Besnota u ľudí a zvierat. Besnota

Besnota- akútna infekcia centrálneho nervového systému, sprevádzaná degeneráciou neurónov v mozgu a mieche; Úmrtnosť na túto chorobu dosahuje 100%. Besnota je známa už od staroveku.

Pôvodca besnoty je zaradený do rodu Lyssavirus z čeľade Rhabdoviridae. Zrelé virióny vírusu besnoty majú tvar guľky a veľkosť 75 x 180; jeden koniec je zaoblený, druhý je plochý. Genóm vírusu besnoty je tvorený jednovláknovou, nesegmentovanou molekulou RNA. Jadro viriónu vírusu besnoty je symetricky skrútené vo vnútri obalu pozdĺž pozdĺžnej osi častice. Nukleokapsid vírusu besnoty je doplnený molekulami jadrového proteínu NP) a vírusovou transkriptázou. Enzým vírusu besnoty zahŕňa veľké (L) a malé (NS) proteíny. Nukleokapsida pokrýva superkapsidu, ktorá zahŕňa povrchové glykoproteínové „hroty“. K reprodukcii vírusu besnoty dochádza v cytoplazme bunky. Vírus besnoty nie je stabilný vo vonkajšom prostredí a vystavením slnečnému žiareniu a vysokej teplote sa rýchlo inaktivuje. Vírus besnoty môže prežiť v mŕtvolách zvierat až 3 ~ 4 mesiace; citlivé na pôsobenie rôznych dezinfekčných prostriedkov.

Antigény vírusu besnoty. Patogenéza besnoty. Klinika besnoty. Príznaky besnoty. Pôvodcom besnoty je jeden antigénny variant. Existujú „pevné“ (opravené vírusy) a „pouličné“ vírusy besnoty. „Fixovaný“ typ vírusu besnoty získal Pasteur po opakovaných pasážach na laboratórnych zvieratách; neovplyvňuje periférne nervy. Ochorenie spôsobuje „pouličný“ vírus besnoty. Antigény „fixného“ a „pouličného“ typu vírusu besnoty sú identické.

Epidemiológia. Besnota je rozšírená všade, okrem ostrovných krajín (Anglicko, Karibik atď.). Besnota- typická zoonóza; Rezervoárom patogénu môžu byť takmer všetky cicavce (psi, mačky, hovädzí dobytok, netopiere, líšky, vlky, hlodavce atď.). Hlavná cesta prenosu besnoty- uhryznutím chorým zvieraťom; Je tiež možné, že patogén prenikne cez poškodenú kožu (napríklad škrabance) pri slinení chorého zvieraťa. Vírus besnoty sa objavuje v slinách zvierat niekoľko dní pred nástupom klinických prejavov, čo zvyšuje riziko vzniku besnoty po uhryznutí na 30-40%. Po preniknutí vírusu besnoty do centrálneho nervového systému chorého zvieraťa sa riziko infekcie uhryznutím zníži na 10 %. Existujú dva druhy besnoty – lesná a mestská.

Divoká (lesná) besnota. Hlavnou zásobárňou sú voľne žijúce zvieratá špecifické pre jednotlivé regióny, ako sú skunky (USA), líšky (Rusko, Severná Amerika), netopiere upíry (krajiny Karibiku a Južná Amerika).

Mestské šialenstvo. Najväčšie epidemické nebezpečenstvo predstavujú choré psy (až 90 % všetkých prípadov) a mačky. V Nigérii prenášajú na ľudí vírus Mokola, ktorý je blízky besnote, čo spôsobuje neurologické ochorenia (ochrnutie) so smrteľným následkom.

Patogenéza. Vírus besnoty sa množí v svalovom a spojivovom tkanive, kde pretrváva týždne či mesiace. Vírus besnoty potom migruje pozdĺž axónov periférnych nervov do bazálnych ganglií a centrálneho nervového systému, kde sa množí v sivej hmote a spôsobuje degeneráciu neurónov. Vírus besnoty sa potom šíri pozdĺž odstredivých neurónov do rôznych tkanív (vrátane slinných žliaz).

Klinické prejavy. Dĺžka inkubačnej doby besnoty sa pohybuje od 1-3 mesiacov do roka, ale môže sa skrátiť na 6 dní, čo závisí od vzdialenosti od miesta vstupu vírusu z mozgu. Hlavnými príznakmi prodrómu besnoty sú podráždenosť, nespavosť a poruchy citlivosti (napr. parestézia) v oblasti rany. Besnota sa prejavuje poruchou svalového tonusu, čo vedie k ťažkostiam s prehĺtaním (najskôr tekutej a potom pevnej stravy), generalizovaným kŕčom, delíriu a kóme. V zriedkavých prípadoch sa pozoruje vývoj paralýzy. Prognóza besnoty je mimoriadne nepriaznivá, úmrtnosť dosahuje 100 %.

Mikrobiologická diagnostika. Na izoláciu a identifikáciu pôvodcu besnoty sa používajú viroskopické, biologické a sérologické metódy. Materiálom na testovanie na vírus besnoty sú sliny, krv a rezový materiál (mozgové tkanivo a submandibulárne slinné žľazy). Pomocou mikroskopie zafarbených rezov alebo odtlačkov sa detegujú eozinofilné telieska Babes-Negri s veľkosťou 5-10 μm, tvorené zhlukmi vírusových nukleokapsidov, v bunkách mozgovej kôry, ammonových úst a mozočku. Inklúzne telieska sa nachádzajú v blízkosti jadier a majú nerovnomerné obrysy. Rezy a odtlačky sa používajú aj na detekciu Ag vírusu besnoty v týchto tkanivách pomocou RIF alebo RNIF. Pôvodca besnoty sa izoluje intracerebrálnou infekciou myší a králikov slinami chorých ľudí alebo čerstvým rezným materiálom. U zvierat sa vyvinie paralýza so smrteľným výsledkom a v mozgových tkanivách v RIF a RNIF možno nájsť inklúzne telieska a vírus Ag. AT na vírus besnoty u očkovaných jedincov sa zisťuje v RSK, RN, RIF atď.

Liečba a prevencia. Spočiatku sa rany alebo uhryznutie liečia antiseptikami; Oblasti slinenia sa umyjú mydlovou vodou. Potom vykonajte konkrétne imunoprofylaxia vakcínou proti besnote a imunoglobulínom proti besnote. Pred vykonaním by ste mali venovať pozornosť povahe lézie (uhryznutie alebo slinenie), druhu zvieraťa podozrivého z besnoty, okolnostiam útoku (vyprovokované alebo nevyprovokované), prítomnosť predchádzajúcej prevencie očkovania proti besnote (aspoň v ľudia) a ďalšie prípady besnoty v regióne.

Na aktívnu imunizáciu boli navrhnuté živé oslabené a usmrtené vakcíny. V súčasnosti vakcíny vyrobené z oslabeného alebo usmrteného vírusu besnoty pestovaného na nervových bunkách nahrádzajú kultivované vakcíny z oslabeného vírusu získaného na rôznych bunkových líniách. Takéto vakcíny sú bez vedľajších účinkov (encefalitída, paralýza v dôsledku skrížených reakcií s Ag neurónmi), sú viac imunogénne a nevyžadujú takéto opakované podávanie. Podľa plánu sa vakcína podáva 1., 3., 7., 14. a 28. deň; vakcínu možno považovať za terapeutické a profylaktické činidlo, pretože špecifické ochranné reakcie majú čas na rozvoj počas inkubačnej doby. AT na povrchový glykoproteín Ag má neutralizačný účinok na patogén besnoty.

Keď sa objavia klinické príznaky besnoty, nie je možné pacientov zachrániť. Symptomatická liečba sa vykonáva na zmiernenie utrpenia pacienta. Prevencia besnoty zahŕňa kontrolu choroby v prírode a prevenciu očkovaním. Je potrebné vakcinovať všetky domáce a hospodárske zvieratá, bojovať proti prirodzeným ohniskám besnoty (sledovať počet zvierat a likvidovať choré), zavádzať vakcinačné návnady do nádrží a pri dovoze zvierat uplatňovať prísne karanténne opatrenia. Povinné očkovanie sa vykonáva u rizikových skupín – odchytávačov, veterinárnych lekárov a pod.

Logiku besnoty dokázal v roku 1903 P. Remlenger.

Taxonómia. Pôvodcom besnoty je RNA vírus, ktorý patrí do čeľade Rhabdoviridae (z gréckeho rhabdos – vetvička), rodu Lyssavirus.

Morfológia a chemické zloženie. Virióny guľkového tvaru (pozri obr. 2.10) s veľkosťou 170 x 70 nm pozostávajú z jadra obklopeného lipoproteínovým obalom s tŕňmi glykoproteínovej povahy. RNA je jednovláknová, mínusvláknová.

