздеванию после прикрепления или проникновению в клетку. Кроме структурных белков вируса, протективный иммунный ответ может быть направлен на неструктурные белки, расположение на поверхности инфицированных клеток. Например, таких как NS1 вируса денге или Т-антиген вируса обезьян 40 (SV40) .
Согласно концепции Р. Лернера , в составе вирусных белков имеются антигенные участки, не проявляющие активности в процессе вакцинации или инфекции, которые, будучи представленными в виде коротких пептидов, способны индуцировать выработку специфических антител. Из этого следует, что представляя антиген иммунной системе «по кусочкам», можно значительно расширить спектр иммунного ответа на данный антиген. В опытах с ротавирусом было установлено, что, если VP7, обычно локализованный в эндоплазматичес- ком ретикулуме и обладающий слабой антигенностью, экспрессировать на клеточной поверхности, то его способность индуцировать гуморальный и клеточный иммунитет возрастает во много раз .
Детерминанты вирионных белков, к которым прикрепляются нейтрализующие антитела, называют нейтрализующими антигенными участками. Нейтрализующий антигенный участок может быть представлен несколькими нейтрализующими эпитопами, различающимися между собой . Например, модель антигенной структуры парамиксовирусов птиц выглядит следующим образом: каждый вирион содержит определенное число идентичных молекул HN, каждая молекула HN содержит 2 домена НА и NA, каждый домен содержит идентичные или отличные друг от друга антигенные детерминанты (эпитопы) . На молекуле гемагглютинина (НА) вируса гриппа находятся два типа нейтрализующих антигенных детерминант: непрерывный (линейный) антигенный участок и кон- формационная детерминанта. Антигемагглютинирующая активность и способность к нейтрализации инфекционное™ не обязательно связаны с одним и тем же типом моноклональных антител, но способность защищать мышей от смертельной инфекции флавивирусами обнаружена только у нейтрализующих антител . Различные белки одного и того же вируса различаются по антигенной активности, например, гликопротеин HN вируса парагриппа-3 вызывал более выраженный гуморальный ответ, чем гликопротеин F. При некоторых вирусных
инфекциях иммунитет связан, главным образом, с сенсибилизированными ци- тотоксическими Т-лимфоцитами. Мишенями для таких клеток чаще всего являются вирионные гликопротеины, а также ранние неструктурные белки, экспрессируемые на поверхности инфицированных клеток. Иммунизация неструктурным белком вызывала развитие протективного иммунитета .
Гликопротеины обол очечных вирусов выполняют ряд важных функций в инфекционном процессе. Они определяют клеточный тропизм (прикрепление к чувствительным клеткам), слияние вирусной и клеточной мембран (проникновение в клетку вирусного генома), участвуют в сборке и почковании дочерних вирионов и, наконец, являются основными детерминантами иммунного ответа в случае инфицирования или вакцинации. Взаимодействие между компонентами иммунной системы и вирусными гликопротеинами сложное и является, скорее всего, определяющим фактором исхода инфекции. Формируя пепломеры на поверхности оболочечных вирусов, гликопротеины являются важнейшими, если не единственными антигенами вирионов, отвечающими за образование нейтрализующих антител. А так как гуморальный иммунитет при инфекциях, вызываемых оболочечными вирусами, как правило, является решающим фактором невосприимчивости, их роли придается большое значение. Информация о поли- пептидном скелете гликопротеинов закодирована в вирусных генах. Эти белки после синтеза экстенсивно гликозилируются клеточными ферментами (глико- зилтрансферазами). Композицию углеводных остатков контролируют как клетки хозяина так и вирусный белок, т. е., в конечном счете, вирус. Гликопротеины, в отличие от внутренних белков оболочечных вирусов, обогащены Cys-остатка- ми, обусловливающими образование дисульфидных мостиков и стабилизацию конформационной структуры.
