Virus və hüceyrə arasında qarşılıqlı təsir növləri. Virus-hüceyrə qarşılıqlı təsirinin məhsuldar növü

Virionun canlı hüceyrə ilə qarşılıqlı əlaqəsi bir neçə mərhələdə baş verir.

IN ilkin (hazırlıq) dövrü Virion hüceyrəyə yapışır, ona nüfuz edir, bundan sonra virionun zülal qabığı məhv edilir, nuklein turşusu sərbəst buraxılır.

Gəlir gizli (gizli) dövr viral infeksiya, bu müddət ərzində yoluxmuş hüceyrədə viral hissəciklərin olması heç bir üsulla aşkar edilə bilməz - ana virion yoxa çıxır. Bu dövrdə hüceyrəyə daxil olan viral nuklein turşusu bu məqsədlə ev sahibinin enzimatik sistemindən istifadə edərək nəslin viral komponentlərinin sintezini təşkil edir. Çoxalma dövrü qız virionlarının əmələ gəlməsi və onların hüceyrədən çıxması ilə başa çatır ( son dövr ).

Daha sadə bakteriyalar ətraf mühitdən hissəcikləri tuta bilmir. Buna görə də bakteriofaqların xüsusi xüsusiyyətləri var sıx bakterial divarı aşmaq üçün cihazlar. Quyruğun sonunda bakteriya membranını həll edən xüsusi bir ferment var. Sonra quyruğun mikroskopik "əzələləri" büzülür və faj nuklein turşusu şprislə yeridilirmiş kimi hüceyrəyə "yerləşir".

Nəticədə fagın zülal örtüyü hüceyrənin səthində qalır və hüceyrəyə yalnız nuklein turşusu daxil olur.

Virusların nuklein turşuları hüceyrədə yeni virus nəslini yaratmaq üçün proqram həyata keçirir. Bu, orijinal təcrübələrlə sübut edilmişdir. Virusları onların tərkib hissələrinə - zülallara və nuklein turşularına ayırmaq mümkün idi. Məlum olub ki, hüceyrə infeksiyası və virusun çoxalması yalnız hüceyrələrə viral nuklein turşusu əlavə edildikdən sonra baş verib. Başqa sözlə, virusların nuklein turşuları özləri virusların çoxalmasına səbəb ola bilər, yəni yoluxucu xüsusiyyətlərə malikdirlər. Başqa bir təcrübədə iki virus öz tərkib hissələrinə ayrıldı və sonra "geyindi": bir virusun nuklein turşusu digərinin qabığında "geyindi". Yaranan hibridlər həssas hüceyrələri yoluxdurdu. Məlum olub ki, hər iki “maskalanmış” virus çoxalmağa qadirdir və yaranan nəsil həmişə hibriddə nuklein turşusu olan virusa bənzəyir.

Hüceyrəyə daxil olan viral nuklein turşusu virusun çoxalmasının bütün proseslərini idarə edir. Birincisi, hüceyrəni hüceyrənin öz metabolizmasını boğan və qız hissəciklərinin nuklein turşularının sintezini təmin edən sözdə erkən zülalları sintez etməyə məcbur edir. Onların formalaşması ana nuklein turşusunun özünü kopyalaması nəticəsində baş verir. Virusun nuklein turşusunda olan genetik məlumat, gec zülallar adlanan qız hissəciklərinin qurulduğu zülalların tərkibini müəyyənləşdirir. DNT tərkibli viruslarda bu məlumat hüceyrə üçün adi şəkildə həyata keçirilir: informasiya RNT (transkripsiya) zülalların sonrakı biosintezinə nəzarət edən DNT-də sintez olunur (tərcümə). Bir çox RNT tərkibli virusların nuklein turşusu həm genetik, həm də informasiya funksiyalarını birləşdirir: RNT həm replikasiyada, həm də tərcümədə (nuklein turşularının və virus zülalının çoxalmasında) iştirak edir. Bir çox virusda zülal qabıqlarının və daxili məzmunun qurulması ayrı-ayrılıqda baş verir. Hüceyrə ayrı-ayrı hissələri "toplayır", sonra onlar birləşərək viral hissəciklər əmələ gətirir. Yoluxmuş bir hüceyrədə gələcək viral hissəciklər üçün kifayət qədər sayda "boşluqlar" yığıldıqda, bir növ hissələrin yığılması (tərkibi) başlayır. Bu proses adətən onun iştirak edən hüceyrə membranının yaxınlığında baş verir. Viral hissəcik tez-tez maddələr ehtiva edir

virusun çoxaldığı hüceyrə üçün xarakterikdir. Məsələn, qrip virusu üçün viral hissəciyin əmələ gəlməsinin son mərhələsi onun bir növ hüceyrə membranı təbəqəsi ilə örtülməsidir. Yəni hüceyrə virusu təkcə “qidalandırır” və “sulayır” deyil, həm də onlara vida “geyindirir”. Virus və hüceyrə arasındakı qarşılıqlı əlaqənin son mərhələsi adətən qısamüddətli olur. Nəticədə yaranan tam hüquqlu viral hissəciklər tez bir zamanda xarici mühitə çıxır. Bakteriofaqlarda nəslin əmələ gəlməsi çox unikal bir şəkildə baş verir. Adətən o, xüsusi fermentin təsiri altında bakterial hüceyrələrin əriməsi (lizisi) ilə müşayiət olunur ki, bu da faqın çoxalmasına paralel olaraq hüceyrədə toplanır və onun məhvinə və ölümünə səbəb olur. Mikroskop altında bunun necə baş verdiyini aydın görə bilərsiniz. Bəzən bakteriyalar sanki partlayır, digər hallarda bakteriyada (ortada və ya uclarından birində) içindəki maddələrin axdığı bir deşik meydana gəlir. Bir ölü bakteriyadan bir neçə yüzə qədər yeni faj hissəcikləri buraxıla bilər. Faqların çoxalması prosesi bu faqlara həssas olan bütün bakteriyalar məhv edilənə qədər davam edir. Çiçək, poliomielit və ensefalit virusları da ətraf mühitə yüzlərlə, bəzən minlərlə qız virionlarının sürətlə yayılması ilə xarakterizə olunur. Digər insan və heyvan virusları (herpes virusu, parotit virusu, reovirus) yetkinləşdikcə hüceyrələri tərk edir. Bu viruslar hüceyrələr ölməzdən əvvəl bir neçə çoxalma dövrünü tamamlamağı bacarır, tədricən hüceyrələrin sintetik ehtiyatlarını tükəndirir və onların məhvinə səbəb olur. Bəzi hallarda V. hüceyrələrin daxilində toplana bilir, kristalşəkilli çoxluqlar (V. quduz, adenoviruslar və s.) əmələ gətirir, bunlara daxilolma cisimləri deyilir.

