Ką veikia pasiutligės virusas? Sanitarinė mikrobiologija

1. Kintamieji, fiksuoti ir kardinaliniai kryžiai Šiame skyriuje surinkome senus Morjos diktantus, ruošiamus rašyti kitą astrologijos knygą. Tačiau mes niekada negalėjome pradėti šio suplanuoto darbo dėl paprastos priežasties

MU 3.3.1.1099-02

METODINĖS INSTRUKCIJOS

3.3.1. VAKCINOS PREVENCIJA

Sauga dirbant su fiksuoto pasiutligės viruso gamybos padermėmis

Įvedimo data 2002-04-01

1. KŪRĖTA Rusijos Federacijos Sveikatos apsaugos ministerijos Rusijos tyrimų instituto „Mikrobas“ (MD I.A. Dyatlov, PhD A.K. Nikiforov, PhD S.A. Eremin); pavadintas Valstybinis medicininių biologinių preparatų standartizacijos ir kontrolės institutas. L.A.Tarasevičius iš Rusijos Federacijos sveikatos apsaugos ministerijos (dr. A.A. Movsesyants, Ph.D. I.A. Ozeretskovsky, tyrėjas G.B. Ageenko).

3. PATVIRTINTA Rusijos Federacijos vyriausiojo valstybinio sanitaro gydytojo – Rusijos Federacijos sveikatos apsaugos ministro pirmojo pavaduotojo G. G. Oniščenkos 2002 m. sausio 15 d. Įsigaliojo 2002 m. balandžio 1 d.

4. PRISTATYTA PIRMĄ KARTĄ.

1 naudojimo sritis

1 naudojimo sritis

1.1. Šios rekomendacijos buvo parengtos pagal 1999 m. kovo 30 d. federalinį įstatymą „Dėl gyventojų sanitarinės ir epidemiologinės gerovės“ N 52-FZ, „Valstybinių sanitarinių ir epidemiologinių standartų nuostatas“ ir sanitarines taisykles „Darbo sauga“. su III-IV patogeniškumo grupių mikroorganizmais ir helmintais SP 1.2.731-99".

1.2. Šių gairių reikalavimai yra privalomi sveikatos priežiūros institucijoms ir Rusijos Federaciją sudarančių subjektų įstaigoms.

2. Norminės nuorodos

Šiose gairėse naudojamos nuorodos į šiuos reguliavimo dokumentus:

2.1. 1999 m. kovo 30 d. federalinis įstatymas „Dėl gyventojų sanitarinės ir epidemiologinės gerovės“ N 52-FZ

2.2. Sanitarinės taisyklės "Darbo su III-IV patogeniškumo grupių mikroorganizmais ir helmintais sauga. SP 1.2.731-99".

2.3. Sanitarinės taisyklės "I-IV patogeniškumo grupių mikroorganizmų registravimo, laikymo, perkėlimo ir transportavimo tvarka. SP 1.2.036-95".

2.5. Eksperimentinių biologinių klinikų (vivariumo) projektavimo, įrangos ir priežiūros sanitarinės taisyklės, patvirtintos. SSRS sveikatos apsaugos ministerija 1973 m. balandžio 6 d. N 1045-73.

2.6. Statybos normatyvai ir nuostatai „Visuomenės paskirties pastatai ir statiniai“. SNiP 2.08.02-89 ir „Sveikatos priežiūros įstaigų projektavimo vadovas“ 5 tomuose. - T.1, 3, 5. Gosgrazhdanstroy. - M., 1989 m.

2.7. OST-42-21-2-85 "Medicinos prietaisų sterilizavimas ir dezinfekcija. Metodai, priemonės. Režimai."

2.8. Įsakymas „Dėl kenksmingų, pavojingų medžiagų ir gamybos veiksnių laikinųjų sąrašų patvirtinimo, taip pat darbų, kurių metu atliekami pirminiai ir periodiniai sveikatos patikrinimai“, patvirtintas. Sveikatos ir medicinos pramonės ministerija ir Rusijos valstybinis sanitarinės ir epidemiologinės priežiūros komitetas, 95 10 05 N 280/88.

2.9. „Sveikatos priežiūros įstaigų vėdinimo įrenginių eksploatavimo ir efektyvumo stebėsenos instrukcija“, patvirtinta. SSRS sveikatos apsaugos ministerija 1975 m. kovo 20 d

2.11. „Baktericidinių lempų, skirtų patalpų orui ir paviršiams dezinfekuoti, naudojimo gairės“, patvirtintos. Rusijos sveikatos ir medicinos pramonės ministerija 2095-02-28 N 03-06 11-16.