Kultivácia. Vírus besnoty sa kultivuje v mozgovom tkanive bielych myší, sýrskych škrečkov, králikov, potkanov, morčiat, oviec atď. U infikovaných zvierat sa vyvinie paralýza končatín a potom uhynú. Vírus besnoty môže byť adaptovaný na primárne a kontinuálne bunkové kultúry a kuracie embryá. V cytoplazme vírusom postihnutých zvieracích mozgových buniek alebo tkanivových kultúr sa vytvárajú špecifické inklúzie, ktoré prvýkrát popísali V. Babesch (1892) a A. Negri (1903) a preto sa nazývajú telieska Babes-Negri. Inklúzie guľovitého alebo oválneho tvaru s veľkosťou od 0,5 do 20 mikrónov sa ľahko farbia kyslými farbivami, obsahujú vírusový antigén a majú diagnostickú hodnotu.

Antigénna štruktúra. Vírus besnoty obsahuje jadrové a povrchové antigény. Glykoproteínový antigén (chrbticový proteín) má výrazné imunogénne vlastnosti. Existujú dva vírusy besnoty, ktoré sú identické v antigénnych vlastnostiach: divoký, cirkulujúci medzi zvieratami, patogénny pre ľudí, nazývaný pouličný vírus, a fixovaný vírus (virus fixe), ktorý L. Pasteur získal v laboratóriu prostredníctvom dlhodobého prechody pouličného vírusu cez mozog králikov. Kvôli strate virulencie pre ľudí L. Pasteur použil tento vírus ako vakcínu proti besnote.

Odpor. Vírus besnoty nie je stabilný v prostredí: rýchlo umiera pod vplyvom slnečného žiarenia a UV žiarenia, dezinfekčných prostriedkov (fenol, chlóramín, formaldehyd) a je citlivý na tukové rozpúšťadlá a alkalické roztoky. Dá sa skladovať dlhodobo pri nízkych teplotách (-20 °C).

Epidemiológia. Besnota je známa už od staroveku. Ide o typickú zoonotickú infekciu, ktorá je rozšírená po celom svete. Všetky teplokrvné zvieratá môžu dostať besnotu. Kvôli zvláštnostiam prenosového mechanizmu (uhryznutím) však cirkuláciu vírusu v prírode zabezpečujú voľne žijúce a domáce mäsožravce, najmä psy, vlky, líšky, psíky mývalovité, šakaly a mačky. Prirodzené ohniská besnoty sa nachádzajú všade. Osoba je náhodným článkom v epidemickom procese a nezúčastňuje sa cirkulácie vírusu v prírode.

Vírus besnoty sa hromadí a uvoľňuje sa cez slinné žľazy zvieraťa počas choroby a v posledných dňoch inkubačnej doby. Mechanizmom prenosu patogénu je priamy kontakt, najmä uhryznutím, v menšej miere s nadmerným slinením kože, ktorá má škrabance a odreniny. Úloha chorého človeka ako zdroja nákazy je minimálna, hoci jeho sliny obsahujú vírus besnoty. Existujú len ojedinelé prípady infekcie z človeka na človeka.

Patogenéza a klinický obraz. Vírus besnoty má výrazné neurotropné vlastnosti. Z miesta zavlečenia sa vírusy dostávajú do centrálnej nervovej sústavy pozdĺž periférnych nervových vlákien, množia sa v nej a potom sa odstredivo šíria, pričom postihujú celý nervový systém vrátane nervových ganglií niektorých žľazových orgánov, najmä slinných žliaz. V druhom z nich sa vírusy množia a uvoľňujú sa do prostredia so slinami.

Inkubačná doba besnoty u ľudí sa pohybuje od 7 dní do 1 roka alebo viac, v závislosti od miesta a povahy poškodenia, ako aj od virulencie kmeňa. Najkratšia inkubácia sa pozoruje pri rozsiahlych uhryznutiach do hlavy.

V klinickom obraze besnoty u ľudí sa rozlišujú tieto obdobia: prekurzory (prodromálne), vzrušenie a paralýza. Choroba začína objavením sa pocitu strachu, úzkosti, podráždenosti, nespavosti, celkovej nevoľnosti a zápalovej reakcie v mieste uhryznutia. V druhom období ochorenia sa prudko zvyšuje reflexná excitabilita, objavuje sa hydrofóbia (fóbia z vody), kŕčovité kontrakcie svalov hltana a dýchacích svalov, čo sťažuje dýchanie; zvyšuje sa slinenie, pacienti sú vzrušení, niekedy agresívni. Po niekoľkých dňoch dochádza k ochrnutiu svalov končatín, tváre a dýchacích svalov. Trvanie ochorenia je 3-7 dní. Úmrtnosť 100%.

Imunita. Prirodzene získaná imunita nebola študovaná, pretože choroba zvyčajne končí smrťou. Umelo získaná imunita vzniká po očkovaní ľudí uhryznutých besnými zvieratami. Je to spôsobené tvorbou protilátok, ktoré pretrvávajú počas celého roka, tvorbou interferónu, ako aj faktorov bunkovej imunity.

Laboratórna diagnostika. Laboratórne štúdie sa vykonávajú posmrtne. Kúsky mozgu a miechy a submandibulárnych slinných žliaz sa používajú ako testovací materiál v súlade s pravidlami stanovenými pre prácu s obzvlášť nebezpečným infekčným materiálom.

Expresná diagnostika je založená na detekcii špecifického antigénu pomocou RIF a ELISA a teliesok Babes-Negri. Vírus sa izoluje pomocou biologického testu na bielych myšiach.

Špecifická prevencia a liečba. Vakcíny proti besnote vyvinul a navrhol L. Pasteur. Vakcíny získané z mozgu infikovaných zvierat - králikov, oviec - môžu spôsobiť komplikácie, preto sa používajú len zriedka. U nás sa používa koncentrovaná vakcína proti besnote, získaná z kmeňa Vnukovo-32 (odvodeného z fixovaného Pasteurovho vírusu), inaktivovaná UV alebo gama lúčmi.

Terapeutické a profylaktické očkovanie sa podáva osobám pohryznutým alebo slineným od chorých zvierat alebo zvierat podozrivých z besnoty. Očkovanie by sa malo začať čo najskôr po uhryznutí. V závažných prípadoch sa používa kombinované podávanie imunoglobulínu proti besnote a vakcíny. Vyvíjajú sa geneticky upravené vakcíny proti besnote. Liečba je symptomatická.

13.2.2. Herpes simplex vírus

Herpes simplex je jednou z najčastejších ľudských vírusových infekcií, ktorá sa vyznačuje horúčkou a pľuzgierovitými vyrážkami, ktoré sú najčastejšie lokalizované na koži a slizniciach. Dôležitými znakmi herpetickej infekcie sú celoživotné prenášanie vírusu a časté recidívy ochorenia.

Vírusová povaha herpes simplex bola stanovená v roku 1912 W. Grüterom.

Taxonómia, morfológia, chemické zloženie. Pôvodcom herpes simplex je DNA vírus, ktorý patrí do čeľade Herpesviridae, rod Simplexvirus. Morfológiou a chemickým zložením sa nelíši od vírusov varicella zoster a herpes zoster (pozri obr. 2.10 v časti 11.2.7).

Kultivácia. Herpes simplex vírus (HSV) sa kultivuje v kuracích embryách, bunkových kultúrach a laboratórnych zvieratách. Na chorioalantoickej membráne kuracích embryí tvorí vírus malé biele husté plakové uzliny; v infikovaných kultúrach - spôsobuje cytopatický efekt: tvorbu obrovských mnohojadrových buniek s intranukleárnymi inklúziami.

Antigénna štruktúra. Vírus obsahuje množstvo antigénov spojených s vnútornými proteínmi a glykoproteínmi vonkajšieho obalu. Posledne menované sú hlavné imunogény, ktoré vyvolávajú tvorbu protilátok a bunkovú imunitu. Existujú dva sérotypy vírusu: HSV typu 1 a HSV typu 2.

Odpor. Vírus dokáže prežiť na povrchu predmetov pri izbovej teplote niekoľko hodín, je citlivý na UV žiarenie, bežné dezinfekčné prostriedky, tukové rozpúšťadlá a je tepelne labilný.

Vnímavosť zvierat. Vírus herpes simplex je patogénny pre mnohé zvieratá, u ktorých spôsobuje encefalitídu pri zavedení patogénu do mozgu alebo lokálny zápalový proces pri infekcii oka. V prirodzených podmienkach zvieratá neochorejú.

Epidemiológia. Herpes simplex je jednou z najčastejších infekcií, ktorá postihuje rôzne vekové skupiny ľudí, častejšie v období jeseň-zima. Vyskytujú sa sporadické prípady ochorenia, niekedy malé ohniská v rodinách, detských skupinách a nemocniciach. Nie sú pozorované žiadne epidémie.

Zdrojom infekcie sú pacienti a nosiči. Hlavný prevodový mechanizmus je kontaktný, aerogénny. Infekcia sa vyskytuje, keď vírusy vstúpia do poškodenej kože alebo slizníc.

