Ko ietekmē trakumsērgas vīruss? Sanitārā mikrobioloģija

1. Mainīgie, fiksētie un kardinālie krusti Šajā nodaļā mēs esam apkopojuši vecos Morijas diktātus, gatavojoties nākamās grāmatas par astroloģiju rakstīšanai. Tomēr mēs nekad nevarējām uzsākt šo plānoto darbu tā vienkāršā iemesla dēļ

MU 3.3.1.1099-02

METODISKIE NORĀDĪJUMI

3.3.1. VAKCĪNU PROFILAKSE

Drošība darbā ar fiksēta trakumsērgas vīrusa ražošanas celmiem

Ieviešanas datums 2002-04-01

1. IZSTRĀDĀJA Krievijas Federācijas Veselības ministrijas Krievijas pētniecības institūts "Mikrobs" (MD I.A. Djatlovs, PhD A.K. Nikiforovs, PhD S.A. Eremins); vārdā nosauktais Valsts medicīnas bioloģisko preparātu standartizācijas un kontroles institūts. L.A. Tarasevičs no Krievijas Federācijas Veselības ministrijas (Dr. A.A. Movsesyants, Ph.D. I.A. Ozeretskovsky, pētnieks G.B. Ageenko).

3. APSTIPRINĀTS Krievijas Federācijas galvenais valsts sanitārais ārsts - Krievijas Federācijas veselības ministra pirmais vietnieks G.G.Oņiščenko 2002.gada 15.janvārī. Stājusies spēkā 2002.gada 1.aprīlī.

4. IEVADS PIRMO REIZI.

1 izmantošanas joma

1 izmantošanas joma

1.1. Šīs vadlīnijas ir izstrādātas saskaņā ar federālo likumu "Par iedzīvotāju sanitāro un epidemioloģisko labklājību", kas datēts ar 1999. gada 30. martu N 52-FZ, "Noteikumi par valsts sanitārajiem un epidemioloģiskajiem standartiem" un sanitārajiem noteikumiem "Darba drošība". ar III-IV patogenitātes grupas mikroorganismiem un helmintiem. SP 1.2.731-99".

1.2. Šo vadlīniju prasības ir obligātas Krievijas Federācijas veidojošo vienību veselības iestādēm un iestādēm.

2. Normatīvās atsauces

Šajās vadlīnijās ir izmantotas atsauces uz šādiem normatīvajiem dokumentiem:

2.1. 1999. gada 30. marta federālais likums "Par iedzīvotāju sanitāro un epidemioloģisko labklājību" N 52-FZ

2.2. Sanitārie noteikumi "Drošība darbā ar III-IV patogenitātes grupas mikroorganismiem un helmintiem. SP 1.2.731-99".

2.3. Sanitārie noteikumi "I-IV patogenitātes grupu mikroorganismu uzskaites, uzglabāšanas, pārvietošanas un transportēšanas kārtība. SP 1.2.036-95".

2.5. Sanitārie noteikumi eksperimentālo bioloģisko klīniku (vivāriju) projektēšanai, aprīkojumam un uzturēšanai, apstiprināti. PSRS Veselības ministrijas 1973. gada 6. aprīļa N 1045-73.

2.6. Būvnormatīvi un noteikumi "Sabiedriskās ēkas un būves". SNiP 2.08.02-89 un “Veselības aprūpes iestāžu projektēšanas rokasgrāmata” 5 sējumos. - T.1, 3, 5. Gosgrazhdanstroy. - M., 1989. gads.

2.7. OST-42-21-2-85 "Medicīnisko ierīču sterilizācija un dezinfekcija. Metodes, līdzekļi. Režīmi."

2.8. Rīkojums "Par kaitīgo, bīstamo vielu un ražošanas faktoru pagaidu sarakstu apstiprināšanu, kā arī darbu, kuru laikā tiek veiktas sākotnējās un periodiskās medicīniskās pārbaudes", apstiprināts. Veselības un medicīnas rūpniecības ministrija un Krievijas Valsts sanitārās un epidemioloģiskās uzraudzības komiteja, datēta ar 05.10.95 N 280/88.

2.9. "Ventilācijas iekārtu darbības un efektivitātes uzraudzības instrukcija veselības aprūpes iestādēs", apstiprināta. PSRS Veselības ministrija ar 1975. gada 20. martu

2.11. "Vadlīnijas par baktericīdu lampu lietošanu iekštelpu gaisa un virsmu dezinfekcijai", apstiprināts. Krievijas Veselības un medicīnas rūpniecības ministrija, 28.02.95 N 11-16/03-06.

2.12. "Vadlīnijas tvaika un gaisa sterilizatoru darbības uzraudzībai", apstiprinātas. PSRS Veselības ministrijas 1991. gada 28. februāra N 15/6-5.