2.12. „Garų ir oro sterilizatorių veikimo stebėjimo gairės“, patvirtintos. SSRS sveikatos apsaugos ministerija 1991 m. vasario 28 d. N 15/6-5.

2.13. „Bakterinius ir virusinius preparatus gaminančių įmonių saugos taisyklės, pramoninė sanitarinė ir sanitarinis bei antiepideminis režimas“. SSRS sveikatos apsaugos ministerija 1979 m. rugpjūčio 30 d

2.14. Pasiutligės laboratorinių tyrimų metodai. PSO. – Ženeva, 1975 m.

3. Terminai, apibrėžimai ir santrumpos

Nelaimingas atsitikimas – tai avarinė situacija, kai yra reali arba potenciali galimybė patogeniniam sukėlėjui patekti į gamybinės zonos orą, aplinką arba užteršti personalą.

Biologinė sauga – tai medicininių-biologinių, organizacinių, inžinerinių ir techninių priemonių bei priemonių sistema, skirta apsaugoti dirbantį personalą, gyventojus ir aplinką nuo patogeninių biologinių veiksnių poveikio.

Biologinės saugos spinta – tai konstrukcija, naudojama mikroorganizmų fizinei izoliacijai (suribojimui ir kontroliuojamam pašalinimui iš darbo zonos), siekiant išvengti personalo užkrėtimo ir darbo zonos bei aplinkos oro užteršimo.

Bokso kambarys (boksas) yra izoliuotas kambarys su vestibiuliu (priešbokso kambarys).

Laboratorija – struktūrinis padalinys, atliekantis eksperimentinius ir/ar gamybinius darbus su patogeniniais biologiniais veiksniais.

„Infekcinė“ zona – patalpa ar laboratorijų patalpų grupė, kurioje atliekamos manipuliacijos su fiksuoto pasiutligės viruso gamybinėmis padermėmis.

„Švarioji“ zona – patalpa ar laboratorinių patalpų grupė, kurioje nėra atliekamos manipuliacijos su fiksuoto pasiutligės viruso gamybinėmis padermėmis.

Gamybos darbas – medicininių imunobiologinių preparatų gamybos, naudojant fiksuoto pasiutligės viruso gamybines padermes, darbas.

Fiksuotas pasiutligės virusas* yra susilpninta pasiutligės viruso padermė, gauta ilgą laiką pernešant per triušio smegenis. Fiksuoto pasiutligės viruso gamybinės padermės saugomos GISC, pavadintoje pagal pavadinimą. L. A. Tarasevičius ir išduodami kartą per metus įstaigoms, turinčioms teisę dirbti su III-IV patogeniškumo grupių mikroorganizmais.
_______________
* Pavyzdžiui, fiksuoto pasiutligės viruso „Moscow“ ir „CVS“ padermės.


AAP – asmeninės apsaugos priemonės.

4. Reikalavimai organizuojant darbą su fiksuoto pasiutligės viruso gamybinėmis padermėmis

4.1. Bendrieji reikalavimai

Darbas su pramoninėmis fiksuoto pasiutligės viruso padermėmis gali būti atliekamas laboratorijose, turinčiose Rusijos Federacijos steigiamojo subjekto vyriausiojo valstybinio sanitarinio gydytojo nustatyta tvarka išduotą leidimą 5 metų laikotarpiui. Jis netenka galios perkėlus ar pertvarkius laboratoriją, taip pat gali būti panaikintas, jei pažeidžiami biologinės saugos reikalavimai.

4.2. Reikalavimai fiksuoto pasiutligės viruso gamybos padermėms

PSO ekspertų komitetas (1972 m.) fiksuoto pasiutligės viruso gamybos padermėms rekomendavo šiuos reikalavimus:

- kruopštus ištraukų istorijos įrašymas;

- gamyboje atlikti ne daugiau kaip 10 pasėjimų nuo paskutinio jo biologinių savybių kontrolės;

- minimalus patogeninis aktyvumas laboratoriniams gyvūnams, kai švirkščiamas į vidų;

- antigeno specifiškumas ir imunogeninis aktyvumas;

- fiksuoto pasiutligės viruso gamybos padermės savybių tyrimas kas 10 pasėjimų.

Fiksuotas pasiutligės virusas turi turėti šias pagrindines savybes:

- trumpas inkubacinis laikotarpis (4-5 dienos);

- didesnis patogeniškumas triušiams intracerebrinės infekcijos metu;

- reikšmingas gebėjimo formuoti Negri kūnus susilpnėjimas;

- sukelti paralyžinę pasiutligės formą be susijaudinimo požymių;

- pelių centrinėje nervų sistemoje susikaupia iki 6,0-7,0 IgLD/0,03 ml;

- didelis afinitetas centrinei nervų sistemai ir mažas afinitetas vidaus organams.