Гликопротеины оболочечных вирусов относятся к обширному классу так называемых трансмембранных белков эукариот, объединяемых на основе формального признака специфической асимметрической ориентации, при которой часть молекулы погружена в липидный биослой . В структуре вирусных гликопротеинов различают три домена: экто-, трансмембранный и цитоплазматический. Большая часть молекул гликопротеина (примерно около 90% длины, N-концевая область) формирует пепломеры, расположенные на внешней стороне билипидного слоя (эктодомен). Небольшая часть молекулы (С-конец) расположена под липидным слоем и взаимодействует с нуклеокапсидом (цитоплазматический домен).
Часть молекулы, примыкающая к С-концу и представленная приблизительно 20-25 гидрофобными аминокислотами, пронизывает липидный бислой и обеспечивает якорный эффект (трансмембранный домен). Различные структурные домены обладают специфическими функциями. Эктодомен связан с рецепторной и фузогенной функциями, с взаимодействием субъединиц и антител, нейтрализацией вируса. Трансмембранный домен обеспечивает взаимодействие с мембраной, а цитоплазматический - с нуклеокапсидом. Такова структура и организация гемагглютинина вируса гриппа, гликопротеинов G-вирусов везику
лярного стоматита, бешенства, обоих гликопротеинов альфавирусов, гликопротеина В-вируса герпеса и многих других вирусных белков. Однако имеются исключения из общего правила, например, полипептиды нейраминидазы вируса гриппа и белок HN парамиксовирусов «заякориваются» в липидном бислое N-концевыми (также короткими) доменами. Кроме того, в эту модель также не вписываются такие белки, как EI коронавирусов и интенсивно О-гликозилиро- ванные гликопротеины.
Относительно роли углеводного компонента в антигенности и иммуноген- ности вирусных гликопротеинов нет единого мнения. Гликопротеины S и М вируса леса Семлики как в гликозилированной, так и в негликозилированной формах равным образом защищали мышей от летальной инфекции при последующем заражении вирулентным штаммом гомологичного вируса. Дегликозили- рование gpl герпесвируса типа 1 КРС сказывалось отрицательным образом на его антигенной активности, тогда как дегликозилирование gpIV того же вируса существенно не влияло на способность индуцировать синтез ВН-антител и антителозависимую цититоксичность . Корректное гликозилирование рекомбинантного белка Е1 вируса краснухи не являлось непременным условием его антигенности. Введение такого антигена кроликам вызывало образование нейтрализующих антител, которые не подавляли гемагглютинацию вируса . Рекомбинантный аналог gpl20 вируса иммунодефицита человека, экспрессированный в Е. coli, не содержал углеводов, но индуцировал синтез антител, подавляющих репликацию гомологичного штамма вируса. Из этих данных следует, что гликозилирование этого белка не является необходимым для протективного иммунного ответа . В опытах с коронавирусом трансмиссивного гастроэнтерита свиней не установлено разницы в индукции ВН-антител и выраженности протективного иммунитета при использовании вируса с выраженной ГА-активнос- тью и без нее, полученного в результате репродукции в различных клеточных системах. Возможно, что первичное (котрансляционное) гликозилирование вносит больший вклад в формирование конформационных антигенных сайтов гликопротеинов, чем вторичное гликозилирование .