2.13. "Drošības noteikumi, rūpnieciskā sanitārija un sanitārais un pretepidēmijas režīms uzņēmumiem, kas ražo baktēriju un vīrusu preparātus", apstiprināts. PSRS Veselības ministrija ar 1979. gada 30. augustu

2.14. Trakumsērgas laboratorisko pētījumu metodes. PVO. - Ženēva, 1975. gads.

3. Termini, definīcijas un saīsinājumi

Negadījums ir ārkārtas situācija, kurā pastāv reāla vai iespējama patogēna aģenta izdalīšanās iespēja ražošanas zonas gaisā, vidē vai personāla piesārņojums.

Bioloģiskā drošība ir medicīniski bioloģisko, organizatorisko, inženiertehnisko un tehnisko pasākumu un līdzekļu sistēma, kuras mērķis ir aizsargāt strādājošo personālu, iedzīvotājus un vidi no patogēno bioloģisko aģentu ietekmes.

Bioloģiskās drošības kabinets ir struktūra, ko izmanto mikroorganismu fiziskai izolācijai (ierobežošanai un kontrolētai izvešanai no darba zonas), lai novērstu personāla inficēšanās iespēju un darba zonas gaisa un vides piesārņojumu.

Boksu telpa (boksa telpa) ir izolēta telpa ar vestibilu (pirmsboksa telpa).

Laboratorija ir struktūrvienība, kas veic eksperimentālus un/vai ražošanas darbus ar patogēniem bioloģiskiem aģentiem.

“Infekciozā” zona ir telpa vai laboratorijas telpu grupa, kurā tiek veiktas manipulācijas ar fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmiem.

“Tīrā” zona ir telpa vai laboratorijas telpu grupa, kurā netiek veiktas manipulācijas ar fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmiem.

Ražošanas darbs - darbs pie medicīnisko imūnbioloģisko preparātu ražošanas, izmantojot fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmus.

Fiksētais trakumsērgas vīruss* ir novājināts trakumsērgas vīrusa celms, kas iegūts, ilgstoši šķērsojot truša smadzenes. Fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmi tiek glabāti GISC, kas nosaukts pēc nosaukuma. L.A. Tarasevičs un tiek izsniegti reizi gadā iestādēm, kurām ir tiesības strādāt ar III-IV patogenitātes grupas mikroorganismiem.
_______________
* Piemēram, fiksētā trakumsērgas vīrusa celmi “Moscow” un “CVS”.


IAL - individuālie aizsardzības līdzekļi.

4. Prasības darba organizēšanai ar fiksēto trakumsērgas vīrusa ražošanas celmiem

4.1. Vispārīgās prasības

Darbu ar fiksētā trakumsērgas vīrusa rūpnieciskajiem celmiem var veikt laboratorijās, kurām ir Krievijas Federācijas veidojošās vienības galvenā valsts sanitārā ārsta noteiktā kārtībā izsniegta atļauja uz 5 gadiem. Tas zaudē spēku, pārceļot vai pārbūvējot laboratoriju, kā arī var tikt atcelts, ja tiek pārkāptas bioloģiskās drošības prasības.

4.2. Prasības fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmiem

PVO ekspertu komiteja (1972) ieteica šādas prasības fiksēta trakumsērgas vīrusa ražošanas celmiem:

- rūpīga fragmentu vēstures reģistrēšana;

- veicot ne vairāk kā 10 pasāžas ražošanā kopš pēdējās tā bioloģisko īpašību kontroles;

- minimāla patogēna aktivitāte laboratorijas dzīvniekiem, ja tos ievada ārpus nervu;

- antigēnu specifiskums un imunogēnā aktivitāte;

- fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celma īpašību izpēte pēc katrām 10 pasāžām.

Fiksētajam trakumsērgas vīrusam ir jābūt šādām galvenajām īpašībām:

- īss inkubācijas periods (4-5 dienas);

- lielāka patogenitāte trušiem intracerebrālās infekcijas laikā;

- ievērojama Negri ķermeņu veidošanas spējas pavājināšanās;

- izraisīt trakumsērgas paralītisku formu bez uzbudinājuma pazīmēm;

- peļu uzkrāšanās centrālajā nervu sistēmā līdz 6,0-7,0 IgLD/0,03 ml;

- augsta afinitāte pret centrālo nervu sistēmu un zema afinitāte pret iekšējiem orgāniem.

4.3. Prasības laboratorijas telpām un aprīkojumam

4.3.1. Laboratorijām, kas strādā ar fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmiem, jāatrodas atsevišķā ēkā vai izolētā ēkas daļā ar atsevišķu ieeju.