4.3. Reikalavimai laboratorijos patalpoms ir įrangai

4.3.1. Laboratorijos, dirbančios su fiksuoto pasiutligės viruso gamybinėmis padermėmis, turėtų būti įrengtos atskirame pastate arba izoliuotoje pastato dalyje su atskiru įėjimu.

4.3.2. Laboratorijoje turi būti įrengtas vandentiekis, kanalizacija, elektra, šildymas ir vėdinimas. Visose laboratorijos patalpose turi būti natūralus ir dirbtinis apšvietimas priklausomai nuo darbo pobūdžio pagal galiojančių norminių dokumentų reikalavimus.

4.3.3. Laboratorinės patalpos turėtų būti suskirstytos į „infekcines“ ir „švarias“ zonas. Planavimo sprendimai ir įrangos išdėstymas turi užtikrinti fiksuoto pasiutligės viruso gamybinių padermių skatinimo srautą ir šios instrukcijos reikalavimų laikymąsi.

4.3.4. Laboratorijoje turi būti gamybinius pajėgumus ir atliekamų technologinių operacijų spektrą atitinkantis darbo ir kitų patalpų komplektas, įskaitant dušo kambarį.

4.3.5. Patalpų vidaus apdaila turi būti atliekama pagal funkcinę paskirtį. „Infekcinės“ zonos laboratorijų patalpose grindų, sienų, lubų paviršius turi būti lygus, be įtrūkimų, lengvai apdirbamas, atsparus plovikliams ir dezinfekavimo priemonėms, o grindys – neslidžios.

4.3.6. Laboratorijos „infekcinėje“ zonoje esančių patalpų langai ir durys turi būti sandarūs.

4.3.7. Esama ištraukiamoji ventiliacija iš laboratorijos „infekcinės“ zonos turi būti izoliuota nuo kitų vėdinimo sistemų ir aprūpinta smulkiais oro filtrais. Naudojant II klasės biologinės saugos spintas su ištraukiamąja ventiliacijos sistema su smulkiais filtrais „Like“, ištraukiamąją ventiliacijos sistemą galima naudoti neįrengus filtrų.

4.3.8. Darbo patalpose ir boksuose leidžiama montuoti kondicionierius. Dirbant su gamybinėmis fiksuoto pasiutligės viruso padermėmis, oro kondicionieriai turi būti išjungti.

4.3.9. Laboratoriniai baldai „užterštoje“ zonoje turi būti padengti atsparia plovikliams ir dezinfekavimo priemonėms. Stalų paviršius neturi turėti siūlių ar įtrūkimų.

4.3.10. Praėjimų į darbo vietas arba tarp dviejų išsikišusios įrangos eilių plotis turi būti ne mažesnis kaip 1,5 m (įskaitant išsikišusias konstrukcijas).

4.3.11. Patalpose, kuriose dirbama su fiksuoto pasiutligės viruso padermėmis, turi būti įrengtos baktericidinės lempos pagal „Baktericidinių lempų naudojimo patalpų orui ir paviršiams dezinfekuoti gaires“. Lempos įjungiamos po šlapio valymo. Įeiti į patalpą leidžiama tik po vėdinimo ne trumpiau kaip 30 minučių (naudojant baktericidines lempas be ozono, vėdinti nereikia). Būtina registruoti kiekvienos lempos veikimo laiką su užrašu žurnale.

4.3.12. Kai langai orientuoti į pietų pusę, darbo stalus būtina apsaugoti nuo tiesioginių saulės spindulių naudojant apsaugines nuo šviesos plėveles ir žaliuzes iš dezinfekavimo priemonėms atsparios medžiagos.

4.3.13. Laboratorinės patalpos turi būti nepralaidžios graužikams ir vabzdžiams.

4.3.14. Laboratorija turi būti aprūpinta gaisro gesinimo įranga.

4.4. Reikalavimai atliekant darbus laboratorijoje

4.4.1. Darbus su gamybinėmis fiksuoto pasiutligės viruso padermėmis atlieka specialistai, turintys aukštąjį ir vidurinį specializuotą išsilavinimą, baigę specialų mokymą.

4.4.2. Darbuotojams leidžiama dirbti su fiksuoto pasiutligės viruso gamybinėmis padermėmis, gavus instruktažą pagal biologinės saugos reikalavimus. Vėlesni instruktažai rengiami ne rečiau kaip kartą per metus, įrašant atitinkamus žurnalus.

4.4.3. Laboratorijoje naudojami instrumentai, įranga ir matavimo priemonės turi būti sertifikuotos, techniškai tvarkingos, per nustatytą terminą atliktos metrologinės kontrolės, turėti techninį pasą. Kiekvienam įrenginiui (instaliacijai) turi būti parengtos jo veikimo taisyklės (instrukcijos), atsižvelgiant į biologinės saugos reikalavimus.