Epidemiológia herpesu spôsobeného vírusmi typu 1 a 2 je odlišná. HSV typu 1 sa prenáša slinami, slinami kontaminovanými rukami a predmetmi v domácnosti a HSV typu 2 sa prenáša sexuálnym kontaktom. Infekcia plodu cez placentu je možná.

Patogenéza a klinický obraz. Na základe klinických prejavov sa rozlišuje primárny a recidivujúci herpes. Vstupnými bránami patogénu počas primárnej herpetickej infekcie sú poškodené oblasti kože a slizníc úst, očí, nosa a urogenitálneho traktu, kde sa vírusy rozmnožujú. Potom vírusy vstupujú do krvi cez lymfatické cievy a sú prenášané do rôznych orgánov a tkanív.

Inkubačná doba primárneho herpesu je v priemere 6-7 dní. Choroba začína pálením, svrbením, začervenaním, opuchom v obmedzených oblastiach kože a slizníc, potom sa v tejto oblasti objavia vezikulárne vyrážky naplnené kvapalinou. Niekedy je choroba sprevádzaná zvýšením telesnej teploty a porušením celkového stavu. Keď bubliny vyschnú, netvoria sa žiadne jazvy. Primárny herpes u novorodencov je závažný a často končí smrťou. U väčšiny ľudí však primárna infekcia zostáva nerozpoznaná, pretože je asymptomatická.

Po primárnej infekcii (otvorenej a asymptomatickej) zostáva 70-90% ľudí celoživotnými nosičmi vírusu, ktorý zostáva latentný v nervových bunkách senzorických ganglií. Nosiči často zažívajú recidívy choroby v dôsledku podchladenia, prehriatia, menštruácie, intoxikácie, rôznych infekčných ochorení, stresu a neuropsychických porúch. Opakovaný herpes je charakterizovaný opakovanými vyrážkami na koži a slizniciach, často na rovnakých miestach. Najbežnejšia lokalita

Štruktúra a chemické zloženie. Virióny majú tvar guľky alebo tyče s rozmermi 170 x 70 nm. Odtiaľ pochádza názov rodiny (gr. rabdos- tyč). Na vonkajšej strane je obal obsahujúci lipid s procesmi, ktoré z neho vychádzajú, v strede je nukleokapsida špirálovej symetrie, oddelená od vonkajšieho obalu matricovým proteínom.

Genóm obsahuje jednovláknovú, nefragmentovanú mínus RNA.

Odkazuje na rod Lyssavirus(grécky Lyssa- besnota). Spôsobuje smrteľnú infekciu u zvierat a ľudí, ktorá sa vyznačuje nezvratným poškodením neurónov v centrálnom nervovom systéme. V roku 1885 L. Pasteur experimentálne zdôvodnil metódu na zoslabenie dosiaľ neznámeho patogénu a získal vakcínu proti besnote. V roku 1892 V. Babes a v roku 1903 A. Negri opísali špecifické inklúzie v neurónoch mozgu zvierat, ktoré zomreli na besnotu (negriho telá). Je známych niekoľko príbuzných biovarov patogénu: „divoký“ vírus jeleňov, arktických líšok a líšok v Arktíde, vírus netopierov v Amerike, vírus „šialeného psa“ v západnej Afrike atď.

Pestovanie a rozmnožovanie. Vírus besnoty sa kultivuje v obličkových bunkových kultúrach novonarodených škrečkov a v ľudských diploidných bunkách. Cytopatogénna aktivita je variabilná. Vírus sa môže adaptovať na kuracie a kačacie embryá, keď sú infikované v žĺtkovom vaku.

Patogenéza a imunita. Vírus zostáva na vstupnej bráne infekcie niekoľko dní. Zdá sa, že k primárnej reprodukcii dochádza vo svalových bunkách v mieste uhryznutia. Potom sa vírusové častice dostanú k zakončeniam senzorických periférnych nervov, pohybujú sa pozdĺž ich axiálnych valcov a perineurálnych priestorov (až 3 mm za hodinu), pričom ovplyvňujú neuróny miechy a mozgu. Rôzne rýchlosti, ktorými sa vírus pohybuje pozdĺž nervových kmeňov, môžu vysvetliť dĺžku inkubačnej doby infekcie. Je minimálna (do 10-14 dní), keď patogén preniká cez pokožku hlavy a tváre a najdlhšie (1,5 mesiaca a viac) uhryznutím na končatinách (ruky, nohy). Intenzívna reprodukcia vírusu sa vyskytuje v neurónoch, čo vedie k objaveniu sa cytoplazmatických teliesok Babes-Negri obsahujúcich vírusové nukleokapsidy. Obzvlášť intenzívne sú postihnuté neuróny amónneho rohu, medulla oblongata a Purkyňove bunky mozočku.

Telo syntetizuje vírus neutralizujúce protilátky, ktoré môžu mať ochranný účinok predtým, ako patogén prenikne do buniek centrálneho nervového systému.

Laboratórna diagnostika besnota sa zvyčajne vykonáva po

smrť zvieraťa alebo osoby pri detekcii teliesok Babes-Negri v neurónoch mozgu a miechy, v bunkách slinných žliaz, detekcia vírusového antigénu v postihnutých tkanivách pomocou imunofluorescenčnej reakcie. V slinách chorých ľudí a v mozgoch mŕtvych môže byť prítomnosť vírusu určená intracerebrálnou infekciou bielych myší, u ktorých sa rozvinie paralýza končatín a čoskoro uhynú.

Odoslanie dobrej práce do databázy znalostí je jednoduché. Použite nižšie uvedený formulár

Študenti, postgraduálni študenti, mladí vedci, ktorí pri štúdiu a práci využívajú vedomostnú základňu, vám budú veľmi vďační.

Uverejnené dňa http://www.allbest.ru/

Na tému: „Vírus besnoty“

Moskva 2016

Úvod

Besnota je akútne, obzvlášť nebezpečné vírusové ochorenie, ktoré spôsobuje vážne poškodenie nervového systému, zvyčajne so smrťou. Jedna z najnebezpečnejších a najzávažnejších infekčných chorôb ľudí a zvierat. Besnota sa vyskytuje s príznakmi poškodenia centrálneho nervového systému, ktoré sa vyznačujú nezvyčajným správaním, nevyprovokovanou agresivitou a paralýzou. Ochorenie u zvierat končí najčastejšie smrťou. Vnímaví sú ľudia a všetky teplokrvné živočíchy okrem vtákov. Voľne žijúce zvieratá môžu ochorieť latentne, bez smrti.

Besnotu opísali starí lekári Východu už v roku 3000, Demokritos v roku 500 a Aristoteles viac ako 300 rokov pred naším letopočtom. Problém boja proti besnote zostáva dodnes jedným z najdôležitejších na svete. Zvláštne nebezpečenstvo besnoty spočíva v tom, že doteraz neboli nájdené žiadne účinné prostriedky na liečbu už vyvinutého patogénneho procesu. Preto je zakázané liečiť zvieratá s besnotou, ich okamžitá likvidácia je legalizovaná.

Vyskytuje sa prirodzený typ besnoty, ktorej ohniská tvoria divá zver, a mestský typ besnoty. Domáce zvieratá sa nakazia besnotou po kontakte s chorými voľne žijúcimi zvieratami.

Besnota je zaznamenaná na všetkých kontinentoch sveta (s výnimkou Antarktídy, Austrálie a Nového Zélandu) a bola identifikovaná u zvierat patriacich k viac ako 30 druhom. Každý rok na svete zomrie na besnotu viac ako 50 tisíc ľudí a viac ako 1 milión zvierat.

Antigénna diagnostika vírusu besnoty

1. Charakteristika vírusu

1.1 Taxonómia vírusu

Vírus besnoty obsahujúci RNA, patrí do čeľade Rhabdoviridae (grécky Rhabdos - palica), rodu Lyssavirus (z gréckeho lyssa - hydrofóbia). Okrem vírusu besnoty rod Lyssavirus zahŕňa ďalších 5 vírusov (Lagos, Moсola, Duvenhage, Kotonkan, Obodhiang), ktoré sú izolované z netopierov a komárov v Afrike a spôsobujú choroby psov, mačiek a hospodárskych zvierat, avšak bez klinického obrazu besnoty.

1.2 Morfológia viriónu

Pôvodca besnoty je charakterizovaný viriónom v tvare tyčinky alebo guľky: s jedným plochým a druhým zaobleným koncom, pokrytým superkapsidovou škrupinou (peplos) s peplomérovými výbežkami: medzi superkapsidou a kapsidou je stredná membrána (matrix), špirálový typ symetrie má 5 štruktúrnych proteínov: L (RNA polymeráza ), G, M, NS, N . Vírus je dlhý približne 180 nanometrov a má prierez približne 75 nanometrov. Genóm jednovláknový lineárny mínus RNA.