4.3.2. Laboratorijai jābūt nodrošinātai ar ūdensvadu, kanalizāciju, elektrību, apkuri un ventilāciju. Visās laboratorijas telpās ir jābūt dabiskam un mākslīgam apgaismojumam atkarībā no darba veida atbilstoši spēkā esošo normatīvo dokumentu prasībām.

4.3.3. Laboratorijas telpas jāsadala “infekcijas” un “tīrās” zonās. Plānošanas lēmumiem un iekārtu izvietošanai jānodrošina fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmu veicināšanas plūsma un atbilstība šīs instrukcijas prasībām.

4.3.4. Laboratorijā jābūt darba telpu un citu telpu komplektam, tai skaitā dušas telpai, atbilstoši ražošanas jaudai un veikto tehnoloģisko darbību klāstam.

4.3.5. Telpu iekšējā apdare jāveic atbilstoši funkcionālajam mērķim. Grīdas, sienu un griestu virsmai “infekcijas” zonas laboratorijas telpās jābūt gludai, bez plaisām, viegli apstrādājamai, izturīgai pret mazgāšanas un dezinfekcijas līdzekļiem, grīdām nedrīkst būt slidenas.

4.3.6. Telpu logiem un durvīm laboratorijas “infekcijas” zonā jābūt aizzīmogotām.

4.3.7. Esošajai nosūces ventilācijai no laboratorijas “infekcijas” zonas jābūt izolētai no citām ventilācijas sistēmām un aprīkotai ar smalkiem gaisa filtriem. Lietojot II klases bioloģiskās drošības skapjus, kas aprīkoti ar izplūdes ventilācijas sistēmu ar “Like” smalkajiem filtriem, izplūdes ventilācijas sistēmu var izmantot bez filtru uzstādīšanas.

4.3.8. Darba telpās un boksos atļauts uzstādīt gaisa kondicionierus. Strādājot ar fiksēta trakumsērgas vīrusa ražošanas celmiem, gaisa kondicionieriem jābūt izslēgtiem.

4.3.9. Laboratorijas mēbelēm “piesārņotajā” zonā jābūt ar pārklājumu, kas ir izturīgs pret mazgāšanas un dezinfekcijas līdzekļiem. Galdu virsmā nedrīkst būt šuvju vai plaisu.

4.3.10. Eju platumam uz darbstacijām vai starp divām izvirzītu iekārtu rindām jābūt vismaz 1,5 m (ieskaitot izvirzītās konstrukcijas).

4.3.11. Telpām, kurās tiek veikts darbs ar fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmiem, jābūt aprīkotām ar baktericīdām lampām saskaņā ar “Baktericīdu lampu lietošanas vadlīnijām gaisa un virsmu dezinfekcijai telpās”. Lampas tiek ieslēgtas pēc mitrās tīrīšanas. Iekļūšana telpā atļauta tikai pēc vēdināšanas vismaz 30 minūtes (izmantojot ozonu nesaturošas baktericīdas lampas, ventilācija nav nepieciešama). Nepieciešams veikt katras lampas darbības laika uzskaiti ar atzīmi žurnālā.

4.3.12. Kad logi ir vērsti uz dienvidiem, darba galdi ir jāaizsargā no tiešiem saules stariem, izmantojot gaismas aizsargplēves un žalūzijas, kas izgatavotas no materiāla, kas izturīgs pret dezinfekcijas līdzekļiem.

4.3.13. Laboratorijas telpām jābūt necaurlaidīgām grauzējiem un kukaiņiem.

4.3.14. Laboratorija ir jānodrošina ar ugunsdzēsības aprīkojumu.

4.4. Prasības darbu veikšanai laboratorijā

4.4.1. Darbu ar fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmiem veic speciālisti ar augstāko un vidējo specializēto izglītību, kuri ir izgājuši īpašu apmācību.

4.4.2. Personāls drīkst strādāt ar fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmiem pēc instruktāžas atbilstoši bioloģiskās drošības prasībām. Turpmākās instruktāžas tiek veiktas vismaz reizi gadā, veicot ierakstus attiecīgajos žurnālos.

4.4.3. Laboratorijā izmantojamajiem instrumentiem, iekārtām un mērinstrumentiem jābūt sertificētiem, tehniski kārtībā, noteiktajā termiņā pakļautiem metroloģiskajai kontrolei un ar tehnisko pasi. Katrai ierīcei (instalācijai) ir jāizstrādā noteikumi (instrukcijas) tās darbībai, ņemot vērā bioloģiskās drošības prasības.

4.4.4. Laboratorijā jāizmanto apstiprināti dezinfekcijas līdzekļi (3% hloramīns). Sagatavotā šķīduma glabāšanas laiks nedrīkst pārsniegt 15 dienas.