Qrip, quduzluq, psittacosis, çiçək xəstəliyi ilə bu cür orqanlar hüceyrələrin sitoplazmasında, yaz-yay ensefalitində, sarı qızdırmada, herpes və poliomielitdə - nüvədə; Bəzi infeksiyalarda həm nüvədə, həm də sitoplazmada daxilolma cisimləri aşkar edilmişdir. Son illərdə aparılan tədqiqatlar göstərdi ki, əksər hallarda bu daxilolmalar virusun koloniyalarıdır və onların formalaşması yoluxucu agentlərin çoxalmasının müəyyən mərhələsində təbiidir. Viral xəstəliklərdə hüceyrədaxili daxilolmaların yüksək spesifikliyi bu əlaməti diaqnoz üçün istifadə etməyə imkan verir. Məsələn, beynin sinir hüceyrələrində tapılan sitoplazmik daxilolmalar (neqri cisimləri adlanır) quduzluğun əsas sübutudur və epitel hüceyrələrində aşkar edilən spesifik yuvarlaq və ya oval formasiyalar (Quarnieri cisimləri adlanır) çiçək xəstəliyini göstərir. İnklüzyonlar ensefalit, onurğa iflici, dabaq xəstəliyi və digər xəstəliklərdə də təsvir edilmişdir. Bitki virusları kristal formaya malik olan çox özünəməxsus daxilolmalar əmələ gətirir. Yəni virusların çoxalması xüsusi, misilsiz şəkildə baş verir. Birincisi, virus hissəcikləri hüceyrələrə nüfuz edir və viral nuklein turşuları sərbəst buraxılır. Sonra gələcək viral hissəciklərin təfərrüatları hazırlanır. Çoxalma yeni viral hissəciklərin yığılması və ətraf mühitə buraxılması ilə başa çatır. Bu mərhələlərdən hər hansı birinin itirilməsi normal dövrün pozulmasına gətirib çıxarır və ya V. çoxalmasının tam yatırılmasına, ya da aşağı nəslin meydana çıxmasına səbəb olur.

Virus və ana hüceyrə arasında qarşılıqlı əlaqənin əsas mərhələləri.

1. Adsorbsiya - virusun və ev sahibinin spesifik reseptorlarının qarşılıqlı təsiri ilə əlaqəli bir tetik mexanizmi (qrip virusunda - hemaqlütinin, insanın immun çatışmazlığı virusunda - qlikoprotein gp 120).

2. Penetrasiya - superkapsidin hüceyrə membranı ilə birləşməsi və ya endositoz (pinositoz) ilə.

3. Nuklein turşusunun sərbəst buraxılması - ―nukleokapsidin soyunması və nuklein turşusunun aktivləşməsi.

4. Nuklein turşularının və virus zülallarının sintezi , yəni. ana hüceyrə sistemlərinin tabeçiliyi və onların virusun çoxalması üçün işi.

5. Virion məclisi - virus nuklein turşusunun təkrarlanan nüsxələrinin kapsid zülalı ilə assosiasiyası.

6. Viral hissəciklərin hüceyrədən çıxması , zərflənmiş viruslar tərəfindən superkapsidin alınması.

Viral infeksiyanın formaları.

Makroorqanizm səviyyəsində viral lezyonların əsas formaları fərdi hüceyrələr viruslarla yoluxduqda müşahidə olunanlardan əsaslı şəkildə fərqlənmir.

Məhsuldar viral infeksiya qız populyasiyalarının formalaşması və xarakterik klinik təzahürlər yalnız patogenin reproduktiv dövrünün həyata keçirildiyi yoluxmuş bədəndə həssas hüceyrələr olduqda mümkündür. Məsələn, poliomielit patogeni yalnız primatların və insanların mədə-bağırsaq traktının və mərkəzi sinir sisteminin hüceyrələrində çoxalda bilər.

Abort infeksiyası patogen həssas olmayan hüceyrələrə (məsələn, iribuynuzlu lösemi virusu insan orqanizminə daxil olduqda) və ya tam reproduktiv dövrü təmin edə bilməyən hüceyrələrə (məsələn, hüceyrə dövrünün G0 mərhələsində olanlar) daxil olduqda inkişaf edir. Hüceyrələrin virusa xas reproduktiv prosesləri saxlamaq qabiliyyəti, həmçinin antiviral təsiri müxtəlif viruslara qarşı yönəlmiş IFN-ni boğur.

Davamlı viral infeksiya virus və yoluxmuş hüceyrə arasında belə bir qarşılıqlı əlaqə zamanı, sonuncu öz hüceyrə funksiyalarını yerinə yetirməyə davam etdikdə baş verir. Əgər yoluxmuş hüceyrələr bölünürsə, yoluxmuş bir klon əmələ gəlir. Beləliklə, yoluxmuş hüceyrələrin sayının artması orqanizmdə patogenin ümumi populyasiyasının artmasına kömək edir. Bununla belə, davamlı viral infeksiyalar adətən hüceyrə funksiyalarını pozur və nəticədə klinik təzahürlərə səbəb olur. İnsanlarda davamlı infeksiyaların inkişafı müəyyən dərəcədə yaşa bağlıdır. Məsələn, rubella qızılca virusu və ya sitomeqalovirus (CMV) ilə intrauterin infeksiya patogenin zamanla məhdud davamlılığına səbəb olur. Semptomların görünüşü, fetusun yoluxucu agentə qarşı immun reaksiyalarını inkişaf etdirmək qabiliyyəti ilə əlaqələndirilir.

Gizli (gizli) viral infeksiya . Davamlı infeksiyalar qız viral populyasiyalarının daimi sərbəst buraxılması ilə müşayiət olunsa da, gizli lezyonlarda onlar sporadik olaraq formalaşır. Belə patogenlərin reproduktiv dövrü sonrakı mərhələlərdə kəskin şəkildə yavaşlayır və müxtəlif amillərin təsiri altında aktivləşir.

Latent infeksiyalar əksər herpes virusları üçün xarakterikdir, təkrarlanan və adətən qeyri-proqressiv xəstəliklərə səbəb olur.

Qeyri-adekvat infeksiyalar *latdan. in-, inkar, + appareo, be+ ayrı-ayrı orqanlarda az miqdarda patogenin asimptomatik dövranı ilə müşayiət olunur. Bu vəziyyətdə patogen yalnız xüsusi üsullarla müəyyən edilə bilər. Belə lezyonları asemptomatik daşımadan fərqləndirən, klinik təzahürlərin yüksək ehtimalıdır. Bu termin xəstəliyin aşkar əlamətləri olmayan bir sıra infeksiyalar üçün istifadə olunur. İnsanlarda viral infeksiyalar praktikasında tez-tez "subklinik infeksiya" alternativ termini istifadə olunur. Əslində, gizli infeksiyalar bədən və patogen arasında bir tarazlığın qurulduğu, xroniki olaraq meydana gələn cihazdaxili infeksiyalar kimi qəbul edilə bilər.

Hərəkətsiz (kriptojenik) viral infeksiya - patogenin ayrı-ayrı ocaqlarda (məsələn, sinir ganglionlarında) qeyri-aktiv vəziyyətdə olduğu viral infeksiyanın təzahür forması. Klinik olaraq infeksiya yalnız bədənin müdafiəsi kəskin şəkildə zəiflədikdə özünü göstərir. Məsələn, ilkin yoluxma zamanı suçiçəyi törədən tip 3 herpes virusu orqanizmdə ömür boyu qalır. Herpes zoster şəklində xəstəliyin təkrarlanması yalnız immun statusunun pozulması ilə mümkündür (ən çox qocalıqda).