4.4.4. Laboratorijoje turi būti naudojamos patvirtintos dezinfekcijos priemonės (3 % chloramino). Paruošto tirpalo tinkamumo laikas neturi viršyti 15 dienų.

4.4.5. Laboratorijos „infekcinės“ zonos patalpose atliekama:

- darbas su gyvūnais (infekcija, skrodimas);

- užsikrėtusių gyvūnų laikymas;

- smegenų audinio dezintegracija, homogenizacija ir kitos operacijos su galimu aerozolio susidarymu;

- ląstelių kultūros infekcija;

- suspensijų ir suspensijų ruošimas;

- dirbti su liofilizuotomis fiksuoto pasiutligės viruso gamybos padermėmis.

4.4.6. Darbo metu darbo patalpos durys turi būti uždarytos. Prieš darbą įjungiama „ištekėjimo“ ventiliacija. Darbo metu išeiti iš darbo patalpos draudžiama.

4.4.7. Gyvūnų užkrėtimą atlieka ne mažiau kaip du darbuotojai.

4.4.8. Pildydami pipetę, turite naudoti gumines lemputes arba automatinius įtaisus.

4.4.9. Prieš naudojimą stikliniai indai, pipetės, įranga, švirkštai ir kt. turi būti patikrintas vientisumas ir tinkamumas naudoti.

4.4.10. Ampulės su liofilizuotomis fiksuoto pasiutligės viruso gamybos padermėmis steriliai atidaromos virš padėklo ar padėklo su marlės servetėle, suvilgyta dezinfekuojančiame tirpale. Viršutinis ampulės galas kaitinamas virš degiklio liepsnos, pašalinamas parafinas, tada steriliu vandeniu suvilgytu sterilios vatos gabalėliu atsargiai paliečiamas prailgintas ampulės galas, kad susidarytų įtrūkimas. Aplink ampulės snapelį traukiama ta pati drėgna vata. Susidarius apskritam (arba ne visai apskritam) įtrūkimui, ampulės galas uždengiamas marle arba vata ir nulaužiamas pincetu.

4.4.11. Atidarę ampulę, įpilkite 1,0 ml sterilaus distiliuoto vandens ir švelniai suplakite. Gauta suspensija, kurioje yra fiksuoto pasiutligės viruso, naudojama laboratoriniams gyvūnams užkrėsti.

4.4.12. Esant intracerebrinei triušio infekcijai, jis saugiai tvirtinamas specialiu aparatu arba suteikiamas lengvas nejautras (2-2,5 ml Rometar tirpalo į raumenis 20-30 minučių prieš užsikrėtimą). Tada kruopščiai nupjaunami plaukai numatytoje injekcijos vietoje, apdorojami 70 % etanolio tirpalu ir 5 % jodo tirpalu ir steriliu 2 ml švirkštu bei N 20 (10x0,90) dydžio adata suleidžiama 0,25 ml. fiksuoto pasiutligės viruso padermės suspensijos. Punkcija daroma maždaug ties viduriu linijos, jungiančios išorinį akies kampą ir ausį. Kai užsikrėtę dideli triušiai, galite naudoti nerūdijančio plieno ylą arba trokarą. Akivaizdūs paralyžiaus požymiai triušiams atsiranda 4 dieną po inokuliacijos; retais atvejais jie išsivysto prieš 7 dienas. Smegenys iš gyvūno pašalinamos tik tada, kai susidaro pilnas fiksuotam pasiutligės virusui būdingo paralyžiaus vaizdas. Pirmieji eksperimentinės pasiutligės simptomai yra: padidėjusi kūno temperatūra, baimė ir išsiplėtę vyzdžiai. Tada atsiranda meninginiai reiškiniai, parezė, dažniausiai prasidedanti nuo užpakalinių galūnių, sparčiai progresuojantis paralyžius, apimantis visas galūnes, kaklo ir pakaušio raumenis.

4.4.13. Sergantys triušiai, turintys visiško paralyžiaus vaizdą, bet vis dar kvėpuojantys, žūva dėl visiško kraujavimo. Smegenys naudojamos pasiutligės antigenui gaminti. Nukirtus galvą, oda pašalinama, stuburas atskiriamas kartu su nugaros smegenimis, kurios autoklavuojamos (2,0 kG/cm (0,2 MPa). 132±2 °C) kaip infekcinė medžiaga.