4.4.5. Laboratorijas “infekcijas” zonas telpās tiek veikta:

- darbs ar dzīvniekiem (infekcija, preparēšana);

- inficēto dzīvnieku turēšana;

- smadzeņu audu sadalīšana, homogenizācija un citas operācijas ar iespējamu aerosola veidošanos;

- šūnu kultūras infekcija;

- suspensiju un suspensiju sagatavošana;

- darbs ar fiksēta trakumsērgas vīrusa liofilizētiem ražošanas celmiem.

4.4.6. Darba laikā darba telpas durvīm jābūt aizvērtām. Pirms darba tiek ieslēgta “izplūdes” ventilācija. Darba laikā iziet no darba telpas ir aizliegts.

4.4.7. Dzīvnieku inficēšanu veic vismaz divi darbinieki.

4.4.8. Veicot pipeti, jāizmanto gumijas spuldzes vai automātiskās ierīces.

4.4.9. Pirms lietošanas stikla trauki, pipetes, aprīkojums, šļirces utt. ir jāpārbauda integritāte un izmantojamība.

4.4.10. Ampulas ar liofilizētiem fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmiem sterili atver virs paplātes vai paplātes ar marles salveti, kas samērcēta dezinfekcijas šķīdumā. Ampulas augšējo galu uzkarsē virs degļa liesmas, noņem parafīnu, pēc tam ar sterilā ūdenī samērcētu sterilas vates gabalu uzmanīgi pieskaras ampulas pagarinātajam galam, veidojot plaisu. Ap ampulas snīpi tiek apvilkta tāda pati mitra vate. Pēc apļveida (vai ne pilnīgi apļveida) plaisas izveidošanās ampulas galu pārklāj ar marli vai vati un nolauž ar pinceti.

4.4.11. Pēc ampulas atvēršanas pievienojiet 1,0 ml sterila destilēta ūdens un viegli sakratiet. Iegūto suspensiju, kas satur fiksēto trakumsērgas vīrusu, izmanto laboratorijas dzīvnieku inficēšanai.

4.4.12. Truša intracerebrālai infekcijai to droši nostiprina uz speciāla aparāta vai veic vieglu anestēziju (2-2,5 ml Rometar šķīduma intramuskulāri 20-30 minūtes pirms inficēšanās). Pēc tam mati paredzētās injekcijas vietā tiek rūpīgi nogriezti, apstrādāti ar 70% etanola šķīdumu un 5% joda šķīdumu un, izmantojot sterilu 2 ml šļirci un adatas izmēru N 20 (10x0,90), injicē 0,25 ml. fiksētā trakumsērgas vīrusa celma suspensiju. Punkcija tiek veikta aptuveni tās līnijas vidū, kas savieno acs ārējo stūri un ausi. Ja ir inficēti lieli truši, varat izmantot nerūsējošā tērauda īlenu vai trokāru. Acīmredzamas paralīzes pazīmes trušiem parādās 4. dienā pēc inokulācijas; retos gadījumos tie attīstās pirms 7 dienām. Smadzenes tiek izņemtas no dzīvnieka tikai pēc tam, kad ir izveidojies pilnīgs paralīzes attēls, kas raksturīgs fiksētam trakumsērgas vīrusam. Pirmie eksperimentālās trakumsērgas simptomi ir: paaugstināta ķermeņa temperatūra, bailes un paplašinātas acu zīlītes. Tad parādās meningeālās parādības, parēze, kas parasti sākas no pakaļējām ekstremitātēm, strauji progresējoša paralīze, kas aptver visas ekstremitātes, kakla un pakauša muskuļus.

4.4.13. Slimi truši ar pilnīgas paralīzes attēlu, bet joprojām elpojot, tiek nogalināti ar pilnīgu asiņošanu. Smadzenes tiek izmantotas trakumsērgas antigēna ražošanai. Pēc dekapitācijas noņem ādu, atdala mugurkaulu kopā ar muguras smadzenēm, kuras tiek autoklāvātas (2,0 kG/cm (0,2 MPa). 132±2 °C) kā infekciozs materiāls.