Yavaş viral infeksiyalar uzun inkubasiya dövrü (aylar və illər) ilə xarakterizə olunur, bu müddət ərzində patogen çoxalır və toxumaların getdikcə daha aydın zədələnməsinə səbəb olur. Əvvəlcə patogen məhdud hüceyrə qrupunda çoxalır, lakin getdikcə onların artan sayını yoluxdurur. Xəstəliklər ağır lezyonların inkişafı və xəstənin ölümü ilə başa çatır. Yavaş viral infeksiyalara subakut sklerozan panensefalit, HİV infeksiyası və s.

№ 19 Virus-hüceyrə qarşılıqlı təsirinin növləri. Virusların çoxalmasının mərhələləri.
Virus-hüceyrə qarşılıqlı təsirinin növləri. Virus və hüceyrə arasında üç növ qarşılıqlı əlaqə var: məhsuldar, abortiv və inteqrativ.
Məhsuldar tip- yeni nəsil virionların əmələ gəlməsi və yoluxmuş hüceyrələrin ölümü (lizisi) ilə başa çatır (sitolitik forma). Bəzi viruslar hüceyrələri məhv etmədən tərk edir (sitolitik olmayan forma).
Abortiv tip- yeni virionların əmələ gəlməsi ilə bitmir, çünki hüceyrədəki yoluxucu proses mərhələlərdən birində kəsilir.
İnteqrativ tip, və ya virogeniya- viral DNT-nin provirus şəklində hüceyrə xromosomuna daxil olması (inteqrasiya) və onların birgə mövcudluğu (birgə replikasiya) ilə xarakterizə olunur.
Virusların çoxalmasıardıcıl olaraq bir-birini əvəz edən bir neçə mərhələdə həyata keçirilir: virusun hüceyrəyə adsorbsiyası; virusun hüceyrəyə nüfuz etməsi; virusu “soyundurmaq”; hüceyrədə viral komponentlərin biosintezi; virusların əmələ gəlməsi; virusların hüceyrədən çıxarılması.
Adsorbsiya.Virusun hüceyrə ilə qarşılıqlı əlaqəsi adsorbsiya prosesindən, yəni virusların hüceyrə səthinə yapışmasından başlayır. Bu çox spesifik bir prosesdir. Virus hüceyrə membranının müəyyən sahələrində - sözdə reseptorlarda adsorbsiya olunur. Hüceyrə reseptorları zülalları, zülalların və lipidlərin karbohidrat komponentlərini, lipidləri təmsil edən fərqli kimyəvi təbiətə malik ola bilər. Bir hüceyrənin səthindəki xüsusi reseptorların sayı 10 4 ilə 10 5 arasında dəyişir. Nəticədə onlarla, hətta yüzlərlə virus hissəcikləri hüceyrəyə adsorbsiya oluna bilər.
Hüceyrəyə nüfuz etmə. Heyvan viruslarının hüceyrəyə daxil olmasının iki yolu var: viropeksi və virus zərfinin hüceyrə membranı ilə birləşməsi. Viropexis ilə, virusların adsorbsiyasından sonra hüceyrə membranının bir hissəsinin invaginasiyası (invaginasiyası) və viral hissəciyi ehtiva edən hüceyrədaxili vakuolun meydana gəlməsi baş verir. Virus olan vakuol istənilən istiqamətdə sitoplazmanın müxtəlif hissələrinə və ya hüceyrə nüvəsinə daşına bilər. Füzyon prosesi kapsid və ya superkapsid qabığının səthi viral zülallarından biri tərəfindən həyata keçirilir. Göründüyü kimi, virusun hüceyrəyə daxil olmasının hər iki mexanizmi bir-birini istisna etmir, əksinə tamamlayır.
"Zollaq"."Soyunma" prosesi qoruyucu viral qabıqların çıxarılmasını və yoluxucu prosesə səbəb ola biləcək virusun daxili komponentinin sərbəst buraxılmasını əhatə edir. Virusların "soyunması" tədricən, bir neçə mərhələdə, hüceyrənin sitoplazmasının və ya nüvəsinin müəyyən bölgələrində baş verir, bunun üçün hüceyrə xüsusi fermentlər dəstindən istifadə edir. Virus zərfinin hüceyrə membranı ilə birləşməsi yolu ilə virusun nüfuz etməsi halında, virusun hüceyrəyə nüfuz etməsi prosesi onun "soyunmasının" birinci mərhələsi ilə birləşdirilir. “Soyunmanın” son məhsulları virusun nüvəsi, nukleokapsid və ya nuklein turşusudur.
Virus komponentlərinin biosintezi. Hüceyrəyə daxil olan viral nuklein turşusu hüceyrənin genetik məlumatı ilə uğurla rəqabət aparan genetik məlumat daşıyır. Hüceyrə sistemlərinin fəaliyyətini pozur, hüceyrənin öz metabolizmini boğur və onu yeni virus zülallarını və virus nəslini yaratmaq üçün istifadə olunan nuklein turşularını sintez etməyə məcbur edir.
Virusun genetik məlumatının həyata keçirilməsi transkripsiya, tərcümə və replikasiya proseslərinə uyğun olaraq həyata keçirilir.
Virusların əmələ gəlməsi (yığılması). Sintezləşdirilmiş viral nuklein turşuları və zülalları bir-birini xüsusi olaraq “tanımaq” qabiliyyətinə malikdir və onların konsentrasiyası kifayət edərsə, hidrofobik, duz və hidrogen bağları nəticəsində kortəbii birləşirlər.
Müxtəlif strukturlu virusların yığılması üçün aşağıdakı ümumi prinsiplər mövcuddur:
1. Virusların əmələ gəlməsi aralıq formaların əmələ gəlməsi ilə çoxmərhələli prosesdir;
2. Sadə düzülmüş virusların yığılması viral nuklein turşusu molekullarının kapsid zülalları ilə qarşılıqlı təsirini və nukleokapsidlərin (məsələn, poliomielit virusları) əmələ gəlməsini nəzərdə tutur. Mürəkkəb viruslarda əvvəlcə nukleokapsidlər əmələ gəlir, onlarla superkapsid qabığı zülalları qarşılıqlı əlaqədə olur (məsələn, qrip virusları);
3. Virusların əmələ gəlməsi hüceyrədaxili mayedə deyil, hüceyrənin nüvə və ya sitoplazmatik membranlarında baş verir;
4. Yaranma prosesi zamanı kompleks şəkildə təşkil olunmuş viruslara ana hüceyrənin komponentləri (lipidlər, karbohidratlar) daxildir.
Virusların hüceyrədən çıxması. Virus nəslinin hüceyrədən sərbəst buraxılmasının iki əsas növü var. Birinci növ - partlayıcı - çox sayda virusun eyni vaxtda buraxılması ilə xarakterizə olunur. Bu vəziyyətdə hüceyrə tez ölür. Bu çıxış üsulu superkapsid qabığı olmayan viruslar üçün xarakterikdir. İkinci növ qönçələnmədir. Superkapsid qabığı olan viruslar üçün xarakterikdir. Montajın son mərhələsində kompleks virusların nukleokapsidləri hüceyrə plazma membranında sabitlənir, viral zülallar tərəfindən dəyişdirilir və tədricən onu çıxarır. Çıxış nəticəsində tərkibində nukleokapsid olan “qönçə” əmələ gəlir. Sonra "qönçə" hüceyrədən ayrılır. Beləliklə, bu virusların xarici qabığı hüceyrədən çıxarkən əmələ gəlir. Bu mexanizmlə hüceyrə bu və ya digər dərəcədə əsas funksiyalarını saxlayaraq uzun müddət virus yarada bilər.
Virusların çoxalmasının tam tsiklini tamamlamaq üçün tələb olunan vaxt 5-6 saatdan (qrip virusları, çiçək xəstəliyi və s.) bir neçə günə (qızılca virusları, adenoviruslar və s.) qədər dəyişir. Yaranan viruslar yeni hüceyrələri yoluxdura bilir və onlarda yuxarıda qeyd olunan çoxalma dövrünü keçir.