1.3 Udržateľnosť

Vírus besnoty nie je vo vonkajšom prostredí vysoko odolný. Skladuje sa pri teplote 6°C do 1 týždňa, pri 23°C 28-53 dní, pri 54-56°C hodinu, pri 70°C 1-2 minúty, 100°C - okamžite zomrie. Ultrafialové žiarenie inaktivuje vírus za 5-10 minút. Je odolný voči nízkym teplotám a v zmrazených mozgoch prežíva mesiace; v hnijúcom materiáli zostáva životaschopný 2 - 3 týždne. V mozgu mŕtveho zvieraťa zahrabaného v zemi vírus pretrváva 45 dní alebo viac. Opakované zmrazovanie a rozmrazovanie vírus nezničí.

1-5% roztok formalínu, 5-7% roztok jódu, bielidlo, 3-5% roztok kyseliny chlorovodíkovej, 45-70% etylalkohol a 1% roztok mydla inaktivuje vírus po 5 minútach, 0,1% roztok sublimátu - po 2 -3 hodiny, 5% roztok fenolu - po 5-10 minútach, éter - po 60-120 hodinách.

1.4 Štádiá rozmnožovania vírusu

Reprodukcia vírusov čeľade Rhabdoviridae prebieha v cytoplazme hostiteľskej bunky. Rabdovírusy sa viažu na receptory hostiteľskej bunky cez superkapsidové G glykoproteíny a do bunky vstupujú endocytózou (1). Potom, po odstránení superkapsidy, uvoľnený ribonukleoproteín (RNP) vstupuje do bunkovej cytoplazmy (2). V cytoplazme hostiteľskej bunky sa pomocou RNA-dependentnej RNA polymerázy (3) syntetizujú neúplné (4) plus RNA vlákna (päť individuálnych mRNA na syntézu vírusových proteínov) a kompletné (6) plus RNA vlákna, ktoré sú matricou pre syntézu genómovej RNA (7). Počas translácie mRNA ribozómami (5) hostiteľskej bunky sa syntetizujú vírusové proteíny. Glykoproteín G sa glykolizuje v endoplazmatickom retikule a potom sa nakoniec premení na Golgiho komplex a začlení sa do plazmalemy hostiteľskej bunky (8). Matricový proteín (M proteín) je ihneď po syntéze integrovaný do plazmalemy z vnútornej cytoplazmatickej strany lipidovej dvojvrstvy. Zahrnutie matricového proteínu M do plazmalemy je signálom pre tvorbu viriónu. Ribonukleoproteín vzniká interakciou genómovej mínus RNA a proteínov N, NS a L (disjunktívny typ reprodukcie vírusu). Po zostavení virióny opúšťajú hostiteľskú bunku pučaním (9).

1.5 Antigénne vlastnosti

Antigénna štruktúra.

Virióny vírusu besnoty obsahujú glykoproteínové (vonkajšie) a nukleokapsidové (vnútorné) antigény. Glykoproteínový antigén indukuje tvorbu vírus-neutralizujúcich a antihemaglutinačných protilátok a zabezpečuje rozvoj imunity u zvierat a nukleokapsidový antigén indukuje komplement fixujúce a precipitujúce protilátky.

Vírus besnoty má 4 sérotypy (prototypy): vírus besnoty, Lagos, Mokola, Duvenhage. Epizootické kmene vírusu besnoty sú imunobiologicky príbuzné, líšia sa však virulenciou. Všetky izolované vírusové kmene sú rozdelené do 5 skupín na základe virulencie. Kmene prvej skupiny sa vyznačujú vysokou a piata skupina - nízkou virulenciou.

Spektrum patogenity vírusu úzko súvisí s jeho ekológiou, ktorá má svoje vlastné charakteristiky. Preto je potrebné rozlišovať medzi dvoma hlavnými a nezávislými epizootickými prejavmi lyssavírusovej infekcie:

1) epizootika besnoty podporovaná suchozemskými zvieratami (líšky, vlci, psík mývalovitý, šakaly, mangusty, skunky, mývaly atď.);

2) epizootika chiropterického pôvodu, podporovaná upírmi, hmyzožravými a mäsožravými netopiermi.

Od 60. rokov minulého storočia sa besnota u voľne žijúcich zvierat stala rozšírenou. Hlavným rezervoárom a zdrojom nákazy boli líšky a iné voľne žijúce zvieratá. Choroba v nich môže prebiehať latentne, čím sa zabezpečí pretrvávanie vírusu v prirodzených podmienkach. Besnota u psov počas mestských epizootií zvyčajne končí ich smrťou.

Antigénna aktivita.

Zvieratá imunizované proti besnote produkujú vírus neutralizujúce, komplement fixujúce, precipitačné, antihemaglutinačné a lytické (ničiace bunky infikované vírusom v prítomnosti komplementu) protilátky.

1.6 Hemaglutinačné a hemadsorpčné vlastnosti

Hemadsorbčné vlastnosti vírusu besnoty v kultúre primárnych obličkových buniek sýrskeho škrečka opísali M. A. Selimov a R. Sh. Fenomén hemadsorpcie sa reprodukoval s erytrocytmi husí, kurčiat, škrečkov sýrskych, morčiat a opíc pri teplote 4 °C; špecificita tohto javu bola potvrdená inhibíciou pomocou imunitného séra po trojnásobnom premytí nebola hemadsorpcia zničená a nebola reprodukovaná s inými kmeňmi vírusu besnoty.

Vírus má hemaglutinačné vlastnosti proti červeným krvinkám husí, kurčiat, morčiat, oviec a ľudí (skupina 0). Typicky sa hemaglutinačná reakcia uskutočňuje s husacími červenými krvinkami pri 0-4 °C, pH 6,2-6,4. Medzi infekčnou a hemaglutinačnou aktivitou existuje lineárny vzťah.

1.7 Vlastnosti pestovania v rôznych živých systémoch

V laboratórnych podmienkach je možné vírus kultivovať na laboratórnych zvieratách (myši, králiky, škrečky, morčatá atď.) intracerebrálnou metódou infekcie. Vírus sa reprodukuje v primárnych a kontinuálnych bunkových kultúrach (obličky sýrskeho škrečka, embryá oviec, teľatá, BHK-21, bunky neurómu gangliového ganglia potkana, atď.). V prvých pasážach sa vírus množí pomaly, bez toho, aby spôsobil CPE. Kuracie embryá sú po predbežnej adaptácii tiež citlivé na vírus besnoty.

Ľahko sa reprodukuje na všetkých druhoch teplokrvných živočíchov.

1.7 Patogenéza orgánov

1. fáza - prenikanie vírusu kontaktom uhryznutím alebo kontaktom sekrétu obsahujúceho vírus s ranou;

2. fáza - primárna reprodukcia a akumulácia v bunkách submukóznej vrstvy kože;

3. fáza - primárna diseminácia pozdĺž dostredivých neurónov v centrálnom nervovom systéme (neuroprosbasia);

4. fáza - sekundárna reprodukcia a akumulácia v mozgových bunkách;

5. štádium - sekundárna diseminácia pozdĺž odstredivých neurónov do periférnych orgánov (septinúria);

Štádium - izolácia vírusu so sekrétmi (sliny) a exkrétmi (slzná tekutina, krv, moč, výkaly atď.

2. Diagnóza ochorenia

2.1 Stanovenie predbežnej diagnózy

Analýza epizootických údajov.

Pôvodca besnoty je podľa epizootologickej klasifikácie zaradený do skupiny prirodzených fokálnych infekcií. V súčasnosti existujú v Rusku tri typy infekcie besnotou:

1) Arktída (nádrž - polárne líšky);

2) prírodná ohnisková lesostep (nádrž - líšky);

3) antropourgické (nádrž - mačky, psy).

Berúc do úvahy povahu rezervoáru patogénu, epizootika besnoty sa rozlišuje medzi mestskými a prírodnými typmi. V mestských epizootiách sú hlavnými zdrojmi patogénu a šíriteľov choroby túlavé a túlavé psy. Rozsah epizoocie závisí od ich počtu. V prirodzených epizootiách chorobu šíria najmä voľne žijúce dravce. Lokalizácia prirodzených ložísk choroby zodpovedá distribučným vzorcom líšok, líšok, psíkov medvedíkovitých, vlkov, šakalov a líšok polárnych. Sú veľmi citlivé na vírus, agresívne, často náchylné na migráciu na veľké vzdialenosti a pri chorobe intenzívne vylučujú vírus v slinách. Tieto okolnosti spolu s výraznou populačnou hustotou niektorých predátorov (líška, psík medvedíkovitý), rýchlou výmenou ich generácií a dĺžkou inkubačnej doby besnoty zabezpečujú kontinuitu epizootického procesu, a to aj napriek pomerne rýchlemu úhynu každého z nich. jednotlivé choré zviera.

Charakteristika klinických príznakov.