4.4.14. Norint pašalinti smegenis, gyvūnas paguldomas ant sekcijinio padėklo pilvu žemyn taip, kad jo galva būtų ant stalo krašto. Pincetu, skalpeliu ir žirklėmis galva atskiriama nuo kūno. Tada skalpuojama galvos oda, pašalinamos ausys ir viršutiniai vokai. Atidengtas kaukolės paviršius sudrėkinamas 70% alkoholiu ir dedamas į kristalizatorių. Kristalizatorius perkeliamas į sterilią dėžutę antigenui paruošti. Prieš atidarant kaukolę, ji du kartus apdorojama 70% etilo alkoholiu. Tada triušio kaukolė tvirtinama specialiu įtaisu (1 priedas), kuris užtikrina patikimą gyvūno galvos fiksaciją. Kairėje rankoje laikydami pjaustymo peilį, dešine ranka plaktuku atidarykite kaukolę keturiais stačiakampiais pjūviais. Pirmiausia turėtumėte padaryti pjūvį išilgai linijos, jungiančios akių vidurį, tada pjūvį parietalinėje srityje, o tada sujungti šiuos du pjūvius statmenais pjūviais. Tada, atidėjus pjaustymo peilį ir plaktuką, pincetu ir žirklėmis, atpalaiduojama kieta medžiaga ir uoslės skilties lygyje atskiriama priekinė smegenų dalis; kirsti pailgąsias smegenėlių smegenis, pakelti smegenis, kirsti optinį chiazmą ir perkelti į sterilų Petri lėkštelę sverti.

4.4.15. Antigenui paruošti smegenys, pasvėrus, dedamos į sterilų skiedinį arba homogenizatorių ir susmulkinamos. Į susmulkintas smegenis įpilamas distiliuotas vanduo, kuriame yra 0,5 % fenolio, kad gautųsi 10 % smegenų suspensija. Smegenų suspensija filtruojama per trigubą marlės sluoksnį. Smegenų suspensijos sterilumas tikrinamas sėjant ant cukraus sultinio, mėsos ekstrakto agaro ir mėsos ekstrakto sultinio su 0,1 % agaro ir mėsos gabalėliais. Pasėliai laikomi 37 °C temperatūroje 5 dienas. Gaminamų arklių imunizavimui leidžiama naudoti sterilų antigeną, konservuotą 4 °C temperatūroje ne ilgiau kaip 14 dienų.

4.4.16. Norint paruošti fiksuoto pasiutligės viruso pradines kultūras, triušio smegenys dedamos į sterilų skiedinį arba homogenizatorių ir susmulkinamos. Į susmulkintas smegenis įpilama distiliuoto vandens, kad gautųsi 10 % smegenų suspensijos. Smegenų suspensijos sterilumas tikrinamas sėjant ant cukraus sultinio, mėsos ekstrakto agaro ir mėsos ekstrakto sultinio su 0,1 % agaro ir mėsos gabalėliais. Smegenų suspensija steriliai supilama į 4-5 ml alikvotines dalis ir užšaldoma ne aukštesnėje kaip minus 18 °C temperatūroje. Optimali temperatūra fiksuotų pasiutligės viruso padermių laikymui yra minus 70 °C. Norėdami užsikrėsti, išimkite vieną alikvotinę dalį iš šaldiklio ir padėkite į šaldytuvą 4 °C temperatūroje 18-20 valandų. Atšildžius, Pasteur pipete atsargiai pasirinkite vidurinę smegenų suspensijos fazę, kurioje yra didžiausias viruso kiekis.

4.4.18. Pelių skrodimo taisyklės. Pelės, turinčios sunkių galutinių pasiutligės simptomų, žudomos chloroformu. Pelės lavonas pritvirtintas ant lentos nugara į viršų. Tam reikia dviejų smeigtukų – vieno uodegos pagrindui prisegti, kito prie snukio galo. Taip pat galite naudoti tris kaiščius, kad pritvirtintumėte priekines kojas ir uodegą. Po gydymo alkoholiu galvos oda ir kaklas išpjaustomi žirklėmis ir pincetu, atidengiant kaukolę. Kaukolė į akiduobes suspaudžiama chirurginiu pincetu, o kaukolės dangtelis atskiriamas lenktomis žirklėmis, atidengiant smegenis. Tomis pačiomis lenktomis žirklėmis smegenys išimamos ir perkeliamos į sterilią Petri lėkštelę, kuri iš anksto pasveriama. Pasveriama Petri lėkštelė su smegenų audiniu. Tada smegenys perkeliamos į sterilų skiedinį, kur steriliu grūstuvu paruošiama 10 % smegenų suspensija, pridedant distiliuoto vandens. Suspensija supilama į alikvotas dalis ir laikoma ne žemesnėje kaip minus 18 °C temperatūroje. Optimali fiksuotų pasiutligės viruso padermių laikymo temperatūra yra minus 70 °C.