Virusların çoxalması prosesini 2 mərhələyə bölmək olar . Birinci mərhələ 3 mərhələdən ibarətdir: 1) virusun həssas hüceyrələrə adsorbsiyası; 2) virusun hüceyrəyə nüfuz etməsi; 3) virusun deproteinləşdirilməsi . İkinci mərhələ viral genomun həyata keçirilməsi mərhələlərini əhatə edir: 1) transkripsiya, 2) tərcümə, 3) replikasiya, 4) viral hissəciklərin yığılması, yetişməsi və 5) virusun hüceyrədən çıxması.

Virusun hüceyrə ilə qarşılıqlı əlaqəsi adsorbsiya prosesi ilə, yəni virusun hüceyrə səthinə yapışması ilə başlayır.

Adsorbsiya virion zülalının (antireseptorun) hüceyrə səthinin tamamlayıcı strukturuna - hüceyrə reseptoruna spesifik bağlanmasıdır. Kimyəvi təbiətinə görə, virusların sabitləşdiyi reseptorlar iki qrupa aiddir: mukoprotein və lipoprotein. Qrip virusları, parainfluenza və adenoviruslar mukoprotein reseptorlarında fiksasiya olunur. Enteroviruslar, herpes virusları, arboviruslar hüceyrənin lipoprotein reseptorlarına adsorbsiya edilir. Adsorbsiya yalnız müəyyən elektrolitlərin, xüsusən də virusun və hüceyrə səthinin artıq anion yüklərini neytrallaşdıran və elektrostatik itələməni azaldan Ca2+ ionlarının iştirakı ilə baş verir səthi virus və hüceyrədə müsbət və mənfi yüklü strukturların elektrostatik qarşılıqlı təsirinin nəticəsidir və sonra virion əlavə zülalı ilə hüceyrənin plazma membranındakı xüsusi qruplar arasında xüsusi qarşılıqlı əlaqə baş verir. Sadə insan və heyvan virusları kapsidin bir hissəsi kimi əlavə zülalları ehtiva edir. Mürəkkəb viruslarda əlavə zülallar superkapsidin bir hissəsidir. Onlar filamentlər (adenoviruslarda liflər) və ya sünbüllər, mikso-, retro-, rabdo- və digər viruslarda göbələk kimi strukturlara malik ola bilər. Əvvəlcə virionun reseptorla tək əlaqəsi baş verir - bu cür birləşmə kövrəkdir - adsorbsiya geri çevrilir. Geri dönməz adsorbsiyanın baş verməsi üçün viral reseptor ilə hüceyrə reseptoru arasında çoxlu əlaqə, yəni sabit multivalent birləşmə olmalıdır. Bir hüceyrənin səthindəki xüsusi reseptorların sayı 10 4 -10 5-dir. Bəzi viruslar üçün reseptorlar, məsələn, arboviruslar. həm onurğalıların, həm də onurğasızların hüceyrələrində, digər viruslar üçün yalnız bir və ya bir neçə növün hüceyrələrində olur;

İnsan və heyvan viruslarının hüceyrələrə nüfuz etməsi iki yolla baş verir: 1) viropexis (pinositoz); 2) viral superkapsid qabığının hüceyrə membranı ilə birləşməsi. Bakteriofaqlar fagın zülal əlavəsinin büzülməsi nəticəsində hüceyrəyə nuklein turşusu yeridildikdə, şpris adlanan öz nüfuz mexanizminə malikdir.

Virusun deproteinləşdirilməsi, viral hemomun viral qoruyucu qabıqlardan sərbəst buraxılması ya viral fermentlərin köməyi ilə, ya da hüceyrə fermentlərinin köməyi ilə baş verir. Deproteinləşmənin son məhsulları daxili virus zülalı ilə əlaqəli nuklein turşuları və ya nuklein turşularıdır. Sonra viral komponentlərin sintezinə səbəb olan viral çoxalmanın ikinci mərhələsi baş verir.

Transkripsiya genetik kodun qanunlarına uyğun olaraq virusun DNT və ya RNT-sindən məlumatın mRNT-yə yenidən yazılmasıdır.

Tərcümə mRNT-də olan genetik məlumatın müəyyən bir amin turşusu ardıcıllığına çevrilməsi prosesidir.

Replikasiya virusun genomuna homoloji olan nuklein turşusu molekullarının sintezi prosesidir.

DNT tərkibli viruslarda genetik məlumatın həyata keçirilməsi hüceyrələrdə olduğu kimidir:

DNT transkripsiyası i-RNT tərcümə zülalı

RNT transkripsiyası i-RNT tərcümə zülalı

Müsbət RNT genomu olan viruslar (toqaviruslar, pikornaviruslar) transkripsiyadan məhrumdurlar:

RNT tərcümə zülalı

Retrovirusların genetik məlumat ötürmək üçün unikal bir yolu var:

RNT tərs transkripsiyası DNT transkripsiyası mRNA tərcümə zülalı

DNT ev sahibi hüceyrənin (provirus) genomu ilə inteqrasiya edir.

Hüceyrədə viral komponentlər yığıldıqdan sonra virusun çoxalmasının son mərhələsi başlayır: viral hissəciklərin yığılması və hüceyrədən virionların buraxılması. Virionlar hüceyrədən iki yolla çıxır: 1) hüceyrəni “partlayaraq”, nəticədə hüceyrə məhv olur. Bu yol sadə viruslara (picorna-, reo-, papova- və adenoviruslara) xasdır, 2) qönçələnmə ilə hüceyrələrdən çıxır. Superkapsid ehtiva edən viruslara xasdır. Bu üsulla hüceyrə dərhal ölmür və resursları tükənənə qədər çoxlu virus nəslini yarada bilir.

Virusların becərilməsi üsulları

Laboratoriya şəraitində virusların becərilməsi üçün aşağıdakı canlı obyektlərdən istifadə olunur: 1) hüceyrə kulturaları (toxumalar, orqanlar); 2) toyuq embrionları; 3) laboratoriya heyvanları.

Hüceyrə mədəniyyəti

Ən çox yayılmışlar bir qatlı hüceyrə mədəniyyətləridir, onları 1) birincil (əsasən tripsinizləşdirilmiş), 2) yarı davamlı (diploid) və 3) davamlı olaraq bölmək olar.

Mənşəyinə görə onlar embrion, şiş və yetkin orqanizmlərə təsnif edilir; morfogenez ilə- fibroblastik, epitelial və s.

İlkin Hüceyrə kulturaları xüsusi qida mühiti ilə örtülmüş plastik və ya şüşə səthdə tək qat şəklində böyümək qabiliyyətinə malik hər hansı insan və ya heyvan toxumasının hüceyrələridir. Belə bitkilərin ömrü məhduddur. Hər bir konkret halda, onlar mexaniki üyüdülmə, proteolitik fermentlərlə müalicə və hüceyrələrin sayının standartlaşdırılmasından sonra toxumadan alınır. Meymun böyrəklərindən, insan embrion böyrəklərindən, insan amnionundan və toyuq embrionlarından alınan ilkin kulturalar virusların təcrid edilməsi və toplanması, həmçinin virus peyvəndlərinin istehsalı üçün geniş istifadə olunur.