4.4.14. Lai izņemtu smadzenes, dzīvnieks tiek novietots uz sekciju paplātes ar vēderu uz leju tā, lai tā galva būtu uz galda malas. Izmantojot pinceti, skalpeli un šķēres, galva tiek atdalīta no ķermeņa. Pēc tam galvas āda tiek skalpēta, noņemot ausis un augšējos plakstiņus. Atsegtā galvaskausa virsma ir samitrināta ar 70% spirtu un ievietota kristalizatorā. Kristalizators tiek pārnests uz sterilu kastīti antigēna sagatavošanai. Pirms galvaskausa atvēršanas to divreiz apstrādā ar 70% etilspirtu. Pēc tam truša galvaskauss tiek nostiprināts speciālā ierīcē (1.pielikums), kas nodrošina drošu dzīvnieka galvas fiksāciju. Turot griezuma nazi kreisajā rokā, izmantojiet labo roku, lai ar āmuru atvērtu galvaskausu, izmantojot četrus taisnstūra griezumus. Vispirms jums vajadzētu veikt iegriezumu pa līniju, kas savieno acu vidu, pēc tam iegriezumu parietālajā reģionā un pēc tam savienojiet šos divus griezumus ar perpendikulāriem griezumiem. Pēc tam, noliekot malā preparēšanas nazi un āmuru, izmantojot pinceti un šķēres, tiek atbrīvota dura mater un tiek atdalīta smadzeņu priekšējā daļa ožas daivas līmenī; šķērsojiet iegarenās smadzenes aiz smadzenītes, paceliet smadzenes, šķērsojiet optisko chiasmu un pēc tam pārnesiet to uz sterilu Petri trauciņu svēršanai.

4.4.15. Lai sagatavotu antigēnu, smadzenes pēc svēršanas ievieto sterilā javā vai homogenizatorā un sasmalcina. Sasmalcinātajām smadzenēm pievieno destilētu ūdeni, kas satur 0,5% fenola, lai iegūtu 10% smadzeņu suspensiju. Smadzeņu suspensiju filtrē caur trīskāršu marles slāni. Smadzeņu suspensijas sterilitāti pārbauda, ​​inokulējot uz cukura buljona, gaļas ekstrakta agara un gaļas ekstrakta buljona ar 0,1% agara un gaļas gabaliņiem. Kultūras tiek turētas 37 °C temperatūrā 5 dienas. Produktīvo zirgu imunizācijai atļauts izmantot sterilu antigēnu, kas konservēts 4 °C temperatūrā ne ilgāk kā 14 dienas.

4.4.16. Lai sagatavotu fiksēta trakumsērgas vīrusa pamatkultūras, truša smadzenes ievieto sterilā javā vai homogenizatorā un sasmalcina. Sasmalcinātajām smadzenēm pievieno destilētu ūdeni, lai iegūtu 10% smadzeņu suspensiju. Smadzeņu suspensijas sterilitāti pārbauda, ​​inokulējot uz cukura buljona, gaļas ekstrakta agara un gaļas ekstrakta buljona ar 0,1% agara un gaļas gabaliņiem. Smadzeņu suspensiju sterilu ielej 4-5 ml alikvotās daļās un sasaldē temperatūrā, kas nepārsniedz mīnus 18 °C. Fiksēto trakumsērgas vīrusu celmu uzglabāšanas optimālā temperatūra ir mīnus 70 °C. Infekcijai izņem vienu alikvotu no saldētavas un ievieto ledusskapī 4 °C uz 18-20 stundām.Pēc atkausēšanas rūpīgi atlasiet smadzeņu suspensijas vidējo fāzi, kurā ir maksimālais vīrusa daudzums, izmantojot Pasteur pipeti.

4.4.18. Peļu preparēšanas noteikumi. Peles, kurām ir smagi trakumsērgas galīgie simptomi, tiek nogalinātas ar hloroformu. Peles līķis ir piestiprināts pie dēļa ar muguru uz augšu. Lai to izdarītu, nepieciešamas divas tapas - viena, lai piespraustu astes pamatni, otra pie purna gala. Varat arī izmantot trīs tapas, lai nostiprinātu priekšējās kājas un asti. Pēc apstrādes ar spirtu ar šķērēm un pinceti tiek izgriezta galvas āda un kakls, atklājot galvaskausu. Galvaskauss ir iespīlēts acs dobumos ar ķirurģiskām pincetēm, un galvaskausa vāciņš ir atdalīts ar izliektām šķērēm, atklājot smadzenes. Izmantojot tās pašas izliektās šķēres, smadzenes tiek noņemtas un pārnestas uz sterilu Petri trauciņu, kas tiek iepriekš nosvērts. Nosver Petri trauciņu ar smadzeņu audiem. Pēc tam smadzenes pārnes uz sterilu javu, kur, izmantojot sterilu piestu, pievienojot destilētu ūdeni, sagatavo 10% smadzeņu suspensiju. Suspensiju ielej alikvotās daļās un uzglabā temperatūrā, kas nav zemāka par mīnus 18 ° C. Optimālā temperatūra fiksēto trakumsērgas vīrusa celmu uzglabāšanai ir mīnus 70 ° C.

4.4.19. Pabeidzot darbu, visi objekti ar fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmiem ir jāizved uz noliktavu (ledusskapji, termostati, skapji utt.); Galdu darba virsmas obligāti jādezinficē ar 3% hloramīna šķīdumu.