4.4.19. Baigus darbus visi objektai, kuriuose yra fiksuoto pasiutligės viruso gamybinių padermių, turi būti išvežti į saugyklas (šaldytuvai, termostatai, spintos ir kt.); Stalų darbinius paviršius privaloma dezinfekuoti 3% chloramino tirpalu.

4.4.20. Panaudotos pipetės visiškai (vertikaliai) panardinamos į dezinfekcinį tirpalą (3 % chloramino), išvengiant oro burbuliukų susidarymo kanaluose. Dezinfekcijos trukmė 60 min.

4.4.21. Panaudoti stiklo dirbiniai ir kietosios atliekos iš „užterštos“ laboratorijos zonos turi būti surenkamos į uždarus konteinerius ir perkeliamos į autoklavą arba dezinfekuojamos vietoje. Draudžiama išleisti į kanalizacijos tinklą nedezinfekuotus skysčius.

4.4.22. Fiksuoto pasiutligės viruso gamybinės padermės ir panaudoti dezinfekcijai naudojami indai turi būti perkeliami uždarose talpyklose, kad transportavimo metu neužsikrėstų personalas. Pabaigus darbus laboratorijos „užterštoje“ zonoje esanti patalpa rakinama ir užsandarinama. Plombavimą ir plombų nuėmimą atlieka laboratorijos darbuotojai, turintys laboratorijos (padalinio) vadovo leidimą.

4.4.23. Gaminamų arklių imunizacija vykdoma pagal „Skystas imunoglobulinas nuo pasiutligės iš arklio kraujo serumo“ gamybos reglamentą.

4.4.24. Antigeno vartojimo taisyklės. Arklio antigenas įvedamas specialiai įrengtoje patalpoje (operacinėje). Darbuotojai, švirkščiantys antigeną, yra apsirengę 3 tipo kovos su maru kostiumu su guminėmis pirštinėmis. Antigenui įvesti naudojamas masinės vakcinacijos prietaisas PMP-1, kuris silikonine žarna prijungiamas prie adatos ir buteliuko su antigenu. Visa įpurškimo sistema sujungta hermetiškai. Antigeno injekcijos vieta iš anksto apdorojama 70% alkoholio tirpalu. Adata įduriama po oda, o antigenas lėtai sušvirkščiamas šiek tiek spaudžiant. Po injekcijos vožtuvas išjungia antigeno tiekimą, o oda adatos įdūrimo vietoje 1 minutę suspaudžiama hemostaziniu pincetu. Pincetas nuimamas, injekcijos vieta apdorojama tamponu, suvilgytu 70% alkoholio tirpalu, uždedamas tamponas su kolodijonu arba furaplastas su perchlorovinilu. Po naudojimo visa įpurškimo sistema 30 minučių virinama 2% sodos tirpale. Hiperimunizacijos proceso metu nuolat stebima bendra gamintojų būklė ir temperatūros reakcija. Jei temperatūra pakyla, kita antigeno injekcija atliekama jai nukritus iki normos.

4.4.25. Fiksuoto pasiutligės viruso gamybinių padermių saugojimas vykdomas infekcinės zonos patalpose. Fiksuoto pasiutligės viruso gamybinių padermių saugojimas, registravimas, perkėlimas, transportavimas ir naikinimas vykdomas pagal SP 1.2.036-95 reikalavimus.

4.4.26. Priimti lankytojus leidžiama tik specialiai tam skirtose vietose „švarioje“ laboratorijos zonoje.

4.4.27. Įrangos, laboratorinių ar buities reikmenų, instrumentų ir kt. išnešimas iš laboratorijos atliekamas tik juos dezinfekavus ir gavus jos direktoriaus leidimą.

4.4.28. Laboratorijos „infekcinėje“ zonoje draudžiama:

- baigus darbą darbo vietoje palikti indus su fiksuoto pasiutligės viruso „Maskva“ ir „CVS“ gamybinėmis padermėmis;

- pipete su burna užpilkite skystos infekcinės medžiagos per indo kraštą (mėgintuvėlis, kolba, butelis);

- laikyti viršutinius drabužius, kepures, batus, skėčius, pirkinių krepšius, kosmetiką ir kt., taip pat maistą;

- rūkyti, gerti vandenį;

- palikti darbo vietą be priežiūros atliekant bet kokius darbus su gamybinėmis fiksuoto pasiutligės viruso padermėmis;

- išpilkite skystas atliekas (užkrėstus skysčius, tiriamąją medžiagą ir kt.) į kanalizacijos sistemą be išankstinės dezinfekcijos.