Inkubačná doba sa pohybuje od niekoľkých dní do 1 roka a v priemere je 3-6 týždňov. Jeho trvanie závisí od typu, veku, odolnosti zvieraťa, množstva preniknutého vírusu a jeho virulencie, lokalizácie a charakteru rany.

Ochorenie je často akútne. Klinický obraz je podobný u všetkých druhov zvierat, ale bol lepšie študovaný u psov. Besnota sa zvyčajne prejavuje v dvoch formách: násilná a tichá. Pri násilnej besnote sa rozlišujú tri obdobia: prodromálna, agitovanosť a paralýza.

Prodromálne obdobie (prekurzorové štádium) trvá od 12 hodín do 3 dní. Toto obdobie začína miernou zmenou správania. Choré zvieratá sa stávajú apatickými, nudnými, vyhýbajú sa ľuďom, snažia sa schovať na tmavom mieste a zdráhajú sa reagovať na volanie majiteľa. V iných prípadoch sa pes stáva láskavým k svojmu majiteľovi a známym a snaží sa olizovať si ruky a tvár. Potom sa úzkosť a excitabilita postupne zvyšujú. Zviera si často ľahne a vyskočí, bezdôvodne šteká, je zvýšená reflexná dráždivosť (svetlo, hluk, šelest, dotyk atď.), objavuje sa dýchavičnosť, rozšírené zreničky. Niekedy dochádza k silnému svrbeniu v mieste uhryznutia, zviera olizuje, škrabe a hlodá oblasť. Ako choroba postupuje, často sa objavuje zvrátená chuť do jedla. Pes žerie nejedlé predmety (kamene, sklo, drevo, zem, vlastné výkaly atď.). Počas tohto obdobia sa vyvíja paréza hltanových svalov. Zaznamenávajú sa ťažkosti s prehĺtaním (zdá sa, že sa pes niečím zadusil), slintanie, chrapľavý a náhly štekot, neistá chôdza a niekedy aj škúlenie.

Druhé obdobie je vzrušenie, trvá 3-4 dni a je charakterizované zosilnením vyššie opísaných symptómov. Zvyšuje sa agresivita, pes môže bezdôvodne pohrýzť iné zviera alebo človeka, dokonca aj svojho majiteľa, obhrýza železo, palice, zem, často si láme zuby a niekedy aj spodnú čeľusť. Chorí psi majú zvýšenú túžbu vymaniť sa a utiecť do jedného dňa, besný pes nabehne desiatky kilometrov, pričom po ceste hryzie a nakazí iných psov a ľudí. Typické je, že pes potichu pribehne k zvieratám a ľuďom a hryzie ich. Po záchvatoch násilia, ktoré trvajú niekoľko hodín, nasledujú obdobia útlaku. Postupne sa rozvíja ochrnutie jednotlivých svalových skupín. Zmena hlasu psa je obzvlášť nápadná v dôsledku ochrnutia laryngeálnych svalov. Štekot znie chrapľavo, pripomína kvílenie. Tento znak má diagnostickú hodnotu. Spodná čeľusť je úplne paralyzovaná a ochabnutá. Ústna dutina je neustále otvorená, jazyk vypadne do polovice a dochádza k hojnému slineniu. Súčasne dochádza k paralýze prehĺtacích svalov a svalov jazyka, v dôsledku čoho zvieratá nemôžu jesť potravu. Objaví sa strabizmus.

Tretie obdobie je paralytické, trvá 1-4 dni. Okrem ochrnutia dolnej čeľuste sú ochrnuté zadné končatiny, svaly chvosta, močového mechúra a konečníka, potom svaly trupu a predných končatín. Telesná teplota v excitovanom štádiu stúpa na 40-41 ° C a v paralytickom štádiu klesá pod normál. V krvi je zaznamenaná polymorfonukleárna leukocytóza, počet leukocytov je znížený a obsah cukru v moči sa zvyšuje na 3%. Celkové trvanie ochorenia je 8-10 dní, ale často môže smrť nastať po 3-4 dňoch.

Pri tichej (paralytickej) forme besnoty (častejšie pozorovanej, keď sú psy infikované líškami), je vzrušenie slabo vyjadrené alebo nie je vyjadrené vôbec. Pri úplnej absencii agresivity zviera zažíva silné slintanie a ťažkosti s prehĺtaním. Potom psy zažívajú ochrnutie dolnej čeľuste, svalov končatín a trupu. Choroba trvá 2-4 dni.

Atypická forma ochorenia nemá štádium excitácie. Zaznamenáva sa úbytok svalov a atrofia. Boli zaznamenané prípady besnoty, ktoré sa vyskytli iba s príznakmi hemoragickej gastroenteritídy: vracanie, polotekuté výkaly obsahujúce krvavé slizničné hmoty. Ešte menej častý je abortívny priebeh ochorenia, ktorý končí uzdravením, a recidivujúca besnota (po zjavnom uzdravení sa opäť rozvinú klinické príznaky ochorenia).

Charakteristika patologických zmien

Patoanatomické zmeny nie sú špecifické, ale spolu s klinickými príznakmi môžu mať diagnostickú hodnotu. Mŕtvola je vychudnutá, srsť strapatá, na niektorých miestach hojne zvlhčená slinami, koža často poranená.

Pri pitve mŕtvol psov, ktorí zomreli na besnotu, nájdu: prázdny žalúdok alebo cudzie predmety v ňom; venózna hyperémia, krvácanie a erózia v žalúdočnej sliznici; zhrubnutie krvi (anhydrémia), suché serózne tkanivo, podkožné tkanivo a koža; celková venózna kongescia: cyanóza slizníc, akútna venózna hyperémia pečene, pľúc, sleziny, mozgu; histo: nehnisavá lymfocytová encefalitída v mozgovom kmeni (quadrigemol, pons, medulla oblongata); uzliny besnoty v mozgovom kmeni a autonómnych gangliách; Babes Negri telieska v nervových bunkách amónových rohov. Mŕtvoly podozrivé z nákazy besnotou je zakázané otvárať!

2.2 Druhy patologického materiálu

Na testovanie na besnotu sa do laboratória posielajú čerstvé celé mŕtvoly malých zvierat a z veľkých a stredne veľkých zvierat - hlava s prvými dvoma krčnými stavcami. Mŕtvoly malých zvierat sú pred odoslaním na výskum ošetrené insekticídmi.

Patologický materiál je zabalený v plastových vreciach a umiestnený v tesne uzavretých krabiciach s vložkou absorbujúcou vlhkosť napustenou dezinfekčným prostriedkom. Materiál a sprievodný list, v ktorom je uvedený odosielateľ a jeho adresa, druh zvieraťa, anamnestické údaje a dôvod podozrenia na besnotu zvieraťa, dátum a podpis lekára sú zasielané kuriérom.

2.3 Etapy laboratórnej diagnostiky

Laboratórna diagnostika zahŕňa: detekciu vírusového antigénu v ELISA (tuhá fáza, sendvičová verzia), MFA (RIF, priama verzia), RDP, Babes-Negriho telieska (už sa nepoužíva) a biotest na bielych myšiach.

MZV. Pre túto reakciu biopriemysel vyrába fluorescenčný g-globulín proti besnote.

Tenké odtlačky alebo nátery sa pripravujú na beztukové podložné sklíčka z rôznych častí mozgu na ľavej a pravej strane (ammonov roh, mozgová kôra, mozoček a predĺžená miecha). Pripravia sa aspoň dva preparáty z každej časti mozgu. Môžete tiež preskúmať miechu a submandibulárne slinné žľazy. Na kontrolu sa vyrábajú prípravky z mozgu zdravého zvieraťa (zvyčajne bielej myši).

Prípravky sa sušia na vzduchu, fixujú sa vo vychladenom acetóne (mínus 15–20 °C) na 4 až 12 hodín, sušia sa na vzduchu, aplikuje sa špecifický fluorescenčný g-globulín a umiestnia sa do vlhkej komory pri 37 °C na 25 -30 minút. Potom sa dôkladne premyjú fyziologickým roztokom alebo fosfátovým pufrom s pH 7,4, opláchnu destilovanou vodou, vysušia na vzduchu, nanesú nefluorescenčným imerzným olejom a prezerajú pod fluorescenčným mikroskopom. V prípravkoch obsahujúcich antigén vírusu besnoty sa v neurónoch, ale častejšie mimo buniek, pozorujú žltozelené fluorescenčné granuly rôznych veľkostí a tvarov. Pri kontrole by nemala existovať žiadna taká žiara nervové tkanivo zvyčajne žiari matnou sivastou alebo zelenkastou farbou. Intenzita žiary sa hodnotí v krížikoch. Výsledok sa považuje za negatívny, ak neexistuje žiadna špecifická fluorescencia.

Materiál zo zvierat očkovaných proti besnote nemožno vyšetrovať v RIF 3 mesiace po vakcinácii, pretože môže dôjsť k fluorescencii antigénu vírusu vakcíny.