4.4.20. Izlietotās pipetes tiek pilnībā (vertikāli) iegremdētas dezinfekcijas šķīdumā (3% hloramīns), izvairoties no gaisa burbuļu veidošanās kanālos. Dezinfekcijas ilgums 60 minūtes.

4.4.21. Izlietotie stikla trauki un cietie atkritumi no laboratorijas “piesārņotās” zonas jāsavāc slēgtos konteineros un jāpārvieto autoklāvā vai jādezinficē uz vietas. Nedezinficētu šķidrumu novadīšana kanalizācijas tīklā ir aizliegta.

4.4.22. Fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmu un dezinfekcijai izmantoto piederumu pārvietošana jāveic slēgtos konteineros, lai transportēšanas laikā nepieļautu personāla inficēšanos. Pēc darba pabeigšanas telpa laboratorijas “piesārņotajā” zonā tiek bloķēta un noslēgta. Plombēšanu un plombu noņemšanu veic laboratorijas darbinieki, kuriem ir laboratorijas (struktūrvienības) vadītāja atļauja.

4.4.23. Ražojošo zirgu imunizācija tiek veikta saskaņā ar “Prettrakumsērgas imūnglobulīna šķidruma no zirga asins seruma” ražošanas noteikumiem.

4.4.24. Antigēna ievadīšanas noteikumi. Zirga antigēns tiek ievadīts speciāli aprīkotā telpā (operāciju zālē). Darbinieki, kas injicē antigēnu, ir ģērbti 3. tipa pretmēra uzvalkā ar gumijas cimdiem. Antigēna ievadīšanai tiek izmantota masveida vakcinācijas ierīce PMP-1, kas caur silikona šļūteni savienota ar adatu un pudeli ar antigēnu. Visa iesmidzināšanas sistēma ir savienota hermētiski. Antigēna injekcijas vietu iepriekš apstrādā ar 70% spirta šķīdumu. Adatu ievada subkutāni, un antigēnu lēnām injicē zem neliela spiediena. Pēc injekcijas vārsts izslēdz antigēna padevi, un āda adatas ievadīšanas vietā tiek saspiesta ar hemostatisko pinceti uz 1 minūti. Noņem pinceti, injekcijas vietu apstrādā ar 70% spirta šķīdumā samitrinātu tamponu un uzliek tamponu ar kolodiju vai furaplastu ar perhlorovinilu. Pēc lietošanas visu injekcijas sistēmu 30 minūtes vāra 2% sodas šķīdumā. Hiperimunizācijas procesā pastāvīgi tiek uzraudzīts ražotāju vispārējais stāvoklis un temperatūras reakcija. Ja temperatūra paaugstinās, nākamā antigēna injekcija tiek veikta pēc tam, kad tā pazeminās līdz normai.

4.4.25. Fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmu uzglabāšana tiek veikta infekcijas zonas telpās. Fiksēto trakumsērgas vīrusa ražošanas celmu uzglabāšana, reģistrēšana, pārvietošana, transportēšana un iznīcināšana tiek veikta saskaņā ar SP 1.2.036-95 prasībām.

4.4.26. Apmeklētāju pieņemšana atļauta tikai speciāli ierādītās vietās laboratorijas “tīrajā” zonā.

4.4.27. Iekārtu, laboratorijas vai sadzīves piederumu, instrumentu u.c. izvešana no laboratorijas tiek veikta tikai pēc to dezinfekcijas un ar tās direktora atļauju.

4.4.28. Laboratorijas “infekciozajā” zonā ir aizliegts:

- pēc darba pabeigšanas darba vietā atstāt traukus ar fiksētā trakumsērgas vīrusa “Maskava” un “CVS” ražošanas celmiem;

- pipeti ar muti, pārlejiet šķidru infekciozu materiālu pāri trauka malai (mēģenē, kolbā, pudelē);

- uzglabāt virsdrēbes, cepures, apavus, lietussargus, iepirkumu maisiņus, kosmētiku u.c., kā arī pārtiku;

- smēķēt, dzert ūdeni;

- atstāt darba vietu bez uzraudzības, veicot jebkāda veida darbus ar fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmiem;

- bez iepriekšējas dezinfekcijas ieliet kanalizācijas sistēmā šķidros atkritumus (inficētos šķidrumus, testa materiālu utt.).

4.4.29. Tajās pašās telpās atļauts veikt eksperimentālos un ražošanas darbus ar fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmiem. Eksperimentālais un ražošanas darbs ir jānodala laikā. Eksperimentālais materiāls jāuzglabā atsevišķi no ražošanas materiāla speciāli tam paredzētā ledusskapī vai termostatā.