4.4.29. Tose pačiose patalpose leidžiama atlikti eksperimentinius ir gamybinius darbus su fiksuoto pasiutligės viruso gamybinėmis padermėmis. Eksperimentinis ir gamybinis darbas turi būti atskirtas laiku. Eksperimentinė medžiaga turi būti laikoma atskirai nuo gamybos medžiagos specialiai tam skirtame šaldytuve arba termostate.

4.4.30. Visi darbuotojai, dirbantys su fiksuoto pasiutligės viruso padermėmis, turi būti klinikai stebimi. Periodinės medicininės apžiūros atliekamos pagal galiojančius įsakymus (N 280/88 – Sveikatos ir medicinos pramonės ministerija bei Rusijos valstybinis sanitarinės ir epidemiologinės priežiūros komitetas).

4.5. Asmeninių apsaugos priemonių (AAP) naudojimo reikalavimai

4.5.1. Laboratorijos darbuotojai turi būti aprūpinti medicininiais chalatais, pižama (kombinezonu), kepurėmis, pakaitiniais batais ir kitomis asmeninėmis apsaugos priemonėmis, atsižvelgiant į atliekamo darbo pobūdį ir pagal galiojančius standartus.

4.5.2. Darbo drabužiai ir avalynė turi būti individualūs, atitikti darbuotojų dydį ir būti laikomi atskirai nuo asmeninių drabužių.

4.5.3. Atliekant tyrimus dėžėse, medicininis chalatas pakeičiamas į nuo maro arba chirurginį chalatą, pasiekiantį apatinį kojos trečdalį. Papildomai naudojamos guminės pirštinės, šlepetės ir, jei reikia, respiratoriai (kaukės). Operacijos, kurių metu reikia atidaryti kaukolę ir stuburą, turi būti atliekamos su guminėmis pirštinėmis, apsauginiais akiniais ir apsiaustu nuo maro. Taip pat būtina dėvėti gumines arba patvarias polietilenines prijuostes, kurias galima lengvai dezinfekuoti arba sunaikinti.

4.5.4. Darbo drabužius reikia keisti tada, kai jie sutepti, bet ne rečiau kaip kartą per savaitę.

4.5.5. Prieš skalbimą apsauginius drabužius reikia nukenksminti pamirkius 1 % chloramino tirpale.

4.6. Reikalavimai medžiagų dezinfekcijai ir patalpų valymui

4.6.1. Įvairių objektų dezinfekcija dirbant su pramoninėmis fiksuoto pasiutligės viruso padermėmis atliekama atsižvelgiant į dezinfekuojamo objekto pobūdį.

Lentelė

Pasiutligė(lot. Pasiutligė, Lyssa, Hidrofobija) nuo seno žinoma kaip laukinių ir naminių gyvūnų liga. Pasiutligės virusas selektyviai pažeidžia centrinės nervų sistemos ląsteles, todėl ligą lydi susijaudinimas, traukuliai, o vėliau – paralyžius.

Morfologija ir biologinės savybės. Pasiutligės virusas yra 100–150 nm ilgio lazdelės formos ir padengtas. Jis sudaro inkliuzus paveiktų ląstelių citoplazmoje, kuriuos 1892 m. aprašė Babes, o 1903 m. Negri. Jie vadinami Babes-Negri kūnais. Inkliuzų forma sferinė, dydžiai 1-20 mikronų, anot Romanovskio, raudonos spalvos. Jų aptikimas Amono rago ląstelėse turi diagnostinę vertę.

Virusas kultivuojamas pelės embriono smegenų audinyje, užsikrėtus vištienos embrionų trynio maišelyje arba smegenyse, taip pat triušio kūne.

Yra dviejų tipų pasiutligės virusai: gatvės virusas, kuris yra išskirtas iš sergančių žmonių ir gyvūnų, ir fiksuotas virusas, kurį Pasteur gavo per ilgą gatvės viruso perėjimą per triušio smegenis (fix virusas). Fikso virusas sukelia paralyžių, kai užkrečiami triušiai po griežtai nustatyto, sutrumpinto 3-7 dienų inkubacinio periodo. Jis nepatogeniškas žmonėms, šunims ir kitiems gyvūnams, neišsiskiria su gyvūnų ir žmonių seilėmis, retai randamas periferiniuose nervuose ir nesudaro Babes-Negri kūnų. Fiksuotas virusas, praradęs virulentiškumą žmonėms ir gyvūnams, naudojamas pasiutligės vakcinų gamyboje. Imuniteto, atsirandančio po pasiutligės vakcinų, mechanizme didžiausią reikšmę turi viruso trukdžių reiškinys. Šio reiškinio esmė slypi vieno tipo viruso, patekusio į šeimininko ląstelę, gebėjime sulėtinti kito tipo viruso, kuris vėliau pateko į tą pačią ląstelę, dauginimąsi. Fiksuotas virusas, turintis didelį afinitetą nerviniam audiniui, greitai dauginasi ir neleidžia vystytis gatvės virusui.