Tkanivá konzervované glycerínom, formaldehydom, alkoholom atď., ako aj materiál, ktorý vykazuje známky čo i len mierneho rozkladu, nie sú predmetom skúmania v RIF.

RDP v agarovom géli. Metóda je založená na vlastnosti protilátok a antigénov difundovať v agarovom géli a po stretnutí vytvárať vizuálne viditeľné precipitačné línie (komplex antigén + protilátka). Používa sa na detekciu antigénu v mozgu zvierat, ktoré uhynuli na vírus pouličnej besnoty alebo počas experimentálnej infekcie (biotest).

Reakcia sa uskutočňuje na podložných sklíčkach, na ktoré sa naleje 2,5-3 ml roztaveného 1,5% roztoku agaru.

Agarový gél: Difko agar - 15 g, chlorid sodný - 8,5 g, 1% roztok metyl pomaranča v 50% etylalkohole - 10 ml, mertiolát - 0,01 g, destilovaná voda - 1000 ml.

Po vytvrdnutí v agare sa pomocou šablóny s priemerom 4-5 mm urobia jamky, ktoré sa umiestnia pod podložné sklíčko s agarom. Agarové stĺpce sa odstránia študentským perom. Jamky v agare sú naplnené komponentmi podľa schémy.

U veľkých zvierat sa skúmajú všetky časti mozgu (ľavá a pravá strana) u stredných zvierat (potkany, škrečky atď.) - ľubovoľné tri časti mozgu u myší - celý mozog; Pomocou pinzety sa z mozgu pripraví hmota podobná paste, ktorá sa vloží do príslušných jamiek.

Kontroly s pozitívnymi a negatívnymi antigénmi sa umiestnia na samostatné sklo pomocou rovnakej šablóny.

Po naplnení jamiek komponentmi sa prípravky umiestnia do vlhkej komory a umiestnia sa do termostatu pri 37 °C na 6 hodín, potom sa nechajú pri izbovej teplote 18 hodín. Výsledky sa zaznamenajú do 48 hodín.

Reakcia sa považuje za pozitívnu, keď sa medzi jamkami obsahujúcimi mozgovú suspenziu a g-globulín proti besnote objaví jedna alebo dve alebo tri čiary precipitácie akejkoľvek intenzity.

Bakteriálna kontaminácia a rozpad mozgu nebránia jeho použitiu na RDP. Materiál konzervovaný glycerínom, formalínom a inými prostriedkami je pre RDP nevhodný.

Detekcia tiel Babes-Negri. Tenké šmuhy alebo odtlačky sa urobia na podložné sklíčka zo všetkých častí mozgu (ako v prípade RIF), najmenej dva preparáty z každej časti mozgu a zafarbia sa pomocou jednej z metód (podľa Sellersa, Muromtseva, Manna, Lenza, atď.).

Za pozitívny výsledok sa považuje prítomnosť teliesok Babes-Negri - jasne definovaných oválnych alebo podlhovastých zrnitých útvarov ružovo-červenej farby, ktoré sa nachádzajú v cytoplazme buniek alebo mimo nich.

Táto metóda má diagnostickú hodnotu len vtedy, keď sa zistia typické špecifické inklúzie.

Biotest. V porovnaní so všetkými vyššie uvedenými metódami je efektívnejšia. Umiestňuje sa, keď sa predchádzajúcimi metódami získajú negatívne výsledky a v pochybných prípadoch.

Na biotest sa vyberú biele myši s hmotnosťou 16 až 20 g. Nervové tkanivo zo všetkých častí mozgu sa rozomelie v mažiari so sterilným pieskom, pridá sa fyziologický roztok, čím sa získa 10 % suspenzia, nechá sa 30 až 40 minút. supernatant sa použije na infekciu myší. Pri podozrení na bakteriálnu kontamináciu pridajte 500 jednotiek penicilínu a streptomycínu na 1 ml suspenzie a nechajte pôsobiť 30-40 minút pri izbovej teplote.

Na jeden biologický test sa infikuje 10-12 myší: polovica intracerebrálne 0,03 ml, polovica subkutánne v oblasti nosa alebo hornej pery 0,1-0,2 ml.

Infikované myši sa umiestnia do sklenených nádob (najlepšie akvárií) a sledujú sa 30 dní, pričom sa vedú denné záznamy. Smrť myší do 48 hodín sa považuje za nešpecifickú a pri hodnotení výsledkov sa neberie do úvahy. V prítomnosti vírusu besnoty v patologickom materiáli sa od 7. do 10. dňa po infekcii u myší pozorujú tieto symptómy: naježená srsť, zvláštny hrbatý chrbát, zhoršená koordinácia pohybov, ochrnutie zadných končatín. U mŕtvych myší sa mozog skúma v RIF, aby sa detegovali telá Babes-Negri, a umiestni sa RDP.

Biotest na besnotu sa považuje za pozitívny, ak sa telá Babes Negri nájdu v preparátoch z mozgu infikovaných myší alebo sa antigén deteguje metódami RIF alebo RDP. Negatívnou diagnózou je neprítomnosť úhynu myší do 30 dní.

Na včasnú diagnostiku pomocou metódy biologického testu (toto je dôležité najmä vtedy, keď skúmané zviera pohrýzlo človeka) sa odporúča použiť na infekciu nie 10-12, ale 20-30 myší a od tretieho dňa po infekcii zabiť 1 -2 myšiam denne na štúdium ich mozgu v RIF. To umožňuje (v pozitívnych prípadoch) skrátiť dobu štúdia o niekoľko dní.

V laboratórnej praxi sa niekedy používa takzvaná špecifická bioanalytická metóda. Jeho podstatou je, že myši ochorejú pri infekcii mozgového tkaniva zvierat besnotou a neochorejú, ak je toto tkanivo vopred ošetrené (10 minút pri 37°C) sérom proti besnote.

Zvyčajne sa v laboratóriu uskutočňuje štúdia v nasledujúcom poradí: z mozgu sa urobia odtlačky prstov na RIF a detekciu teliesok Babes-Negri, umiestni sa RDP a ak sa získajú negatívne výsledky, vykoná sa biologický test.

Ak sa vykonáva vysoko kvalifikovaným spôsobom, výsledkom RIF je 99-100% zhoda s biologickým testom. Telá Babesh-Negri sa zisťujú iba v 65-85% prípadov besnoty, v PRV - od 45 do 70%.

3. Špecifická prevencia

Imunita a špecifická prevencia.

V súčasnosti sa na prevenciu besnoty používajú inaktivované a živé vakcíny. Bežne možno vakcíny rozdeliť:

vakcíny prvej generácie, ktoré sa pripravujú z mozgu zvierat infikovaných fixovaným vírusom besnoty;

vakcíny druhej generácie, ktoré sú pripravené z kmeňov vírusu besnoty prispôsobených bunkovej kultúre;

Vakcíny tretej generácie, ktoré sa získavajú pomocou metód genetického inžinierstva.

Neexistujú žiadne účinné spôsoby liečby besnoty, preto je mimoriadne dôležitá špecifická prevencia. V súčasnosti sa v rôznych krajinách na výrobu vakcín proti besnote používajú tieto oslabené kmene: Pasteurov kmeň Paris, PV-11 alebo PM, CVS, Flury Lep, Flury Hep, Kelev, Era, Sad B-19, Vnukovo, Shchelkovo-51, C- 80,71 BelNIIEV-VGNKI, KMIEV-94 atď. Reprodukcia vírusu sa vykonáva hlavne v bunkových kultúrach pomocou valcových alebo suspenzných metód. Najčastejšie používané sú kontinuálne bunkové kultúry BHK-21, Wj-38, MRC-5, Vero, MDBK, oblička saiga atď. Všetky vakcíny proti besnote používané v prevencii besnoty sa delia na živé a inaktivované. Inaktivované vakcíny sú vakcíny obsahujúce vírus besnoty, ktorých infekčné vlastnosti sú inaktivované jednou z chemických alebo fyzikálnych metód. Ako adjuvans sa používajú hlavne soli hliníka. Pri podaní zvieratám alebo ľuďom sa očkovací vírus nedokáže množiť a pôsobí v tele len ako antigén. Tieto vakcíny sú najbezpečnejšie. Mechanizmus účinku živých vakcín je založený na skutočnosti, že oslabený vírus, množiaci sa v tele, ovplyvňuje imunitný systém a vyvoláva tvorbu imunity.