4.4.30. Visiem darbiniekiem, kas strādā ar fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmiem, ir jābūt klīniskā uzraudzībā. Periodiskās medicīniskās pārbaudes tiek veiktas saskaņā ar spēkā esošajiem rīkojumiem (N 280/88 - Veselības un medicīnas rūpniecības ministrija un Krievijas Valsts sanitārās un epidemioloģiskās uzraudzības komiteja).

4.5. Individuālo aizsardzības līdzekļu (IAL) lietošanas prasības

4.5.1. Laboratorijas darbinieki ir jānodrošina ar medicīniskajiem halātiem, pidžamām (kombinezonu), cepurēm, maiņas apaviem un citiem individuālajiem aizsardzības līdzekļiem atkarībā no veiktā darba veida un atbilstoši spēkā esošajiem standartiem.

4.5.2. Darba apģērbam un apaviem jābūt individuāliem, jāatbilst strādnieku izmēram un jāglabā atsevišķi no personīgajiem apģērbiem.

4.5.3. Veicot izpēti kastēs, medicīniskais halāts tiek nomainīts pret mēra vai ķirurģisko halātu, sasniedzot kājas apakšējo trešdaļu. Papildus tiek izmantoti gumijas cimdi, čības un, ja nepieciešams, respiratori (maskas). Darbības, kurās nepieciešams atvērt galvaskausu un mugurkaulu, jāveic ar gumijas cimdiem, aizsargbrillēm un pretmēra tērpiem. Tāpat ir jāvalkā gumijas vai izturīga polietilēna priekšauti, kurus var viegli dezinficēt vai iznīcināt.

4.5.4. Darba apģērbs jāmaina, ja tas ir netīrs, bet ne retāk kā reizi nedēļā.

4.5.5. Pirms mazgāšanas aizsargapģērbs ir jādezinficē, iemērcot 1% hloramīna šķīdumā.

4.6. Prasības materiālu dezinfekcijai un telpu tīrīšanai

4.6.1. Dažādu priekšmetu dezinfekcija, strādājot ar fiksētā trakumsērgas vīrusa ražošanas celmiem, tiek veikta atbilstoši dezinficējamā objekta raksturam.

Tabula

Trakumsērga(lat. Trakumsērga, Lyssa, Hidrofobija) jau izsenis pazīstama kā savvaļas un mājdzīvnieku slimība. Trakumsērgas vīruss selektīvi inficē centrālās nervu sistēmas šūnas, tāpēc slimību pavada uzbudinājums, krampji un pēc tam paralīze.

Morfoloģija un bioloģiskās īpašības. Trakumsērgas vīrusam ir stieņa forma, kura izmērs ir 100–150 nm, un tas ir pārklāts. Tas veido ieslēgumus skarto šūnu citoplazmā, ko 1892. gadā aprakstīja Babes un 1903. gadā Negri. Tos sauc par Babes-Negri ķermeņiem. Ieslēgumu forma ir sfēriska, izmēri 1-20 mikroni, pēc Romanovska teiktā, tie ir krāsoti sarkanā krāsā. To noteikšanai Amona raga šūnās ir diagnostiska vērtība.

Vīruss tiek kultivēts peles embrija smadzeņu audos, inficējoties vistas embriju dzeltenuma maisiņā vai smadzenēs, kā arī truša ķermenī.

Ir divu veidu trakumsērgas vīrusi: ielas vīruss, kas ir izolēts no slimiem cilvēkiem un dzīvniekiem, un fiksēts vīruss, ko Pastērs ieguvis, ilgstoši pārvietojot ielas vīrusu caur truša smadzenēm (fix vīruss). Fiksācijas vīruss izraisa paralīzi, inficējot trušus pēc stingri noteikta, saīsināta 3-7 dienu inkubācijas perioda. Tas nav patogēns cilvēkiem, suņiem un citiem dzīvniekiem, neizdalās ar dzīvnieku un cilvēku siekalām, reti sastopams perifērajos nervos un neveido Babes-Negri ķermeņus. Fiksētais vīruss, kas zaudējis savu virulenci cilvēkiem un dzīvniekiem, tiek izmantots trakumsērgas vakcīnu ražošanā. Imunitātes mehānismā, kas rodas pēc trakumsērgas vakcīnu ievadīšanas, vīrusa iejaukšanās fenomenam ir vislielākā nozīme. Šīs parādības būtība slēpjas viena vīrusa tipa, kas iekļuvis saimniekšūnā, spējā aizkavēt cita veida vīrusa vairošanos, kas vēlāk iekļuva tajā pašā šūnā. Fiksētais vīruss, kam ir augsta afinitāte pret nervu audiem, ātri vairojas un novērš ielas vīrusa attīstību.