Yarı dəri (və ya diploid ) hüceyrə kulturaları - ilkin diploid xromosom dəstini saxlayaraq, in vitro şəraitdə 50-100 keçidə tab gətirə bilən eyni tipli hüceyrələr. İnsan embrion fibroblastlarının diploid ştammları həm viral infeksiyaların diaqnostikasında, həm də viral vaksinlərin istehsalında istifadə olunur.

Davamlı hüceyrə xətləri potensial ölümsüzlük və heteroploid karyotip ilə xarakterizə olunur.

Transplantasiya edilə bilən xətlərin mənbəyi ilkin hüceyrə mədəniyyətləri ola bilər (məsələn, SOC, PES, BHK-21 - bir günlük Suriya hamsterlərinin böyrəklərindən; PMS - qvineya donuzunun böyrəyindən və s.) fərdi hüceyrələr in vitro sonsuz reproduksiyaya meyl göstərən. Hüceyrələrdən belə xüsusiyyətlərin yaranmasına səbəb olan dəyişikliklər toplusuna transformasiya, davamlı toxuma kulturalarının hüceyrələri isə transformasiya adlanır.

Transplantasiya edilə bilən hüceyrə xətlərinin başqa bir mənbəyi bədxassəli neoplazmalardır. Bu vəziyyətdə hüceyrə transformasiyası in vivo baş verir. Viroloji praktikada transplantasiya edilmiş hüceyrələrin aşağıdakı xətləri ən çox istifadə olunur: HeLa - uşaqlıq boynu karsinomasından əldə edilir; Ner-2 - qırtlaq xərçəngindən; Detroit-6 - ağciyər xərçəngi metastazından sümük iliyinə; RH - insan böyrəyindən.

Hüceyrə yetişdirilməsi üçün qida mühiti tələb olunur ki, bu da məqsədlərinə görə böyümə və dəstəkləyici mühitə bölünür. Böyümə mühitində monolayer yaratmaq üçün aktiv hüceyrə proliferasiyasını təmin etmək üçün daha çox qida maddəsi olmalıdır. Dəstəkləyici media yalnız hüceyrədə virusların çoxalması zamanı hüceyrələrin artıq formalaşmış bir təbəqədə sağ qalmasını təmin etməlidir.

Sintetik media 199 və Eagle mediası kimi standart sintetik mühitlərdən geniş istifadə olunur. Məqsədindən asılı olmayaraq, bütün hüceyrə mədəniyyəti mühitləri balanslaşdırılmış duz məhlulu ilə hazırlanır. Çox vaxt Hanks həllidir. Əksər böyümə mühitinin ayrılmaz tərkib hissəsi heyvan qan zərdabıdır (dana, iribuynuzlu, at), 5-10% -i olmadan hüceyrə çoxalması və monolayer meydana gəlməsi baş vermir. Serum baxım mühitinə daxil deyil.

Hüceyrə kulturalarında virusların təcrid edilməsi və onların təyini üsulları.

Xəstədən müxtəlif yoluxucu materiallardan (qan, sidik, nəcis, selikli axıntı, orqan yuyulması) virusları təcrid edərkən, şübhəli virusa ən həssas olan hüceyrə kulturalarından istifadə olunur. İnfeksiya üçün, hüceyrələrin yaxşı inkişaf etmiş bir təbəqəsi olan sınaq borularında mədəniyyətlərdən istifadə olunur. Hüceyrələri yoluxdurmazdan əvvəl qida mühiti çıxarılır və hər bir sınaq borusuna bakteriya və göbələkləri məhv etmək üçün antibiotiklərlə qabaqcadan işlənmiş sınaq materialının 0,1-0,2 ml süspansiyonu əlavə edilir. 30-60 dəqiqədən sonra. Virusun hüceyrələrlə təmasından sonra artıq material çıxarılır, sınaq borusuna dəstəkləyici mühit əlavə edilir və virusun təkrarlanması əlamətləri aşkarlanana qədər termostatda qalır.

Yoluxmuş hüceyrə mədəniyyətlərində virusun mövcudluğunun göstəricisi ola bilər:

1) xüsusi hüceyrə degenerasiyasının inkişafı - virusun sitopatik təsiri (CPE), üç əsas növü var: yuvarlaq və ya kiçik hüceyrə degenerasiyası; çoxnüvəli nəhəng hüceyrələrin - simplastların formalaşması; hüceyrələrin bir neçə qatından ibarət olan hüceyrə proliferasiyası ocaqlarının inkişafı;

2) təsirlənmiş hüceyrələrin sitoplazmasında və nüvələrində yerləşən hüceyrədaxili daxilolmaların aşkar edilməsi;

3) müsbət hamaqlütinasiya reaksiyası (RHA);

4) müsbət hemadsorbsiya reaksiyası (RHAds);

5) lövhə əmələ gəlməsi fenomeni: virusa yoluxmuş hüceyrələrin bir təbəqəsi neytral qırmızı göstərici (fon - çəhrayı) əlavə edilməklə nazik bir ağar təbəqəsi ilə örtülmüşdür. Virus olduqda hüceyrələrdə çəhrayı agar fonunda rəngsiz zonalar (“lövhələr”) əmələ gəlir.

6) CPD və ya GA olmadıqda, müdaxilə reaksiyası həyata keçirilə bilər: tədqiq olunan mədəniyyət CPD-yə səbəb olan virusla yenidən yoluxmuşdur. Müsbət vəziyyətdə CPP olmayacaq (müdaxilə reaksiyası müsbətdir). Test materialında virus yoxdursa, CPE müşahidə olunur.

Toyuq embrionlarında virusların təcrid edilməsi.

Viroloji tədqiqatlar üçün 7-12 günlük toyuq embrionlarından istifadə olunur.

İnfeksiyadan əvvəl embrionun canlılığı müəyyən edilir. Ovoscoping zamanı canlı embrionlar hərəkətlidir və damar nümunəsi aydın görünür. Hava kisəsinin sərhədləri sadə qələmlə qeyd olunur. Toyuq embrionları aseptik şəraitdə, steril alətlərdən istifadə edərək, hava boşluğunun üstündəki qabığı yod və spirtlə əvvəlcədən müalicə etdikdən sonra yoluxur.

Toyuq embrionlarına yoluxma üsulları fərqli ola bilər: virusun xorion-allantoik membrana, amniotik və allantoik boşluqlara, sarı kisəsinə tətbiqi. İnfeksiya üsulunun seçimi tədqiq olunan virusun bioloji xüsusiyyətlərindən asılıdır.

Toyuq embrionunda virusun göstəricisi embrionun ölümü, allantoik və ya amniotik maye ilə şüşə üzərində müsbət hemaqlütinasiya reaksiyası və xorion-allantoik membranda fokus lezyonları (“lövhələr”) ilə edilir.