V súčasnosti sa inaktivované vakcíny používajú najmä na parenterálnu vakcináciu zvierat. Na účely prevencie sa vakcíny podávajú 1-2 krát v nútených prípadoch po výskyte infekcie sa počet injekcií zvyšuje na 5 alebo viac. Vyrábajú sa podľa určitých schém. Imunita nastáva za 25-30 dní a trvá až rok alebo viac. V krajinách SNŠ sa na preventívne a povinné očkovanie zvierat používajú domáce vakcíny z kmeňov vírusov Shchelkovo-51, S-80, 71 BelNIIEV-VGNKI, ako aj vakcíny vyrobené v Holandsku, Francúzsku a ďalších krajinách. Živé vakcíny sa používajú najmä na orálnu vakcináciu voľne žijúcich mäsožravcov proti besnote. Okrem celoviriónových vakcín proti besnote sa v súčasnosti používa vysokoúčinná geneticky upravená vakcína obsahujúca povrchový glykoproteín vírusu besnoty a rekombinantná vakcína na báze vírusu pravých kiahní. Mechanizmus postvakcinačnej imunity u besnoty nie je úplne rozlúštený. Je však dokázané, že jeho intenzita koreluje s titrom vírus-neutralizujúcich protilátok v krvi, na stanovenie ktorých sa používa vírusová neutralizačná reakcia u bielych myší alebo v bunkovej kultúre, ako aj metóda ELISA.

Preventívne a eliminačné opatrenia.

Boj proti besnote sa uskutočňuje spoločným úsilím veterinárnych, lekárskych a komunálnych služieb, polície, lesníctva, ochrany prírody, poľovníckych a hospodárskych organizácií a miestnych zastupiteľstiev. Systém opatrení na prevenciu besnoty u zvierat a ľudí zahŕňa nasledujúce hlavné opatrenia.

1. Špecifická prevencia besnoty rozšírením rozsahu orálnej imunizácie voľne žijúcich mäsožravcov a zlepšením kvality vakcín používaných na tento účel. Tieto opatrenia vedú v prevencii besnoty a používajú sa vo všetkých krajinách sveta. Perorálne vakcíny v jedlých návnadách sú distribuované v oblastiach nezasiahnutých a ohrozených besnotou. Skúsenosti viacerých krajín (Česká republika, Švajčiarsko, Francúzsko, Nemecko) ukazujú, že pri masovom používaní v priebehu niekoľkých rokov môže toto opatrenie výrazne znížiť až eliminovať výskyt besnoty u zvierat.

2. Zníženie populácie voľne žijúcich šeliem, najmä líšok, ich odstrelom, zabezpečenie zachovania druhu (1-2 jedince na 1000 hektárov). Regulácia početnosti voľne žijúcich šeliem sa vykonáva odstrelom, hubením mláďat v brlohoch, používaním návnad s uspávacími prostriedkami alebo jedovatými látkami (luminal, fluoroacetát bárnatý a pod.) a vykonávajú ju poľovnícke organizácie.

3. Boj proti túlavým psom a mačkám vytváraním útulkov pre poslednú záchranu, sterilizáciou sučiek a pod. Odchyt a likvidáciu túlavých psov a mačiek, ktoré sú hlavnými šíriteľmi besnoty v obývaných oblastiach, vykonávajú mestské oddelenia verejnej správy. služby, ktoré organizujú špeciálne tímy.

4. Zefektívniť chov domácich psov a mačiek, plošne ich zaočkovať proti besnote. Vakcína proti besnote robí psov imúnnymi voči infekcii vírusom besnoty. Imunita sa objaví 3-4 týždne po očkovaní a trvá asi rok, preto sa očkovanie musí každoročne opakovať.

5. Vykonávanie osvetovej práce medzi obyvateľstvom o nebezpečenstve besnoty a opatreniach na jej predchádzanie. Všetky nedávne prípady ochorení a úmrtí ľudí na besnotu sú spojené s ich nedostatkom základných vedomostí o prevencii tejto choroby.

6. Preventívna imunizácia proti besnote pre osoby, ktorých profesionálna činnosť zahŕňa vysoké riziko nákazy vírusom besnoty.

Opatrenia pri prepuknutí besnoty.

Vykonávanie činností v ohnisku besnoty do značnej miery závisí od včasnej diagnózy choroby, preto sú majitelia vo všetkých prípadoch podozrenia na besnotu alebo úhyn zvieraťa z nej povinní urýchlene hlásiť veterinárnu inštitúciu alebo miestnu radu. Prichádzajúci veterinárny lekár musí na mieste stanoviť diagnózu alebo materiál zaslať na vyšetrenie do veterinárneho laboratória a prijať vhodné opatrenia. Keď sa objaví besnota, lokalita (alebo jej časť) je vyhlásená za nebezpečnú a je zavedená karanténa. Veterinárni pracovníci za účasti hygienicko-epidemiologickej služby vykonávajú opatrenia na zamedzenie ďalšieho šírenia nákazy a jej elimináciu. Zvieratá s besnotou sú zničené. Ich mŕtvoly sa bez odstránenia kože spália alebo pochovajú na pohrebisku pre dobytok do hĺbky najmenej 2 m. Miesta, kde sa nachádzali choré zvieratá, sa dezinfikujú 2-3% roztokom hydroxidu sodného alebo formaldehydu. Podstielka a predmety starostlivosti o zvieratá s nízkou hodnotou sa spália, kovové predmety sa vyvaria alebo spália v plameni. Na neutralizáciu oblečenia sa odporúča vyvárať alebo žehliť horúcou žehličkou. Preskúmaním ohniska, rozhovormi s obyvateľmi a podomovým prieskumom lokality sa identifikujú všetci ľudia a zvieratá, ktoré prišli do kontaktu s chorými zvieratami. Ľudia, ktorí boli v kontakte s chorým zvieraťom, musia byť okamžite odoslaní do zdravotníckeho zariadenia na konzultáciu. Všetci podozriví a infikovaní psi a mačky sú zlikvidovaní a tí, ktorí uhryznú ľudí alebo zvieratá, podliehajú 10-dňovej karanténe. Hospodárske zvieratá podozrivé z nákazy musia byť očkované vakcínou proti besnote podľa nútenej schémy. Zabíjanie takýchto zvierat na mäso je povolené, ak nevykazujú známky besnoty. Mäso sa používa bez obmedzenia, s výnimkou hlavy a uhryznutých oblastí tela, ktoré sú zničené. Mlieko je možné konzumovať až po 5 minútach varenia alebo pasterizácie. Karanténa proti besnote sa ruší po uplynutí dvoch mesiacov od dátumu posledného prípadu ochorenia.

Záver

V mnohých krajinách, vr. av Rusku sa v posledných rokoch epizootická situácia týkajúca sa besnoty skomplikovala. Niektorí výskumníci poznamenávajú, že napriek prebiehajúcim opatreniam proti besnote v regiónoch a Rusku ako celku nebolo možné úplne obmedziť šírenie besnoty.

Podľa ruských štatistík za prvý štvrťrok 2014 bola besnota zvierat zistená v 37 zakladajúcich subjektoch Ruskej federácie vrátane Moskvy a Moskovskej oblasti. Už tradične zostáva Petrohrad a Leningradská oblasť bez besnoty. Smutnými lídrami sú Belgorodská oblasť (79 prípadov u zvierat), Saratovská oblasť (64 prípadov), Moskovská oblasť (40), Voronežská oblasť (37) a Tambovská oblasť (36). V tomto štvrťroku ochoreli (a zomreli) dvaja ľudia – v regióne Kursk a Vladimir.

Napriek tomu, že základné mechanizmy šírenia besnoty sú už dobre známe, sú k dispozícii veľmi spoľahlivé prostriedky na prevenciu ochorenia a bola vyvinutá stratégia boja proti infekcii, je pred nami ešte veľa práce na zlepšenie účinnosť ochrany zvierat a ľudí pred smrteľnou chorobou. Je dôležité včas identifikovať choré zvieratá a izolovať zvieratá podozrivé z choroby a infekcie. Ochrana hospodárskych zvierat pred útokmi chorých ľudí, likvidácia mŕtvol. Pre prevenciu „divokej besnoty“ - odchyt, odstrel, odplynenie nôr, orálna imunizácia, aerosólová imunizácia netopierov v jaskyniach, imunizácia dobytka.

V dôsledku toho sú hlavnými smermi ochrany ľudí a zvierat kontrola a regulácia epizootickej situácie, imunizácia zvierat a ľudí liekmi a používanie čoraz spoľahlivejších a bezpečnejších metód.

Bibliografia:

1. R.V. Belousová, I.V. Treťjaková, M.S. Kalmyková, E.I. Yarygina Manuál o veterinárnej virológii. Moskva 2011

2. Makarov V.V. Skutočná epizootológia besnoty. Bulletin Ruskej akadémie poľnohospodárskych vied. 2002.

3. Movseyants A.A. Moderné problémy besnoty. Veterinárne a medicínske aspekty zooantroponóz. 2003.

4. http://news.sarbc.ru/main/2014/03/28/151713.html

5. http://www.bestreferat.ru/referat-182318.html

6. Baryšnikov, P.I. Veterinárna virológia [Text]: učebnica / P.I. Baryšnikov.- M.: FORUM, 2009. - 96 s.

7. Gruzdev, K.N. Besnota zvierat [Text] / K.N. Gruzdev, V.V. Nedosekov: Aquarium LTD, 2001. - 304 s.

8. Besnota [Elektronický zdroj] / Režim prístupu: http://www.vetzverocenter.ru/index.php?catid=73&module=catalog.

9. Typy besnoty [Elektronický zdroj] / Režim prístupu: http://www.medintime.ru/medtimes-57-1.html.

10. „Divočina“ a besnota v polárnych oblastiach Ruska, Kanady, USA [Elektronický zdroj] / Režim prístupu: http://nepropadu.ru/blog/guestroom/5883.html.