Ilgtspējība. Trakumsērgas vīruss nav stabils ārējā vidē: tas ātri iet bojā, sildot, saules gaismas un dezinfekcijas līdzekļu (formalīna, fenola, sublimāta) ietekmē. 50% glicerīnā to var uzglabāt -20-40°C vairākus gadus.

Patogenitāte. Visi siltasiņu savvaļas un mājdzīvnieki un mazākā mērā putni ir uzņēmīgi pret ielu trakumsērgas vīrusu. Trakumsērgas paralītiskās formas rodas laboratorijas dzīvniekiem (trušiem, baltajām pelēm, jūrascūciņām), izmantojot dažādus infekcijas ceļus.

Patoģenēze un klīnika. Trakumsērgas vīruss cilvēka organismā nonāk ar siekalām caur niknu dzīvnieku kodumiem vai slima dzīvnieka siekalošanos no cilvēka ādas. Vīruss sasniedz centrālo nervu sistēmu pa perifēro nervu stumbriem un inficē to. Trakumsērgas inkubācijas periods visbiežāk ilgst no 1 līdz 3 mēnešiem un ir atkarīgs no koduma vietas. Sejas un kakla kodumiem periods ir īsāks (no 10 dienām līdz gadam). Slimība sākas ar sāpēm koduma vietā, baiļu sajūtu, trauksmi un aizkaitināmību. Mēģinot piepildīties un pat ieraugot ūdeni, parādās rīšanas muskuļu krampji, tāpēc trakumsērgu sauc par hidrofobiju jeb hidrofobiju. Pacients ir satraukts, apziņa ir traucēta, tiek novēroti konvulsīvi krampji. Pacienti var iekost un steigties pie medicīnas personāla. Pēc dažām dienām notiek ekstremitāšu, sejas un elpošanas muskuļu paralīze, un iestājas nāve. Slimības ilgums ir 6-7 dienas.

Virusoloģiskā diagnostika. Trakumsērgas vīrusa intravitālās indikācijas metodes nav izstrādātas. Diagnoze tiek veikta, pamatojoties uz slimības tipisko klīnisko ainu. Pēc nāves Babes-Negri ķermeņi tiek atrasti skartajās smadzeņu šūnās. Konkrētu antigēnu var noteikt arī, izmantojot fluorescējošas antivielas. Vīrusu var izolēt, inficējot laboratorijas dzīvniekus: trušus, baltās peles un jūrascūciņas, kuru autopsijā tiek konstatēti Babes-Negri ieslēgumi skarto smadzeņu šūnās.

Profilakse un ārstēšana. Specifiskas profilakses nolūkos tiek ievadīta prettrakumsērgas vakcīna, kuru pirmo reizi ierosināja Pastērs. Vakcīnas sagatavo no trušu, aitu vai balto žurku zīdītāju smadzeņu audu suspensijas, kas inficētas ar fiksētu trakumsērgas vīrusu. Ir dažādi vakcīnu veidi, kas atšķiras pēc konservantu daudzuma un kvalitātes. Fermi vakcīna satur 1% fenola, Semple vakcīna satur 0,25% no tā, un Phillips vakcīna satur glicerīnu. Pēdējos gados ir ierosināta dzīva trakumsērgas vakcīna no vīrusa, kas tiek kultivēts uz putnu embrijiem (Fleury vakcīna). Vakcīnas iedarbības pamatā ir vīrusu iejaukšanās fenomens. Vakcinēti tiek visi cilvēki, kurus sakoduši vai siekalojušies slimi dzīvnieki vai kuriem ir aizdomas par trakumsērgu. Vakcīnas lietošanai nav kontrindikāciju, jo tas ir vienīgais veids, kā glābt inficētos. Parasti vakcināciju veic vairākas reizes 12-30 dienu laikā vai ilgāk, atkarībā no koduma smaguma pakāpes, atrašanās vietas un laika, kas pagājis kopš koduma. Vakcīnu ievada subkutāni vēdera dobumā.

Vakcinācija jāsāk pēc iespējas ātrāk pēc koduma un jāveic saskaņā ar esošajiem norādījumiem. Imunitāte, kas rodas pēc vakcinācijas, saglabājas līdz 6 mēnešiem. Cilvēki, kuriem ir slimības pazīmes, netiek vakcinēti. Smagu kodumu gadījumā galvas un kakla rajonā vienlaikus ar trakumsērgas vakcīnu ievada gamma globulīnu vai prettrakumsērgas serumu. Aizdomīgos dzīvniekus uzrauga 7 dienas un, ja netiek novērotas slimības pazīmes, tos uzskata par veseliem. Nav efektīvas trakumsērgas ārstēšanas metodes.