III. Laboratoriya heyvanlarında virusların təcrid edilməsi.

Laboratoriya heyvanları daha rahat sistemlərdən (hüceyrə kulturaları və ya toyuq embrionları) istifadə etmək mümkün olmadıqda yoluxucu materialdan virusları təcrid etmək üçün istifadə edilə bilər. Onlar əsasən yeni doğulmuş ağ siçanları, hamsterləri, qvineya donuzlarını və siçovul balalarını götürürlər. Heyvanlar virus sitotropizmi prinsipinə uyğun olaraq yoluxur: pnevmotrop viruslar intranazal, neyrotrop viruslar - intraserebral, dermatotrop viruslar - dəriyə yeridilir.

Virusun göstəricisi heyvanlarda xəstəlik əlamətlərinin görünüşünə, onların ölümünə, toxuma və orqanlarda patomorfoloji və patohistoloji dəyişikliklərə, həmçinin orqanlardan ekstraktlarla müsbət hemaqlotinasiya reaksiyasına əsaslanır.

Abstrakt viruslar

Viruslar insan həyatında böyük rol oynayır. Onlar bir sıra təhlükəli xəstəliklərin törədiciləridir - çiçək, hepatit, ensefalit, məxmərək, quduzluq, qrip və s.

1892-ci ildə rus alimi D.İ. İvanovski tütün xəstəliyinin törədicisi - tütün mozaikasının qeyri-adi xüsusiyyətlərini təsvir etmişdir. Bu patogen bakterial filtrlərdən keçdi və üstəlik, süni qida mühitində böyümədi. Beləliklə, sağlam tütün bitkiləri xəstə bitkinin şirəsindən hüceyrəsiz filtratla yoluxa bilər.

Neçə ildən sonra dabaq xəstəliyinin törədicisi aşkar edilib, o da bakteriya filtrlərindən keçib.

1898-ci ildə Beijerinck bəzi süzülmüş bitki mayelərinin yoluxucu təbiətini göstərmək üçün yeni "virus" (latın zəhərindən) sözünü işlətdi.

1917-ci ildə F. d'Herrel bir bakteriofaq - bakteriyaları yoluxduran bir virus kəşf etdi.. Lakin uzun müddət virusun quruluşu alimlər üçün sirr olaraq qalırdı. Buna görə də viruslar 30-cu illərdə kəşf edildikdən dərhal sonra elektron mikroskop altında tədqiq edilən ilk obyektlər sırasında idi.

Virusların digər orqanizmlərdən fərqləri:

1. Viruslar ən kiçik orqanizmlərdir (orta hesabla bakteriyadan 50 dəfə kiçikdirlər), işıq mikroskopu ilə onları görmək olmur. 30-300 nm.

2. Virusların hüceyrə quruluşu yoxdur. Hüceyrə quruluşunu həyatın məcburi əlaməti hesab etsək, viruslar canlı deyildir. Bununla belə, onlar genetik materiala malikdirlər və öz-özünə çoxalma qabiliyyətinə malikdirlər. Virusların bir dəfə hüceyrədən qaçan və hüceyrə mühitinə qayıtdıqda çoxalma qabiliyyətini saxlayan genetik material olduğuna dair bir fərziyyə var.

3. Viruslar özlərini yalnız canlı hüceyrənin daxilində çoxalda bilirlər və müstəqil orqanizmlər deyillər.

4. Viruslar bir kiçik nuklein turşusu molekulundan (DNT və ya RNT) ibarətdir və zülal qabığı ilə əhatə olunmuşdur.

5. Hüceyrə orqanizmlərindən fərqli olaraq viruslar özbaşına zülal sintez edə bilməz. Virus hüceyrəyə yalnız öz nuklein turşusunu daxil edir, bu da ev sahibi DNT-ni söndürür və hüceyrəyə lazım olan zülalları sintez etmək əmrini verir (virusun yeni nüsxələrinin yığılması və buraxılması üçün).

Virusların quruluşu

Viral hissəcik də deyilir virion, zülal qabığı ilə əhatə olunmuş nuklein turşusundan (DNT və ya RNT) ibarətdir. Bu qabıq deyilir kapsid. Kapsid alt hissələrdən ibarətdir - kapsomerlər. nuklein turşusu ilə kapsid - nukleokapsid- çılpaq və ya əlavə qabığa malik ola bilər ( qrip və herpes virusları).

Ən sadə viruslar, məsələn, tütün mozaika virusu, yalnız bir protein kapsidi var. Ziyil virusu və adenovirusların quruluşu oxşardır..

Viral hissəciklər çubuqşəkilli və ya filamentli ola bilər və ya çoxüzlü formada ola bilər.

Virus-hüceyrə qarşılıqlı əlaqəsi

1. Hüceyrəsinin virus tərəfindən tanınması. Bir qayda olaraq, virusun daxil olması onun hüceyrə səthində xüsusi reseptor zülalına bağlanmasından əvvəl baş verir.

2. Adsorbsiya – virionun hüceyrə səthinə yapışması. Bağlama, hüceyrə səthində müvafiq reseptoru tanıyan viral hissəciyin səthindəki xüsusi zülallardan istifadə etməklə həyata keçirilir.. Kilidin açarı kimi.

3. Membran vasitəsilə penetrasiya. Virusun bağlandığı membran hissəsi sitoplazmaya batırılır və vakuola çevrilir, sonra nüvə ilə birləşə bilər.

4. “Soyunma” - kapsiddən azad etmək. Ya hüceyrə səthində, ya da sitoplazmada hüceyrə fermentləri tərəfindən kapsidin məhv edilməsi nəticəsində baş verir.

5. Viral nuklein turşusunun surətinin çıxarılması (reduplikasiyası).

6. Viral zülalların sintezi.

7. Virionların nüvədə və ya sitoplazmada yığılması.

8. Virionların hüceyrədən çıxması. Bəzi viruslar üçün bu, "partlayış" yolu ilə baş verir, nəticədə hüceyrənin bütövlüyü pozulur və ölür. Digər viruslar qönçələnməni xatırladan tərzdə buraxılır. Bu halda ev sahibi hüceyrələr öz həyat qabiliyyətini uzun müddət saxlaya bilirlər. Virionlar müxtəlif sürətlə hüceyrədən ayrılır. Bəzi infeksiya növlərində virionlar onu məhv etmədən kifayət qədər uzun müddət hüceyrənin içərisində qala bilirlər.

Bakteriya virusları

Bakteriyalara hücum edən viruslar , bakteriofaqlar və ya sadəcə faglar adlanır.

Bakteriofaqların quruluşuəsasən nümunə kimi T-faq istifadə edərək öyrənilmişdir Eccherichia coli(kolifaj). Kolifaj çoxüzlü baş və quyruqdan ibarətdir. Baş kapsomerlərdən ibarətdir və içərisində DNT var. Quyruq mürəkkəb bir quruluşa malikdir və içi boş çubuqdan, onu əhatə edən daralma qabığından və onurğaları və filamentləri olan bazal boşqabdan (ev hüceyrəsində adsorbsiya üçün zəruridir) ibarətdir.

Bakteriofaqın hüceyrəyə nüfuz etməsi

Bakteriyaların qalın hüceyrə divarları heyvan hüceyrələrini yoluxdurarkən virusun sitoplazmaya daxil olmasına imkan vermir. Buna görə də bakteriofaq hüceyrəyə içi boş çubuq daxil edir və onun vasitəsilə başda yerləşən nuklein turşusunu itələyir.