11. http://viralzone.expasy.org/

Uverejnené na Allbest.ru

...

Podobné dokumenty

Štúdium besnoty v 19. storočí. Varianty vírusu besnoty. Purifikácia a koncentrácia kultivovaného vírusu. Reprodukcia vírusu besnoty. Chemická štruktúra a biologická aktivita subvírusových zložiek. Inkubačná doba a štádiá ochorenia.

abstrakt, pridaný 23.12.2010


Charakteristika, taxonómia vírusu, morfológia viriónu. Etapy reprodukcie. Hemaglutinačné a hemadsorpčné vlastnosti. Vlastnosti kultivácie v rôznych živých systémoch. Diagnóza koronavírusovej enteritídy u psov. Etapy laboratórnej diagnostiky.

abstrakt, pridaný 27.04.2016


Besnota ako akútne infekčné ochorenie spôsobené neurotropným vírusom, taxonómia. Morfológia virionov. Štádiá rozmnožovania vírusov a patogenézy orgánov. Mechanizmus jeho detekcie u zvierat a ľudí, princípy diagnostiky a liečebný režim.

prezentácia, pridané 03.06.2014


Prvé príznaky besnoty, ktorá sa objavuje po uhryznutí infikovaným zvieraťom. Inkubačná doba ochorenia. Zdroje vírusových ochorení. Štúdium citlivosti vírusu na ultrafialové žiarenie, priame slnečné svetlo a etanol. Metódy liečby besnoty.

prezentácia, pridané 18.09.2014


Prenikanie vírusu besnoty do tela. Zdroje vírusu besnoty. Ako sa infekcia vyskytuje od chorého zvieraťa? Inkubačná doba a prvé príznaky. Hlavné obdobia ochorenia. Prevencia ochorenia podávaním vakcíny proti besnote.

prezentácia, pridané 03.03.2016


Stručná história besnoty ako choroby ľudí a teplokrvných zvierat. Etiológia, patogenéza a spôsoby prenosu infekcie besnotou. Inkubačná doba a klinické príznaky ochorenia. Metódy diagnostiky, liečby a prevencie besnoty.

abstrakt, pridaný 11.2.2012


Pojem papilloma vírus ako epiteliotropný vírus schopný infikovať epitelové bunky ektodermálneho pôvodu, jeho typy a formy. Štádiá a klinický obraz choroby, jej diagnostika a prístupy k liečbe, etiológia a patogenéza.

abstrakt, pridaný 01.06.2015


Definícia pojmu a symptómov hemoragickej horúčky Ebola. Prehľad laboratórnych štúdií kauzálneho vírusu. Prenos vírusu cez sliznice, mikrotraumy kože. Klinický obraz a patogenéza ochorenia, diagnostika a liečba.

prezentácia, pridané 22.05.2015


Charakteristika a spôsoby prenosu patogénu besnoty. Mechanizmus rozmnožovania a šírenia vírusu, inkubačná doba. Príznaky ľudskej choroby. Diagnostika, liečba a prevencia chorôb. Podmienené a bezpodmienečné kurzy očkovania proti besnote.

abstrakt, pridaný 28.03.2015


Besnota u psov. Prvý klinický opis besnoty u ľudí. Infekcia zvierat a ľudí, keď choré zviera uhryzne alebo sliní na poškodenú kožu. Klinický obraz besnoty. Prevencia a liečba chorôb u ľudí.

Besnota je akútne infekčné ochorenie ľudí a zvierat, ktoré postihuje centrálny nervový systém. Jeho príčinou sú vírusy, ktoré majú tropizmus pre tkanivá nervového systému, kde sa po uhryznutí chorým zvieraťom pohybujú rýchlosťou 3 mm za hodinu. Po replikácii a nahromadení v tkanivách centrálneho nervového systému sa vírusy šíria neurogénnymi cestami do iných orgánov, najčastejšie do slinných žliaz.

Výskyt ochorenia závisí od miesta a závažnosti uhryznutia. V 90% prípadov sa choroba vyvíja s uhryznutím na krku a tvári, v 63% - v rukách, v 23% - v ramene. Príznaky a symptómy besnoty vo všetkých štádiách ochorenia sú vysoko špecifické. Neexistujú žiadne účinné spôsoby liečby choroby. Ochorenie je zvyčajne smrteľné. Včasné očkovanie proti besnote je najúčinnejšou prevenciou ochorenia. Vakcínu proti besnote prvýkrát získal v roku 1885 francúzsky mikrobiológ Louis Pasteur. A v roku 1892 Victor Babes a v roku 1903 A. Negri opísali špecifické inklúzie v neurónoch mozgu zvierat, ktoré zomreli na besnotu (telá Babes-Negri).

Ryža. 1. Na fotografii sú vírusy besnoty.

Vírus besnoty

Filtrovateľný vírus besnoty je členom rodu Lyssavírus(z gréckeho lyssa, čo znamená besnota, démon) rodina Rhabdoviridae.

Vírus besnoty má tropizmus pre nervové tkanivo.

• Vírusy besnoty sú citlivé na teplo. Rýchlo sa inaktivujú, keď sú vystavené pôsobeniu alkálií, jódu, detergentov (syntetické povrchovo aktívne látky) a dezinfekčných prostriedkov (lysol, chlóramín, kyselina karbolová a kyselina chlorovodíková).
• Vírusy sú citlivé na ultrafialové žiarenie, pri sušení rýchlo umierajú a po uvarení do 2 minút.
• Pri nízkych teplotách a mrazoch pretrvávajú vírusy besnoty dlhodobo. V mŕtvolách zvierat ich možno skladovať až 4 mesiace.

Vírusy sa na človeka prenášajú uhryznutím slinami alebo poškodenou kožou, ktorá obsahuje sliny chorého zvieraťa. Poškodenie centrálneho nervového systému nevyhnutne vedie k smrti pacienta. Prítomnosť vírusov v centrálnom nervovom systéme je indikovaná detekciou „Babes-Negriho teliesok“ v gangliových bunkách.

Ryža. 2. Na fotografii sú vírusy besnoty, ktoré svojím vzhľadom pripomínajú guľku. Jeden koniec je zaoblený, druhý je plochý. K syntéze vírusových častíc dochádza v cytoplazme neurónov.

Ryža. 3. Na fotografii je vírus besnoty. Virión je obklopený dvojitým plášťom. Na vonkajšom obale vírusových častíc sú hroty (výčnelky) s hrboľatými opuchmi na koncoch. Vo vnútri viriónov sa nachádza vnútorná zložka, ktorou je vláknitý útvar. Fotografia jasne ukazuje priečne pruhy predstavujúce nukleoproteín.

Býk Babesha-Negri

V roku 1892 V. Babes a v roku 1903 A. Negri opísali špecifické inklúzie v cytoplazme neurónov v mozgu zvierat, ktoré zomreli na besnotu. Nazývajú sa telá Babesh-Negri. Veľké neuróny amónneho rohu, pyramídové bunky mozgových hemisfér, Purkyňove bunky mozočku, neuróny optického talamu, bunky predĺženej miechy a gangliá miechy sú oblasti nervového systému, kde sa najviac nachádzajú Babes-Negriho telá. často nájdené.

Cytoplazmatické inklúzie sú prísne špecifické pre chorobu besnoty

Telá Babes Negri sa detegujú v neurónoch mozgu psov, ktorí zomreli na besnotu v 90 - 95% prípadov, u ľudí - v 70% prípadov.

Podľa mnohých výskumníkov sú telá Babes Negri:

• miesta, kde dochádza k replikácii viriónov
• miesta, kde dochádza k tvorbe a akumulácii špecifického antigénu patogénu besnoty,
• Vnútorná granularita teliesok Babes-Negri predstavuje vírusové častice spojené s bunkovými prvkami.

Ryža. 4. Na fotografii sú nervové bunky s cytoplazmatickými inklúziami. Telá Babes Negri majú rôzne tvary – okrúhle, oválne, guľovité, amébovité a vretenovité.

Ryža. 5. Na fotografii je telo Babesh-Negri. Vnútorná zrnitosť inklúzií predstavuje vírusové častice spojené s bunkovými prvkami.

Ryža. 6. Na fotografii je telo Babes-Negri vo svetle bežného mikroskopu. Sú obklopené ľahkým lemom.

Replikácia vírusových častíc u besnoty je vždy sprevádzaná tvorbou špecifických inklúzií – teliesok Babes-Negri.

Epidemiológia

Články v sekcii "Besnota".Najpopulárnejší