Система репродукции оказывает различное влияние на антигенные и имму- ногенные свойства вирусов. В одних случаях она имеет критическое значение, в других - популяция изменяется постепенно и практически без значительного изменения антигенной структуры, особенно в течение относительно короткого периода пассирования in vitro. Примером этого может служить вирус гриппа, иммуногенность которого снижалась при размножении в куриных эмбрионах по сравнению с культурой клеток млекопитающих (линия MDCK) в течение нескольких пассажей. Различия в популяции вируса, обусловленные хозяинной системой, заключались в замене двух аминокислотных остатков в молекуле ге- магглютинина . Такие изменения могут сопровождаться потерей сайта гликозилирования . При репликации различных РНК-содержащих вирусов (пикорна-, альфа-, флави-, ротавирусов и др.) синтезируются высокомолекулярные вирионные полипротеины, которые подвергаются посттрансляционному
процессингу (расщеплению) вирусспецифическими протеазами, кодируемыми вирусным геномом или предсуществующими в клетках . Например, при репликации пикорнавирусов сначала образуется один белок (полипротеин), который затем расщепляется на четыре вирионных полипептида VP1-VP4. Основным индуктором синтеза вируснейтрализующих антител является VP1. В процессе естественной инфекции и после оральной вакцинации живой вакциной полиовирус подвергается воздействию протеолитических ферментов кишечника, в результате чего могут изменяться его антигенные свойства. Поэтому может оказаться целесообразным изготовлять инактивированную полиовакцину из вируса, обработанного трипсином . Протеолитическая активизация сопровождается значительным усилением репликации реовируса I и повышением инфекционности вирусов оспы. Исследования, проведенные с вирусом оспо- вакцины, показали, что это связано с модификацией трех белков (54, 34 и 17-25 кД) поверхности вириона, которые вместе с двумя другими поверхностными полипептидами (29 и 32 кД) ответственны за нейтрализацию вируса. Расщепление наружного капсидного белка VP2 вируса катаральной лихорадки овец сопровождалось образованием однокапсидных частиц с высокой инфекционно- стью, но утратившим гемагглютинирующую активность . Протеолитичес- кое расщепление gpl 20 (остатки аминокислот 315-316) является необходимым процессом для проявления инфекционности ВИЧ-1. Имеются данные, свидетельствующие об активизации вирусных фузогенных гликопротеинов клеточными протеазами. Для первичной индукции вирусспецифических Тц лимфоцитов необходима протеолитическая активизация гликопротеина F, хотя этого не требовалось для индукции синтеза антител .
Все вирусы гриппа млекопитающих и большинство птичьих штаммов репродуцируются в куриных эмбрионах в основном в неинфекционной форме с нерас- щепленной молекулой ГА. После обработки их in vitro бактериальными протеазами или трипсином значительно повышалась инфекционность. Структура вирусных белков в участке расщепления и наличие подходящей протеазы играют существенную роль в тканевом тропизме, репликации и распространении вируса в организме, то есть инфекционности и патогенезе , а также в иммуногенезе.
Протеолитическое расщепление in vitro может происходить не только внутри клетки, но и на ее поверхности или вне ее за счет плазмина сыворотки питательной среды либо искусственно внесенным в среду трипсином. НА вируса гриппа может расщепляться обоими путями. В первом случае, удаляемый при разрезании соединительный пептид содержит до пяти остатков основных аминокислот, во втором, - один или два. Расщепление НА вируса гриппа сопровождается трансконформацией и, вероятно, изменением антигенных свойств. Расщепление белка F вируса Сендай также сопровождается конформационными изменениями, приводящими к повышению его гидрофобное™ . Таким образом, регулируемый ограниченный протеолиз полипептидов-предшественни- ков - один из основных процессов в формировании биологически активных структурных белков многих вирусов.

Топографическое и функциональное картирование наиболее важных антигенных участков вирусных белков, ответственных за иммунологическую специфичность и особенно за индукцию протективного иммунитета, представляет исключительно важное значение для конструирования современных средств специфической профилактики вирусных инфекций.
Наряду с общими представлениями о вирусных антигенах накоплены сведения, характеризующие индивидуальные особенности различных антигенов многих конкретных вирусов, знание которых важно как для лучшего понимания па- то- и иммуногенеза при отдельных заболеваниях, так и для разработки вакцинных препаратов.
При изготовлении культуральных вакцин существует потенциальная проблема селекции антигенных вариантов вируса. Фенотипическая модификация вирусной популяции, ведущая к изменению антигенных свойств, может возникать и требовать постоянного контроля антигенности в процессе производства.