1892-ci ildə D. İ. İvanovski tərəfindən virusların kəşfi virusologiya elminin inkişafının əsasını qoydu. Onun daha sürətli inkişafına elektron mikroskopun ixtirası və hüceyrə kulturalarında mikroorqanizmlərin becərilməsi metodunun işlənib hazırlanması kömək etdi.

Hal-hazırda virusologiya sürətlə inkişaf edən bir elmdir, bunun bir sıra səbəbləri var:

xüsusi kemoterapi demək olar ki, tam olmaması fonunda insan yoluxucu patologiyası (nümunələr - qrip virusu, HİV insan immun çatışmazlığı virusu, sitomeqalovirus və digər herpes viruslar) viruslar aparıcı rolu;

Biologiya və genetikada bir çox fundamental sualları həll etmək üçün virusların istifadəsi.

Virusların (və plazmidlərin) əsas xassələri, onlar canlı dünyanın qalan hissəsindən fərqlənirlər.

1. Ultramikroskopik ölçülər (nanometrlərlə ölçülür). Böyük viruslar (çiçək virusu) 300 nm, kiçik olanlar isə 20-dən 40 nm-ə qədər ölçülərə çata bilər. 1mm=1000µm, 1µm=1000nm.

3. Viruslar böyümə və ikili parçalanma qabiliyyətinə malik deyillər.

4. Viruslar öz genomik nuklein turşusundan istifadə edərək yoluxmuş ana hüceyrədə çoxalaraq çoxalırlar.

6. Virusların yaşayış yeri canlı hüceyrələr - bakteriyalar (bunlar bakterial viruslar və ya bakteriofaqlardır), bitki, heyvan və insan hüceyrələridir.

Bütün viruslar iki keyfiyyətcə fərqli formada mövcuddur: hüceyrədənkənar - virion və hüceyrədaxili - virus. Mikrokosmosun bu nümayəndələrinin taksonomiyası virionların xüsusiyyətlərinə - virusun inkişafının son mərhələsinə əsaslanır.

Virusların quruluşu (morfologiyası).

1. Virus genomu tək zəncirli RNT molekulları (əksər RNT viruslarında) və ya iki zəncirli DNT molekulları (əksər DNT viruslarında) ilə təmsil olunan nuklein turşuları əmələ gətirir.

2. Kapsid- genomik nuklein turşusunun qablaşdırıldığı zülal qabığı. Kapsid eyni protein alt bölmələrindən ibarətdir - kapsomerlər. Kapsomerləri bir kapsidə qablaşdırmağın iki yolu var - spiral (spiral viruslar) və kubik (sferik viruslar).

Spiral simmetriya ilə zülal alt bölmələri spiral şəklində düzülür və onların arasında da spiral şəklində genomik nuklein turşusu (filamentli viruslar) yerləşdirilir. Kub simmetriya növü ilə virionlar polihedra şəklində ola bilər, əksər hallarda - iyirmi hedra - İkosaedrlər.

3. Sadəcə olaraq hazırlanmış viruslar var nukleokapsid, yəni kapsid ilə genom kompleksi "çılpaq" adlanır.

4. Digər virusların kapsidin üstündə əlavə membranabənzər qabıq var, virusun ana hüceyrədən çıxması zamanı əldə etdiyi - superkapsid. Belə viruslara “geyinmiş” deyilir.

Viruslara əlavə olaraq, ötürülə bilən agentlərin daha sadə təşkil edilmiş formaları var - plazmidlər, viroidlər və prionlar.

Virusun ana hüceyrə ilə qarşılıqlı əlaqəsinin əsas mərhələləri

1. Adsorbsiya qarşılıqlı təsirlə əlaqəli tətik mexanizmidir spesifik virusun və ev sahibinin reseptorları (qrip virusunda - hemaqlütinin, insanın immun çatışmazlığı virusunda - qlikoprotein gp 120).

2. Penetrasiya - superkapsidin hüceyrə membranı ilə birləşməsi və ya endositoz (pinositoz) ilə.

3. Nuklein turşularının sərbəst buraxılması - nukleokapsidin “soyunması” və nuklein turşusunun aktivləşməsi.

4. Nuklein turşularının və virus zülallarının sintezi, yəni host hüceyrə sistemlərinin tabeçiliyi və onların virusun çoxalması üçün işi.

5. Virion montajı - virus nuklein turşusunun təkrarlanan nüsxələrinin kapsid zülalı ilə assosiasiyası.

6. Viral hissəciklərin hüceyrədən çıxması, zərflənmiş viruslar tərəfindən superkapsidin alınması.

Viruslar və ana hüceyrələr arasında qarşılıqlı təsirin nəticələri

1. Abort prosesi- hüceyrələr virusdan azad edildikdə:

Yoluxduqda qüsurlu replikasiyası yardımçı virus tələb edən virus bu virusların müstəqil replikasiyası mümkün deyil (qondarma virusoidlər); Məsələn, delta (D) hepatit virusu yalnız hepatit B virusunun, onun Hbs - antigen, adenovirusun olması ilə çoxalda bilər;

Bir virus ona genetik olaraq həssas olmayan hüceyrələrə yoluxduqda;

Həssas hüceyrələr icazə verilməyən şəraitdə virusla yoluxduqda.

2. Məhsuldar proses- virusların təkrarlanması (istehsal):

- hüceyrələrin ölümü (lizis).(sitopatik təsir) - intensiv çoxalmanın və çoxlu sayda virus hissəciklərinin əmələ gəlməsinin nəticəsi - yüksək sitopatogenliyə malik virusların yaratdığı məhsuldar prosesin xarakterik nəticəsi. Bir çox viruslar üçün hüceyrə mədəniyyətlərinə sitopatik təsir kifayət qədər tanınan spesifik xarakterə malikdir;

- sabit qarşılıqlı əlaqə, hüceyrə ölümünə səbəb olmayan (davamlı və gizli infeksiyalar) - sözdə hüceyrənin viral transformasiyası.

3. İnteqrativ proses- virus genomunun ev sahibi hüceyrənin genomu ilə inteqrasiyası. Bu, sabit qarşılıqlı təsirə bənzər məhsuldar prosesin xüsusi versiyasıdır. Virus ana hüceyrənin genomu ilə birlikdə çoxalır və uzun müddət gizli qala bilər. Yalnız DNT virusları ev sahibinin DNT genomuna inteqrasiya edə bilər (“DNT-in-DNT” prinsipi). Ev sahibi hüceyrənin genomuna inteqrasiya edə bilən yeganə RNT virusları bunun üçün xüsusi mexanizmə malik olan retroviruslardır. Onların çoxalmasının özəlliyi, əks transkriptaza fermentindən istifadə edərək genomik RNT əsasında provirus DNT-nin sintezi, ardınca DNT-nin ev sahibi genomuna inteqrasiyasıdır.

Virusların becərilməsinin əsas üsulları

1. Laboratoriya heyvanlarının orqanizmində.

2. Toyuq embrionlarında.

3. Hüceyrə kulturalarında - əsas üsul.

Hüceyrə kulturalarının növləri

1. İlkin (tripsinizləşdirilmiş) mədəniyyətlər- toyuq embrionunun fibroblastları (CHF), insan fibroblastları (CHF), müxtəlif heyvanların böyrək hüceyrələri və s. İlkin kulturalar müxtəlif toxumaların hüceyrələrindən, ən çox əzilmə və tripsinizasiya yolu ilə alınır və bir dəfə istifadə olunur, yəni həmişə lazımdır. müvafiq orqanlara və ya toxumalara sahib olmaq.