Tvarumas. Pasiutligės virusas nėra stabilus išorinėje aplinkoje: greitai žūva kaitinant, veikiamas saulės spindulių ir dezinfekuojančių medžiagų (formalino, fenolio, sublimacijos). 50% glicerolyje jis gali būti laikomas -20-40 ° C temperatūroje keletą metų.

Patogeniškumas. Visi šiltakraujai laukiniai ir naminiai gyvūnai, kiek mažiau paukščiai yra imlūs gatvės pasiutligės virusui. Paralyžinės pasiutligės formos pasireiškia laboratoriniams gyvūnams (triušiams, baltosioms pelėms, jūrų kiaulytėms) įvairiais užsikrėtimo būdais.

Patogenezė ir klinika. Pasiutligės virusas į žmogaus organizmą patenka per seiles per pasiutusių gyvūnų įkandimus arba sergančio gyvūno seilėtus žmogaus odai. Virusas pasiekia centrinę nervų sistemą per periferinių nervų kamienus ir ją užkrečia. Pasiutligės inkubacinis periodas dažniausiai trunka nuo 1 iki 3 mėnesių ir priklauso nuo įkandimo vietos. Veido ir kaklo įkandimams laikotarpis yra trumpesnis (nuo 10 dienų iki metų). Liga prasideda nuo skausmo įkandimo vietoje, baimės, nerimo ir dirglumo jausmo. Bandant prisipildyti ir net pamačius vandenį, atsiranda rijimo raumenų traukuliai, todėl pasiutligė vadinama hidrofobija, arba hidrofobija. Pacientas yra susijaudinęs, sutrinka sąmonė, stebimi traukulių priepuoliai. Pacientai gali įkąsti ir skubėti pas medicinos personalą. Po kelių dienų ištinka galūnių, veido, kvėpavimo raumenų paralyžius, ištinka mirtis. Ligos trukmė 6-7 dienos.

Virusologinė diagnostika. Metodai intravitalinei pasiutligės viruso indikacijai nebuvo sukurti. Diagnozė nustatoma remiantis tipišku klinikiniu ligos vaizdu. Po mirties Babes-Negri kūnai randami paveiktose smegenų ląstelėse. Specifinį antigeną taip pat galima aptikti naudojant fluorescencinius antikūnus. Virusą galima išskirti užkrečiant laboratorinius gyvūnus: triušius, baltąsias peles ir jūrų kiaulytes, kurių skrodimo metu pažeistų smegenų ląstelėse randami Babes-Negri inkliuzai.

Prevencija ir gydymas. Specifinės prevencijos tikslais skiriama vakcina nuo pasiutligės, kurią pirmiausia pasiūlė Pasteur. Vakcinos ruošiamos iš triušių, avių arba baltųjų žiurkių, užkrėstų fiksuotu pasiutligės virusu, smegenų audinio suspensijos. Yra įvairių rūšių vakcinų, kurios skiriasi konservantų kiekiu ir kokybe. Fermi vakcinoje yra 1% fenolio, Semple vakcinoje jo yra 0,25%, o Phillips vakcinoje yra glicerolio. Pastaraisiais metais buvo pasiūlyta gyva vakcina nuo pasiutligės iš viruso, kuris auginamas ant paukščių embrionų (Fleury vakcina). Vakcinos poveikis pagrįstas virusų trukdžių reiškiniu. Skiepijami visi žmonės, kuriems įkando ar seilėjosi sergantys ar įtariami pasiutęs gyvūnai. Vakcinos vartojimui kontraindikacijų nėra, nes tik taip galima išgelbėti užsikrėtusiuosius. Paprastai skiepai atliekami kelis kartus per 12-30 dienų ar ilgiau, priklausomai nuo įkandimo sunkumo, vietos ir laiko, praėjusio nuo įkandimo. Vakcina švirkščiama po oda į pilvo ertmę.

Skiepijimas turi prasidėti kuo greičiau po įkandimo ir turi būti atliekamas pagal esamas instrukcijas. Imunitetas, susidaręs po vakcinacijos, išlieka iki 6 mėnesių. Žmonės, kuriems pasireiškia ligos požymiai, nėra skiepijami. Esant stipriam įkandimui galvos ir kaklo srityje, kartu su pasiutligės vakcina skiriamas gama globulinas arba serumas nuo pasiutligės. Įtartini gyvūnai stebimi 7 dienas ir, jei nepastebima jokių ligos požymių, jie laikomi sveikais. Nėra veiksmingų pasiutligės gydymo būdų.