2. Diploid hüceyrə xətləri təkrar dispersiya və böyümə üçün uyğundur, adətən 20 keçiddən çox deyil (orijinal xüsusiyyətlərini itirir).

3. Bir-birinə bağlı xətlər(heteroploid mədəniyyətlər), təkrar dispersiya və transplantasiya qabiliyyətinə malik olan, yəni çox keçidli, virusoloji işdə ən əlverişlidir - məsələn, Hela, Hep və s.

Hüceyrə kulturaları üçün xüsusi qida mühiti

Mürəkkəb tərkibli müxtəlif sintetik virusoloji qida mühitlərindən, o cümlədən müxtəlif böyümə faktorlarının böyük dəsti - orta 199, İqla, Hanks məhlulu, laktalbumin hidrolizatından istifadə olunur. Mediaya pH stabilizatorları (Hepes), müxtəlif növ qan serumu (dölün dana serumu ən təsirli hesab olunur), L-sistein və L-qlutamin əlavə olunur.

Ətraf mühitin funksional istifadəsindən asılı olaraq, ola bilər hündürlük(yüksək qan zərdabında) - onlar viral nümunələr əlavə etməzdən əvvəl hüceyrə mədəniyyətlərinin böyüməsi üçün istifadə olunur və dəstəkləyən(az serum tərkibli və ya zərdabsız) - virusla yoluxmuş hüceyrə kulturlarını saxlamaq üçün.

Hüceyrə mədəniyyətlərinin viral infeksiyasının aşkar edilə bilən təzahürləri

1. Sitopatik təsir.

2. Daxiletmə orqanlarının müəyyən edilməsi.

3. Virusların floresan anticisimlər (MFA), elektron mikroskopiya, avtoradioqrafiya ilə aşkarlanması.

4. Rəng testi. Optimal hüceyrə mədəniyyəti şəraitində (pH təqribən 7.2) pH göstəricisi kimi fenol qırmızısı olan istifadə edilən mədəniyyət mühitinin adi rəngi qırmızıdır. Hüceyrə proliferasiyası pH-ın asidik tərəfə keçməsi səbəbindən pH-ı və müvafiq olaraq mühitin rəngini qırmızıdan sarıya dəyişir. Viruslar hüceyrə kulturalarında çoxaldıqda hüceyrə lizisi baş verir və mühitin pH və rəngi dəyişmir.

5. Viral hemaqlütininin aşkarlanması - hemadsorbsiya, hemaqlütinasiya.

6. Lövhə üsulu (lövhə əmələ gəlməsi). Bir çox virusların hüceyrə kulturalarına sitolitik təsiri nəticəsində hüceyrənin kütləvi ölüm zonaları əmələ gəlir. Lövhələr müəyyən edilir - viral "hüceyrə-mənfi" koloniyalar.

Virusların nomenklaturası.

Viruslar ailəsinin adı "viridae" ilə bitir, cins - "virus", xüsusi adlar adətən növlər üçün istifadə olunur, məsələn, məxmərək virusu, insanın immun çatışmazlığı virusu - HİV, insan paraqrip virusu tip 1 və s.

Bakterial viruslar (bakteriofaqlar)

Fagların təbii yaşayış yeri bakteriya hüceyrəsidir, buna görə də faqlar hər yerdə (məsələn, tullantı sularında) paylanır. Faqlar digər viruslar üçün də xarakterik olan bioloji xüsusiyyətlərə malikdir.

Morfoloji cəhətdən ən çox yayılmış fag növü başın olması ilə xarakterizə olunur - ikosahedr, spiral simmetriyaya malik bir proses (quyruq) (çox vaxt içi boş bir çubuq və büzülmə qabığı var), tikanlar və proseslər (filamentlər), yəni. görünüşünə görə bir qədər spermatozoidi xatırladır.

Fagların hüceyrə (bakteriya) ilə qarşılıqlı əlaqəsi ciddi şəkildə spesifikdir, yəni bakteriofaqlar yalnız müəyyən növlərə və faqotiplər bakteriya.

Faqlar və bakteriyaların qarşılıqlı təsirinin əsas mərhələləri

1. Adsorbsiya (xüsusi reseptorların qarşılıqlı təsiri).

2. Viral DNT-nin yeridilməsi (fag inyeksiyası) hüceyrə divarının bir hissəsinin lizozim kimi maddələrlə parçalanması, qabığın büzülməsi, quyruq çubuğunun sitoplazmatik membrandan hüceyrəyə itələnməsi və DNT-nin sitoplazmaya yeridilməsi yolu ilə həyata keçirilir. .

3. Faqların çoxalması.

4. Qız populyasiyalarının çıxması.

Faqların əsas xassələri

fərqləndirmək virulent faqlar, prosesin məhsuldar formasına səbəb ola bilən və mülayim faqlar, reduktiv faq infeksiyasına səbəb olur (fagların azalması). Sonuncu halda, hüceyrədəki faj genomu təkrarlanmır, lakin ev sahibi hüceyrənin xromosomuna (DNT-də DNT) daxil edilir (inteqrasiya olunur), faj çevrilir. peyğəmbərlik Bu proses adlanır lizogenez. Əgər bakteriya hüceyrəsinin xromosomuna faqın daxil olması nəticəsində o, yeni irsi xüsusiyyətlər əldə edərsə, bakterial dəyişkənliyin bu forması adlanır. lizogen (fag) çevrilməsi. Genomunda profaq daşıyan bakteriya hüceyrəsi lizogen adlanır, çünki profaq, xüsusi repressor zülalının sintezi pozularsa, litik inkişaf dövrünə keçə və bakteriyanın lizisi ilə məhsuldar infeksiyaya səbəb ola bilər.

Mülayim faqlar bakteriyalar arasında genetik material mübadiləsində vacibdir - transduksiyada(genetik mübadilə formalarından biri). Məsələn, yalnız difteriyanın törədicisi ekzotoksin istehsal etmək qabiliyyətinə malikdir, onun xromosomuna orta dərəcəli bir profaq daxil olur. operon tox, difteriya ekzotoksininin sintezindən məsuldur. Mülayim faq zəhəri toksik olmayan difteriya basilinin lizogenik çevrilməsinə səbəb olur.

Bakteriyalara təsir spektrinə görə faqlar aşağıdakılara bölünür:

Polivalent (lizi ilə yaxından əlaqəli bakteriyalar, məsələn, salmonella);

monovalent (bir növün lizi bakteriyaları);

Tip spesifik (patogenin yalnız müəyyən faj məhsullarını lize edin).

Bərk mühitlərdə faqlar daha tez-tez ləkə testi (koloniyanın böyüməsi zamanı mənfi ləkənin əmələ gəlməsi) və ya agar qatı üsulu (Gracia titrasiyası) ilə aşkar edilir.

Bakteriofaqların praktik istifadəsi.

1. İdentifikasiya (faqotipin təyini) üçün.

2. Fajların profilaktikası üçün (alovlanmaların dayandırılması).

3. Faj terapiyası üçün (disbakteriozun müalicəsi).

4. Ətraf mühitin sanitar vəziyyətini və epidemioloji təhlilini qiymətləndirmək.